新疆戈宝麻花、种子及叶片部位芦丁含量比较

张孟丽，束成杰，张卫明*

(1. 南京师范大学生命科学学院，江苏 南京 210023; 2. 南京野生植物综合利用研究院，江苏 南京 211100)

戈宝麻(GAU BAU KENDER)，罗布麻属，夹竹桃科，多年生宿根草本植物，年生长大约180天，具有很强的抗逆性[1-3]。罗布麻做茶饮和药用已有非常悠久的历史，自《中国药典》中也记载罗布麻有清热利水、平肝安神的功效，用于治疗高血压、头晕、心悸、失眠等症状[4]。戈宝麻作为罗布麻的一种，功效也极其显著。据文献报道，绿原酸、芦丁、金丝桃苷、异槲皮素、紫云英苷、槲皮素、山柰酚是戈宝红麻中主要的化学成分[5]。其中芦丁作为一种活性物质，具有清除自由基、促进成骨细胞的生长、降低血糖、抑制结肠癌和前列腺癌等作用[6-8]。近年来前人对戈宝麻研究开发大多集中于其叶片上，因此，本文用液相色谱法测定新疆戈宝麻不同部位中芦丁的含量，为今后戈宝麻的综合开发利用提供科学依据。

1 实验与方法

1.1 材料与仪器

戈宝麻(产地新疆阿勒泰)南京野生植物综合利用研究院提供；NH-4数显恒温水浴锅金坛市三坛仪器厂；SHZ-DⅢ循环水式真空泵巩义市予华仪器责任有限公司；RE-52AA旋转蒸发器上海亚荣生化仪器厂；KF-1209电子天平凯丰集团有限公司；BCD-183A冰箱合肥荣事达电冰箱有限公司；液相色谱仪美国Agilent公司；微孔滤膜上海嘉鹏科技有限公司。

1.2 试剂

芦丁对照品上海源叶生物科技有限公司；甲醇、乙腈(色谱纯，美国Fisher Scientific公司);磷酸为优级纯；水为纯净水；其他试剂均为分析纯。

1.3 实验方法

1.3.1 芦丁提取

本实验用乙醇作为提取剂，采用回流提取法提取芦丁。将戈宝麻花、种子、叶片除杂干燥，粉碎，称取戈宝麻各部位粉末50g，共3份，分别加入8倍体积分数为80%乙醇在80℃下回流提取3次，每次1 h，合并提取液，离心后过滤，放至室温，减压回收溶剂，收集滤液，微膜过滤，得样品液[9-11]。

1.3.2 色谱条件

流动相：乙腈：0. 25%磷酸，流速1.0 ml/min，检测波长为360 nm[9,10]。

1.3.3 标准曲线

对照品溶液的制备准确称取芦丁对照品各10.0 mg，分别置于10 mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，置4℃冰箱避光保存备用[11,12]。

准确量取上述制备的芦丁对照品溶液，配置成0.02、0.04、0.06、0.08、0.1 mg/mL的芦丁对照品溶液。分别精密吸取20 μl进样，得线性关系良好的回归方程。

1.3.4 样品测定

将各供试品溶液离心后用滤膜过滤，精密吸取20μl进样，用标准曲线计算其芦丁含量。

1.4 数据处理

所有数据均为平均值±平均标准误差(S.E.M)。数据分析使用SPSS 12.0软件完成(SPSS Inc.，Chicage，USA)。

2 结果与分析

2.1 标准曲线绘制

如图1，芦丁标准品的高效液相色谱图，其单一显著出峰时间为10-11min；如图2，芦丁标准曲线，计算得知，芦丁的峰面积与质量浓度呈线性关系，回归方程分别为为y=27.011x-10.74，r =0.9936(y为峰面积，x为质量浓度，r为相关因数)。如图3，新疆戈宝红麻花、种子、叶的供试品溶液高校液相色谱图；

图1 芦丁标准品高效液相色谱图Fig.1 Standard chromatographic separation of figure ofrutin from GAU BAU KENDER

图2 芦丁标准曲线Figure 2 The standard curve ofrutin

图3 新疆戈宝麻花、种子、叶片供试品溶液高校液相色谱图Figure 3 Sample chromatographic separation of figure of rutin from GAU BAU KENDER

2.2 精密度试验

如表1，取各部位供试品溶液，精密吸取20 ul，按“1.3.2”色谱条件分别连续进样6次，测定各供试品溶液中芦丁的峰面积，计算芦丁含量的RSD值，以评价仪器的精密度[13]。测得花、种子、叶中芦丁含量的RSD值分别为2.7%，2.2%，2.8%(n=6)，表明仪器精密度良好。

2.3 稳定性试验

如表2，取各部位供试品溶液，按“1.3.2”色谱条件，分别在0、2、4、6、8、10 h进样20 ul，测定各供试品溶液中芦丁的峰面积，计算芦丁含量的RSD值，以评价供试品溶液的稳定性[14,16]。测得花、种子、叶中芦丁含量的RSD值分别为2.8%，2.6%，2.5%(n=6)，表明各供试品溶液在配制24 h内稳定。

2.4 重复性试验

如表3，取不同部位供试品溶液各3份，并进行HPLC测定，记录峰面积计算芦丁含量的RSD值，以评价方法的重现性[17,18]。测得花、种子、叶片中芦丁含量的RSD值别为1.86%，2.9%，2.3% (n=3)，表明该方法的重复性满足要求。

表1 精密度实验结果Table 1 Result of accuracy experiment

表2 各部位供试品溶液稳定性测定结果Table 2 Result of stability test of the sample solution in the flowers

表3 重现性测定结果Table 3 Result of reproducibility experiment

2.5 回收率实验

如表4，分别取戈宝麻花、种子、叶片样品液各1ml，加入对照品，制备供试品溶液，并在相同色谱条件下进样20 μl，测定峰面积，计算平均加样回收率及RSD值。测得花、种子、叶片中芦丁平均加样回收率分别为98.65%，100.40%，96.9%；RSD 分别为 2.7%，0.09%，2.6% (n=6)。

表4 芦丁加样回收试验结果Table 4 Recovery of flowers, seeds and leaves of GAU BAUKENDER.

2.6 戈宝麻花、种子、叶各部位芦丁含量比较

如表5，新疆戈宝麻花、种子、叶中均含芦丁，花、种子、叶中芦丁的得率分别为0.094%，0.014%，0.6%，因此，戈宝红麻三个部位中芦丁的含量分布为：叶>花>种子。

表5 花、种子、叶片部位芦丁含量比较Table 5 Comparison of the content of rutinin flowers, seeds and leaves.

3 讨论

本研究发现新疆戈宝麻花中芦丁得率为0.094%，种子中芦丁得率为0.014%，叶中芦丁得率为0.6%，其叶中芦丁含量与石秋梅[22]等研究发现的新疆产罗布红麻中芦丁含量结果非常接近。目前戈宝麻产品大多集中于对叶片的开发利用，因此本文通过高效液相层析对戈宝麻花、种子、叶片三个部位的芦丁含量进行分析，发现芦丁的含量分布为：叶﹥花﹥种子，由此看出，研究不同部位戈宝麻中芦丁含量，有利于更合理地利用戈宝麻资源，创造更高的附加值。