肝康灵颗粒的质量标准研究

刘玉

摘  要：本实验对肝康灵颗粒的质量标准进行研究。含量测定方法：采用奥泰公司C18色谱柱（220mm×4.6mm，5μm），乙腈-0.1%磷酸-四氢吷喃（10∶90∶0.8）为流动相，检测波长为236nm，流速为1.0ml/min，柱溫为30℃，栀子苷在0.01～1.6mg·mL-1范围内呈良好的线性关系。结论：本法简便、准确，可作为肝康灵颗粒的质量标准。

关键词：肝康灵颗粒;质量标准;研究

栀子为肝康灵颗粒主要成分之一。栀子是茜草科植物栀子的果实，具有护肝、利胆、降压、镇静、止血、消肿等作用。《药性论》记载：“杀蟅虫毒，去热毒风，利五淋，主中恶，通小便，解五种黄病，明目，治时疾除热及消渴口干，目赤肿痛。”栀子具有抗哮喘、抗炎镇痛、保肝利胆、抗病毒、抗肿瘤、抗氧化、促进韧带细胞增殖、促进黑色素生成等作用[1-2]。

栀子含有栀子甙（gardenoside）、都桷子素龙胆双糖甙（genipin-1-gentiobioside）、栀子酮甙（gardo-side）、去乙酰车叶草甙酸甲酯（methyl deacetyl asperulosidate）、绿原酸（chlorogenic acid）、藏红花酸（cro-cetin）、熊果酸（ursolic acid）、芸香甙（rutin）、β-谷甾醇（β-sitosterol）等成分。本实验拟增加肝康灵颗粒中栀子苷含量进行测定。本实验对肝康灵颗粒的质量标准进行研究。

1 仪器与试药

1.1 仪器：OLABO双排六孔恒温水浴锅（济南鑫井医疗器械有限公司）;MS204精密天平（济南思卓医疗器械有限公司）;GI-3000-14四元低压梯度液相色谱仪（武汉集思仪器设备有限公司）;721型联创仪器可见分光光度计（南京联创分析仪器制造有限公司）;RephiLe Direct-Pure Genie 超纯水系统（上海乐枫生物科技有限公司）。

1.2 色谱柱：奥泰公司C18色谱柱（220mm×4.6mm，5μm）。

1.3 对照品：栀子苷对照品（中国药品生物制品检定所）。

1.4 试剂：甲醇（山东省阳信隆泰化工科技有限公司）、磷酸（山东省阳信隆泰化工科技有限公司）、乙腈（山东省阳信隆泰化工科技有限公司）、四氢吷喃（山东省阳信隆泰化工科技有限公司）。

1.5 试药：肝康灵颗粒

2 测定方法确定

2.1 色谱条件

分别考察乙腈-甲醇-水（5：45：50），乙腈-0.1%磷酸-四氢吷喃（30∶70∶0.8），乙腈-0.1%磷酸-四氢吷喃（20∶80∶0.8）乙腈-甲醇-0.4%冰醋酸溶液（10：18：62），乙腈-甲醇-0.4%磷酸溶液（2：18：80），乙腈-0.1%磷酸-四氢吷喃（10∶90∶0.8）不同比例的流动相，流动相为乙腈-0.1%磷酸-四氢吷喃（10∶90∶0.8）时分离效果最好，所以采用乙腈-0.1%磷酸-四氢吷喃（10∶90∶0.8）为本次实验的流动相。依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[5-6]。流动相：乙腈-0.1%磷酸-四氢吷喃（10∶90∶0.8）为流动相，检测波长：236nm，流速：1.0ml·min-1。柱温：30℃。理论板数按栀子苷峰计算应不得低于2000。

2.2 对照品溶液的制备

精密称取栀子苷对照品适量，置容量瓶中，加流动相制成每1mL含0.1mg的溶液，即得。

2.3 供试品溶液的制备

取肝康灵颗粒适量，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理20分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液即得。

2.4 专属性试验

取除栀子以外的原料，按样品制备工艺制成阴性对照样品，按上述实验方法检测，结果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。

2.5 精密度试验

取对照品溶液按上述色谱条件，精密吸取20μl，连续进样6次，记录峰面积。结果，RSD=0.69%，表明本方法精密度良好。

2.6 对照品的线性考察

精密称取适量栀子苷对照品，加入流动相溶液使溶解分别配制成每毫升含0.01、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6毫克的溶液。分别精密上述溶液吸取20μL，注人液相色谱仪，依照2.1项下的色谱条件测定，记录色谱峰。以峰面积（Y）为纵坐标，对照品进样量（X）为横坐标，绘制标准曲线。结果表明，栀子苷在0.01～1.6mg·mL-1范围内呈良好的线性关系。

2.7 重现性试验

称取同一批的肝康灵颗粒样品6份，按测定方法项下的方法制备供试品溶液，测定含量，并计算样品的RSD值，结果RSD为0.68%，结果表明此方法的重现性良好。

2.8 回收率试验

采用加样回收试验，共测定六份样品。栀子苷回收率99.6%。

2.9 样品含量测定

依照上述含量测定方法，测定栀子苷冻干粉三批样品。

4 结论

本实验分离效果好、方法简便、快捷、准确、专属性好，可用于肝康灵颗粒质量标准研究。

参考文献

[1]方尚玲，刘源才，张庆华，林英，陈道玉，李世杰.栀子苷镇痛和抗炎作用的研究[J].时珍国医国药，2008（06）.

[2]张文娟，李茂星，张泉龙，邱建国，尉丽力，贾正平.栀子苷的快速提取分离及其镇痛抗炎作用研究[J].中国实验方剂学杂志，2012（21）.

[3]Antioxi-dant activity of Gardenia jasminoides Ellis fruit extracts. Debnath T，Park P J，Deb Nath N C，et al. Food Chemistry，2011.

[4]Effects of Gar-deniae Fructus extract and geniposide on promoting ligament cell proliferation and collagen synthesis. Chen Q C，Zhang W Y，Kim H J，et al. Phytotherapy Research，2010.

[5]吴亚超，杨文静，张磊，赵万顺，张文生，叶正良.栀子中栀子苷等7个化学成分测定及质量评价[J].中国药学杂志，2016（10）.

[6]张留记，刘钦松，屠万倩，刘怡.RP-HPLC法同时测定不同产地栀子中栀子苷、西红花苷-Ⅰ和西红花苷-Ⅱ的含量[J].中国药房，2011（07）.