血小板假性减低的原因及其校正分析

孙悦

血小板的生成是产生于骨髓中成熟的巨核细胞，由胞质脱落而来，寿命一般为7～14 d(半寿期约3 d)，受血小板生成素的调控。全身大概有1/3的血小板滞留于脾窦以及脾髓细胞间，该聚集被称为“脾池化”现象，脾池中的血小板与循环池中的血小板之间能够自由交换，具有止血以及凝血的功能。血细胞分析中的一个重要指标也是血小板活化的一个重要指标，血小板平均体积升高，血小板的体积增大、活性增强。有研究发现［1］，血小板平均体积增大与急性冠状动脉、脑梗的发生、发展以及预后情况有着密切的联系。当前检验血小板技术的金标准需要进行手工计数，分类也要在镜下进行，虽然耗费人力但是经过许多年的验证可知准确度毋庸置疑，不管目前检验技术如何变化，手工检验依然最为准确。随着医疗水平的不断发展，检测仪器的不断更新换代，该检测的方法具有自动化程序高、检测设备的参数多样化、检测速度快以及环保性高的优点受到欢迎［2］。但是在检测的过程中总会不可避免的发生血小板假性减低的现象，本文就血小板假性减低的原因及其校正进行分析报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取本院2016年8月～2017年9月收治的68例血小板假性减低患者，其中男34例，女34例；年龄21～68岁，平均年龄(42.2±1.6)岁。根据血小板对不同检测发生的聚集情况分为多种聚集组(8例)和单一聚集组(60例)。对其进行重新抽血检测血小板，用不同的抗凝剂同时进行检测，再采集末梢新鲜血液进行涂片镜检。

1.2 方法 根据全国血液学的复检规则将血小板假性减低患者的标本对其形态、分布情况、数量等进行检查，并且使用手工显微镜计数的方式统计监测值。仪器分析法：采用BC-6800型全自动血液细胞分析仪进行检测，试剂采用含有枸橼酸钠抗凝剂的真空管以及含有EDTA-K2抗凝剂的真空管采集血标本。

具体的方法：告知所有患者采血的注意事项，次日采集每例患者新鲜末梢血液，根据规定的时间稍作停留之后立即对其进行检测；而装入枸橼酸钠抗凝真空管以及EDTA-K2抗凝管内的静脉血使用及其进行检测(放置15 min后进行检测)。

再使用枸橼酸钠抗凝真空管以及EDTA-K2抗凝管内的标本制作成血涂片，通过镜检的方法观察血小板的分布以及形态情况，操作规程按照《全国临床检验操作规程》进行。

1.3 观察指标 分析比较EDTA-K2抗凝剂、枸橼酸钠抗凝剂、新鲜的末梢血、手工镜检检测的血小板计数。

1.4 统计学方法 采用SPSS22.0统计学软件处理数据。计量资料以均数±标准差()表示，采用t检验。P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

在EDTA-K2抗凝剂、枸橼酸钠抗凝剂、新鲜的末梢血、手工镜检检测中，多种聚集组血小板计数水平分别为(65.02±1.58)×109/L、(63.25±2.64)×109/L、(155.36±4.89)×109/L、(161.36±6.15)×109/L，单一聚集组血小板计数水平分别为(63.21±1.05)×109/L、(162.15±10.35)×109/L、(161.22±8.22)×109/L、(163.25±7.69)×109/L。

单一聚集组中血小板与EDTA-K2抗凝剂均发生聚集现象，且EDTA-K2抗凝剂检验血小板计数均小于枸橼酸钠抗凝剂、新鲜的末梢血以及手工镜检检测，差异具有统计学意义(P＜0.05)；枸橼酸钠抗凝剂、新鲜的末梢血、手工镜检检测的血小板计数水平比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。

多种聚集组中血小板与枸橼酸钠以及EDTA-K2抗凝剂均发生聚集现象，EDTA-K2抗凝剂、枸橼酸钠抗凝剂检测血小板计数水平均小于新鲜的末梢血、手工镜检检测，差异具有统计学意义(P＜0.05)；EDTA-K2抗凝剂与枸橼酸钠抗凝剂检测血小板计数水平比较，差异无统计学意义(P＞0.05)；新鲜的末梢血与手工镜检检测血小板计数水平比较，差异无统计学意义有(P＞0.05)。

3 讨论

血小板能够参与初期的凝血过程，可以起到凝血以及促进止血的功能，在伤口愈合、止血、血栓形成、炎症反应以及术中出血等过程中均有着重要的临床指导意义，而且血小板计数与许多血液病患者的病情有着密不可分的关系，对于血液病患者而言血小板计数减少需要输入血小板进行治疗，输入血小板也会给患者带来了一定的经济负担，而且输入的过程中会诱发免疫反应以及感染的发生，因此正确的检测结果有着至关重要的作用。在本研究中使用全自动功能细胞分析仪器(BC-6800型号)对血小板的计数以及形态、分布等进行分析、统计，并且根据不同的信号将血小板的体积分布绘制出来，使用该仪器检测的过程中由于血小板与红细胞计数的检测是在同一个通道中进行检测，故而仅能通过体积的大小进行区别，血小板的计数容易受到红细胞的碎片以及小红细胞的影响，不仅如此，还有多种因素能够引起血小板计数的减低［3］。

影响结果的因素：①采血因素：采集末梢血穿刺的部位皮肤过于冷、入针过浅、或者用力挤压均会促使组织凝血因子混入血液标本中，从而产生肉眼看不见的小凝血块，血液在毛细血管中反复积压的时间过长，便会引起形态等的改变；②吸收的标本量不足也是导致血小板计数减少的原因，同时也会引起白细胞以及红细胞的计数减少；③标本未经混匀便进行检测，会造成检测结果的偏差出现血小板计数减低的现象，采集的标本在凝血试管中放置的时间过短，采集末梢血做血细胞分析时如果马上进行细胞计数检测，则会发生血小板计数偏低的现象，原因是与EDTA抗凝剂混合使得血小板的形态发生变化，其外膜形成的微小管游离端向外侧伸展，从而在血小板周围形成了血小板伪足，会出现其相互缠绕的情况，最后形成血小板可逆聚集体，引起计数结果的降低；④大血小板影响，血细胞分析仪计数血小板原理设计计数阈值时，当血小板＞30 fl，血小板会被误认为小红细胞从而不进行计数，当血小板＜2 fl，仪器会将其作为干扰不进行计数，也会造成检验的偏差；⑤患者长期使用青素、地高辛、硫酸镁等药物时也会引起血小板的减少，原因为药物与血浆蛋白结合形成抗原、刺激机体产生血小板抗体有关，这种现象引起的血小板减少被称为药源性血小板减少，通常在停药之后的15～20 d恢复正常；⑥大量输入血液也会造成血小板计数的减少，一般停止输血后的4～6 d即可恢复正常；⑦抗凝剂的影响，如果要获得可靠的检测数值，抗凝剂是很重要的影响因素之一，抗凝剂过期或者抗凝剂的剂量不足均会引起抗凝效果的不同，从而能够产生血小板的聚集，引发血小板计数的减少，该原因形成的血小板假性较少，通常没有科室的特异性，一般与器材的购置不合理有关，而且血标本在试管中放置的时间过长也会引起血小板的减少［4］。

经检验，多种聚集组中血小板与枸橼酸钠以及EDTA-K2抗凝剂均发生聚集现象，EDTA-K2抗凝剂、枸橼酸钠抗凝剂检测血小板计数水平均小于新鲜的末梢血、手工镜检检测，差异具有统计学意义(P＜0.05)；EDTA-K2抗凝剂与枸橼酸钠抗凝剂检测血小板计数水平比较，差异无统计学意义(P＞0.05)；新鲜的末梢血与手工镜检检测血小板计数水平比较，差异无统计学意义有(P＞0.05)。针对应用抗凝剂发生聚集现象导致的血小板计数减低的现象总结、分析其发生的原因，再根据具体的情况重新检测，找出问题的所在进一步进行研究。

针对假性血小板减低的情况进行了如下的纠正措施：在采血的过程中先检测抗凝试管的合格情况，机器检测血小板计数减低时应该慎重对待，需要采集患者新鲜的末梢血再次进行计数复检，只有当机器的检测结果与手工检测的结果相接近才能给出试验结果报告，否则会引起医生的误诊，加重患者的负担［5］。

综上所述，抽血不当或者凝血剂不合格均会造成假性血小板的发生，应该在采血后充分混匀血标本，按照规定静止相应的时间再次混匀之后上机检验，如果发现血小板降低的情况应该慎重对待，在手工镜检检测复测之后给予定论，以提高检测的准确率，为临床治疗提供可靠的依据。