超高效液相色谱柱后衍生装置测定饮用水中的草甘膦

陈 颖 王珍妮 宋 月 白 欣

（大连市疾病预防控制中心理化技术检验所，辽宁 大连 116021）

草甘膦（glyphosate）是一种非选择性、无残留灭生性除草剂[1]，对多年生根杂草非常有效[2]，广泛用于橡胶、桑、茶、果园及甘蔗地。目前对草甘膦检测多采用液相色谱－质谱法（HPLC-MS）[3-4]和高效液相色谱柱后衍生法[5-6]。本次研究选用超高效液相色谱柱后衍生装置，以生活饮用水中残留的草甘膦为研究对象，建立分析的方法，并得到了满意的结果，可以满足对生活饮用水中残留草甘膦测定的要求。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 样品：生活饮用水源水、二次加压水。

1.1.2 仪器与试剂：Waters超高效液相色谱柱后衍生装置（H-class型）；超高速低温离心机（HITACHI cf16RXⅡ，10000r/min）；旋转蒸发仪（国产）；氮吹仪（国产）；多功能滤膜（孔径0.22μm，Waters）。草甘膦标准品（纯度均≥98.0%，Dr.公司）；甲醇（德国Merck，均为色谱纯）；邻苯二醛（阿拉丁）；β-巯基乙醇（天津福晨化学品厂）；磷酸、磷酸二氢钾、EDTA、氯化钠、氢氧化钠、硼酸、氢氧化钾（均为国药集团，分析纯）。

1.2 方法

1.2.1 标准溶液的配制：准确称取草甘膦固体标准品0.01000 g溶于水并定容至10 mL，可得1 mg/mL的标准储备液，存放于-20 ℃的聚丙烯管中。

1.2.2 样品前处理

1.2.2.1 样品浓度≥100 μg/L时，不需要浓缩，取9.9 mL样品和0.1 mL 0.1 mol/L的EDTA，经0.22 μm滤膜后，取50 μL进样测定。

1.2.2.2 样品低于检出限时需要对水样进行浓缩，取700 mL水样，分三次（250、250、200 mL）加入500 mL圆底烧瓶进行旋蒸，并每次加入适量盐酸（5、5、4 mL），待蒸干后，用1 mL流动相进行溶解并过0.22 μm滤膜，取50 μL进样测定。

1.2.3 添加回收实验：取直接测定浓度≤100 μg/L的水样700 mL，加入2 μg/mL的草甘膦标准溶液1 mL，依据1.2.2.2进行前处理并测定。

1.2.4 实验条件。色谱条件：色谱柱：Waters IC-PakTM Ion Exclusion（7.8 mm×150 mm）；进样量：50 μL；流动相：阳离子交换流动相。

2 结果

2.1 检出限：进样量为5ng绝对量的谱图S/N＞3，本方法的检出限为0.1 μg/mL。

2.2 标准曲线：标准系列见表1、图1、图2。

表1 草甘膦标准系列

图1 草甘膦标准曲线

图2 草甘膦标准系列的谱图

2.3 仪器精密度：见表2、图3。

2.4 添加回收实验：见表3。

3 讨 论

3.1 标准溶液保存与储存：准确称取草甘膦标准样品0.01000 g 4份，分别溶于水并定容至100 mL，1号于玻璃标准溶液瓶中4 ℃保存，2号于聚丙烯标准溶液瓶中4 ℃保存，3号于玻璃标准溶液瓶中-20 ℃保存，4号于聚丙烯标准溶液瓶中-20 ℃保存。在1个月后和2个月后分别稀释成标准系列进行测定，发现在第1个月后的测定中，于聚丙烯标准溶液瓶中-20 ℃保存的标准储备液响应值就已经降低很多，其他3支管中稀释的标准系列低浓度端几乎无响应。在第2个月后的测定中，于聚丙烯标准溶液瓶中-20 ℃保存的标准储备液稀释的标准系列低浓度端几乎无响应。因此对于0.1 mg/mL的标准储备液只能在聚丙烯标准溶液瓶中-20 ℃保存1个月。

3.2 离子柱和对应流动相的选择：本实验选用的是Waters 公司生产的IC-PakTM Ion Exclusion（7.8 mm×150 mm）色谱柱，为阳离子交换柱，因此使用阳离子流动相。

表2 草甘膦仪器精密度测定

图3 绝对量为20 ng和200 ng精密度

表3 草甘膦回收实验结果

3.3 流动相比例的选择：阳离子交换流动相为0.68g磷酸二氢钾溶于1L甲醇水（2/98）溶液，用磷酸调节pH为2.1。离子交换柱的流动相应为纯水溶液，但实验中发现峰形和保留时间均不理想。加入甲醇（2/98）后，峰形和保留时间有明显改善，因此实验中虽然选择离子交换柱，但仍需要加入一定比例的甲醇作为流动相。

3.4 衍生试剂配制时的注意事项：衍生化试剂不稳定，需现用现配，且邻苯二醛有剧毒，配制时要做好防护。

4 结 论

本次实验建立的测定生活饮用水中草甘膦的方法，灵敏度、回收率高，重现性好，完全符合我国对草甘膦的监管要求。