用山银花与金银花制备双黄连口服液质量比较研究

吴若溪

摘  要：本實验对用山银花与金银花制备双黄连口服液质量比较研究。含量测定方法：采用迪马C18钻石色谱柱（220mm×4.6mm，5μm），流动相：（A）0.3%的甲酸水溶液、（B）乙腈;线性梯度洗脱，检测波长：280nm（绿原酸），324nm（黄芩苷），277nm（连翘苷），流速为1.0ml/min，柱温为30℃。黄芩苷在0.08～0.4mg·mL-1，连翘苷在0.04～0.2mg·mL-1，绿原酸在0.008～0.04mg·mL-1范围内线性关系良好。结论：用山银花与金银花制备双黄连口服液绿原酸、黄芩苷、连翘苷含量均符合药典标准。

关键词：双黄连口服液;质量标准;研究

双黄连口服具有疏风解表，清热解毒的功效。双黄连口服液具有抗炎、抗氧化、抑制病毒的作用[1-2]。双黄连口服液常用于呼吸道合胞病毒所致急性下呼吸道感染、小儿支原体肺炎、上呼吸道感染等治疗[3-5]。《中国药典》于2005年版之前的28年间，忍冬与灰毡毛忍冬在中医药临床应用与中医药剂中一直同作金银花应用。2010年版《中国药典》对忍冬与灰毡毛忍冬进行分列，其中忍冬被列为金银花唯一的药源植物，而灰毡毛忍冬收藏在山银花中。山银花是忍冬科植物灰毡毛忍冬、红腺忍冬、华南忍冬或黄褐毛忍冬的干燥花蕾或带初开的花。金银花为忍冬科植物忍冬的花蕾或带初开的花。山银花与金银花功效均为清热解毒，疏散风热。山银花与金银花功效均用于痈肿疗疮，热毒血痢，风热感冒，喉痹，丹毒，温热发病。本实验对山银花与金银花制备双黄连口服液质量进行比较研究。

1 仪器与试药

1.1 仪器：梅特勒ME204E分析天平（上海楚柏实验室设备有限公司）;LC-100（梯度）数字化电脑智能控制高效液相色谱仪（上海伍丰科学仪器有限公司）;EasySepTM-1010高效液相色谱仪（徐州华纳精密仪器有限公司）;英国艾德姆衡器AVT减震天平台（艾德姆衡器（武汉）有限公司）。

1.2 色谱柱：迪马C18钻石色谱柱（220mm×4.6mm，5μm）。

1.3 对照品：绿原酸

1.4 试剂：甲醇（四川华源盛泰生物科技有限公司）、乙腈（四川华源盛泰生物科技有限公司）、甲酸（四川华源盛泰生物科技有限公司）。

1.5 试药：双黄连口服液（自制）

2 测定方法确定

2.1 色谱条件

依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下。流动相：（A）0.3%的甲酸水溶液、（B）乙腈;线性梯度洗脱依次为14%～20%/0～12min，20%～30%/12～13min，30%～65%/13～25min和65%/25～35min;柱温：30℃;流速：1.0mL/min[6]。检测波长：280nm（绿原酸），324nm（黄芩苷），277nm（连翘苷），流速：1.0m·min-1。柱温：30℃。理论板数按绿原酸峰计算应不得低于2000。

2.2 对照品溶液的制备

精密称取绿原酸、黄芩苷、连翘苷对照品适量，置容量瓶中，加甲醇制成每1mL含0.2mg（黄芩苷）、0.02mg（绿原酸）、0.1mg（连翘苷）的溶液，即得。

2.3 供试品溶液的制备

精密量取双黄连口服液，用5甲醇溶解超声溶解，并转入25mL量瓶中，定容，摇匀，过0.45μm微孔滤膜，滤液作为供试品溶液。

2.4 精密度试验

取对照品溶液按上述色谱条件，精密吸取20μl，连续进样6次，记录峰面积。结果，RSD=0.72%，RSD=0.69%，RSD=0.66%，表明本方法精密度良好。

2.5 对照品的线性考察

精密称取绿原酸、黄芩苷、连翘苷对照品适量，置容量瓶中，加甲醇制成每1mL含2mg（黄芩苷）、0.2mg（绿原酸）、1mg（连翘苷）的溶液，分别取1、2、3、4、5毫升，置于25毫升容量瓶中，加甲醇定容。分别精密上述溶液吸取20μL，注人液相色谱仪，依照2.1项下的色谱条件测定，记录色谱峰。以峰面积（Y）为纵坐标，对照品进样量（X）为横坐标，绘制标准曲线。结果表明，黄芩苷在0.08～0.4mg·mL-1，连翘苷在0.04～0.2mg·mL-1，绿原酸在0.008～0.04mg·mL-1范围内呈良好的线性关系。

2.6 重现性试验

称取同一批的双黄连口服液样品6份，按测定方法项下的方法制备供试品溶液，测定含量，并计算样品的RSD值，结果RSD为0.78%、0.65%、0.81%，结果表明此方法的重现性良好。

2.7 样品含量测定

依照上述含量测定方法，分别测定山银花和金银花制备双黄连口服液三批样品。

3 结论

本实验对山银花与金银花制备双黄连口服液质量进行比较研究。本实验采用山银花和金银花分别自制了6批双黄连口服液.用山银花和金银花制备双黄连口服液绿原酸、黄芩苷、连翘苷含量均符合药典标准。

参考文献

[1]Yuan Gao，Lei Fang，Runlan Cai，Chuanjie Zong，Xi Chen，Juan Lu，Yun Qi.Shuang-Huang-Lian exerts anti-inflammatory and anti-oxidative activities in lipopolysaccharide-stimulated murine alveolar macrophages[J]. Phytomedicine.2013.

[2]莫红缨，赖克方，江永南，谢建屏，谭亚夏，钟南山.双黄连对呼吸道合胞病毒感染的气道上皮细胞炎症因子释放的影响[J].广州医学院学报， 2005（02）.

[3]孔晓棠，江载芳，照日格图，顾岑，江沁波，王树欣，申昆玲，王雪莲，买颖，阎静.双黄连雾化吸入治疗呼吸道合胞病毒所致急性下呼吸道感染[J].中华儿科杂志，1996（01）.

[4]樊树华，贺一新.双黄连口服液（儿童型）联合阿奇霉素治疗小儿支原体肺炎的临床研究[J].中国实用医药，2017（15）.

[5]史晓娟，贺一新.双黄连口服液（儿童型）联合西药治疗儿童上呼吸道感染的临床效果观察[J].海峡药学，2017（02）.

[6]杜英峰，张兰桐，靳怡然，许慧君，刘静荣，张立段.多波长RP-HPLC法测定双黄连口服液中黄芩苷、绿原酸和连翘苷[J].中成药，2009（09）.