HPLC法测定养阴润肺糖浆中梓醇的含量

何凤兰　郑晓阳　冯丽萍　黄文锋

【摘 要】 目的：建立HPLC法测定养阴润肺糖浆中梓醇的含量。方法：用高效液相色谱法Diamonsil  TM-C18（4.6mm×150mm，0.5μm）色谱柱，以乙腈-0.1%磷酸溶液（1∶99）为流动相，检测波长为210nm。结果：梓醇的线性范围为2～18μg·mL-1（r=0.9996）;平均回收率为 99.4%（n=6），RSD=0.6%。结论：该方法专属性强，快速、方便，分离度好，无其他成分干扰，适合于养阴润肺糖浆中梓醇的含量测定，值得推广应用。

【关键词】 HPLC;养阴润肺糖浆;梓醇

【中图分类号】R284.2 【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2020）23-0021-03

Determination of Catalpol in Yangyin Runfei Syrup by HPLC

HE Fenglan1 ZHENG Xiaoyang1 FENG Liping1 HUANG Wenfeng2

1.Department of Pharmacy， Yangjiang Peoples Hospital of Guangdong， Yangjiang 529500， China;

2.Guangdong Yangjiang Testing and Inspection Center， Yangjiang 529500， China

Abstract：Objective To establish an HPLC method for the determination of catalpol in Yangyin Runfei Syrup.Methods A Diamonsil TM-C18 （4.6mm×150mm，0.5μm） chromatographic column was used for high performance liquid chromatography with acetonitrile-0.1% phosphoric acid solution （1∶99） as the mobile phase. The detection wavelength was 210nm.Results The linear range of catalpol was 2～18μg·mL-1 （r=0.9996）; the average recovery was 99.4% （n=6） and RSD=0.6%. Conclusion This method has strong specificity， fast， convenient， good resolution and no interference from other components. It is suitable for the determination of catalpol in Yangyin Runfei Syrup， and it is worthy of popularization and application.

Keywords：HPLC;Yangyin Runfei;Syrup Catalol

養阴润肺糖浆是我院自拟处方中成药制剂，由地黄、麦冬、玄参、川贝母、白芍、牡丹皮等8味药材组成[1]，深得广大患者的认可，销量较大。养阴润肺糖浆主治阴虚肺热引起的咳嗽、咽干、喉痛声哑、痰中带血等症，疗效显著。但其自拟标准中还没有含量测定项目，地黄在该处方中属君药，针对地黄的有效成份是梓醇进行检测，以控制其内在有效成分，同时将其作为养阴润肺糖浆的质量控制指标，保证产品质量，提高疗效，故增加含量测定项目。本实验采用HPLC法，能有效分离养阴润肺糖浆中地黄的主要成分梓醇[2]，很好地控制产品质量。

1 仪器与试药

1.1 仪器 SHIMADZU—LC20A型高效液相色谱仪（日本岛津，UV检测器）;FA135S型电子分析天平（上海精密仪器仪表有限公司）;KQ-3200DV型数控超声波清洗器（昆山超声仪器有限公司）及各种玻璃仪器[3]。

1.2 试药 梓醇对照品（批号：110808-200508，中国药品生物制品检定所）;供试品：养阴润肺糖浆（批号：180327，180417，180424），缺地黄的养阴润肺糖浆（批号：180314，阳江市人民医院）;乙腈（色谱纯）、磷酸（分析纯）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件与系统适用性试验 梓醇照高效液相色谱法[4]（通则0512）[5]色谱条件与系统适用性试验。色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，TM-C18（4.6mm×150mm，0.5μm），流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液（1∶99）;流速：1.0mL/min;检测波长：210nm;柱温：25℃。进样量10μL，流速1mL·min-1。结果在上述色谱条件下，理论塔板数按梓醇峰计算不低于5000，梓醇分离良好，阴性无干扰，如图1～3所示。

取供试品溶液10μL，注入高效液相色谱仪中，检测，记录供试品色谱图，结果测得梓醇峰理论塔板数为5230，分离度为2.431，拖尾因子为1.03，符合规定。

2.2 对照溶液的制备 精密称取干燥至恒重的梓醇对照品10.0mg，加流动相定容至50mL，摇匀，得0.2mg/mL的梓醇对照品溶液;精密量取上述溶液0.5mL，置10mL量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，即得浓度为10μg/mL的梓醇对照品溶液。

2.3 供试品溶液的制备 精密量取养阴润肺糖浆2.0mL，加流动相定容至50mL，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。

2.4 阴性对照液的制备 本院的投料处方去掉地黄，制法： 按照本院投料处方与工艺，制成缺地黄的养阴润肺阴性对照糖浆1000mL（批号：180314，阳江市人民医院），再按“2.3供试品溶液的制备”方法制备缺地黄的阴性对照溶液，注入高效液相色谱仪中，测定，结果阴性糖浆在梓醇峰相应保留时间位置没有干扰，如图3所示。

2.5 线性关系考察 精密吸取上述制得的0.2mg/mL的梓醇对照品溶液1、3、5、7、9mL分别置100mL容量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，即得2μg/mL、6μg/mL、10μg/mL、14μg/mL、18μg/mL的标准液。分别吸取10μL，注入高效液相色谱仪中，测量峰面积A。以对照品溶液浓度C为横坐标（X），峰面积A为纵坐标（Y）[6]，绘制标准曲线：Y=5815.5X-3439.1，r=0.9996。结果梓醇在2～18μg范围内具有良好的线性关系。

2.6 精密度试验 精密量取对照品溶液10μL，连续进样6次，测定梓醇的峰面积A，结果平均峰面积为13616.3，RSD=0.14%，结果表明精密度良好。

2.7 重复性试验 取同一批号（180327，含量为0.2765mg/mL）的养阴润肺糖浆6份，按“2.3供试品溶液的制备”方法制备供试品溶液，注入高效液相色谱仪中，测定，结果RSD为0.5%，表明本方法重现性良好。

2.8 稳定性试验 取同一养阴润肺糖浆（批号：180327）供试品溶液，分别于供试品溶液制备后的0、2、4、6、8h进行测定，结果RSD=0.05%，表明供试品溶液在制备后8h内稳定。

2.9 准确度（加樣回收率）试验 取已知含量的养阴润肺糖浆（批号：180327、0.2765mg/mL）各6份，置50mL量瓶中，再分别加入梓醇对照品适量，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得加样回收供试品溶液。吸取供试品溶液各10μL，分别注入高效液相色谱仪中，计算回收率，结果平均回收率为99.4%（n=6），RSD=0.6%，表明本法准确度良好，见表1。

2.10 含量测定 取3批养阴润肺糖浆，分别按“2.3 供试品溶液的制备”方法制备供试品溶液，吸取供试品溶液各10μL，分别注入高效液相色谱仪中，测定并计算含量，结果见表2。

3 讨论

由于梓醇性质的影响，检测波长选择210nm;梓醇的吸收峰较大且干扰小，效果较好，故选择210nm波长。

文献报道[7]梓醇 HPLC 图谱中梓醇色谱峰形不太好，与相邻峰的分离度不高，对实验结果的准确性易造成影响。本实验通过实验进行了合理调整，确定实验的流动相条件以乙腈-0.1%磷酸溶液（1∶99）为流动相。由于供试品杂质峰比较多，可在供试品制备过程中，先加10mL甲醇，过微孔滤膜（0.45μm），挥干，再加流动相溶解并定容至50mL，供试品杂质浓度降低，达到更理想的分离效果。

本方法快速、方便，分离度好，无其他成分干扰，适合于养阴润肺糖浆中梓醇的含量测定。

参考文献

[1]陈华国，陈庆，周欣，等.HPLC测定养阴清肺膏中梓醇含量[J].中国中医药现代远程教育杂志，2007，5（9）：36.

[2]李云，孙利伟，赵小顺，等.不同品种地黄干茎中梓醇含量比较[J]. 临床医药实践杂志， 2009，18（8）：1931-1933.

[3]国家药典委员会.中国药典（一部）[M]. 北京：化学工业出版社，2015：125.

[4]国家药典委员会.中国药典（四部）[M]. 北京：化学工业出版社，2015：59.

[5]莫慧贞，许则省.对芒果止咳片中马来酸氯苯那敏的含量测定[J].今日药学杂志，2009，19（4）：40-41.

[6]罗燕燕，张绍青，索建政，等.高效液相色谱法测定地黄中梓醇的含量[J]. 中国药学杂志，1994，29（1）：38-40.

（收稿日期：2020-07-02 编辑：程鹏飞）

作者简介：何凤兰（1969-），女，汉族，专科，主管药师，研究方向为药品质量控制。E-mail：he2013lan@126.com