功能性寡糖对肉仔鸡免疫器官指数影响的Meta分析

李忠浩，王 鹏，褚海义，官丽辉，马旭平

(河北北方学院 动物科技学院，河北 张家口 075131)

【研究意义】为维护我国动物源性食品安全，使用绿色环保新型饲料添加剂成为饲料行业的研究和应用热点。功能性寡糖作为抗生素替代物之一，有着诸多生物活性功能，且具有低热、稳定、安全无毒副作用等良好的理化性质，应用前景良好。【前人研究进展】有关功能性寡糖对畜禽体液免疫、细胞免疫和黏膜免疫影响的研究与应用已经较为深入[1]。众多研究表明，可以通过免疫器官指数的变化来评价机体的免疫状态，胸腺、脾脏、法氏囊作为禽类主要免疫器官，在机体的体液免疫和细胞免疫中具有极其重要的作用，功能性寡糖能改善禽类免疫器官的生长发育和有利于免疫能力的提高[2-4]，但同时也有报道显示功能性寡对肉鸡免疫器官指数影响不明显[5-6]。【本研究切入点】本文采用Meta分析的方法综合评价了玉米-豆粕型日粮中添加功能性寡糖对42日肉仔鸡免疫器官指数的影响，全面分析了2003-2018年间公开发表的关于功能性寡糖对42日肉仔鸡胸腺、脾脏和法氏囊等免疫器官指数影响的相关研究文献。【拟解决的关键问题】为功能性寡糖应用于无抗饲料的研发和在肉鸡的作用效果提供理论和数据依据。

1 材料与方法

1.1 文献来源

采用计算机联机检索法检索中国知网、万方数据知识服务平台和维普中文科技期刊全文数据库。检索关键词有寡糖(oligosaccharides)、肉鸡(broilers)、免疫器官(immune organs)等，并且仔细查阅相关的文献综述及其参考文献。

1.2 纳入标准

随机分组对照试验设计，研究对象为42日肉仔鸡，饲养试验中使用玉米-豆粕型日粮，有试验实施或论文发表年限，各研究有明确样本含量，试验结果体现免疫器官指数及标准差。

1.3 排除标准

综述文献、数据不全文献、试验结果无均值或标准差、无对照组的试验、重复发表文献。

1.4 统计与分析

运用 Stata 13.1软件进行Meta统计分析。对纳入研究采用固定效应模型(I2<50 %且P>0.05)或者随机效应模型(I2≥50 %或P<0.05)进行异质性分析，计算分析合并效应量(WMD)、95 %置信区间(95 %CI)及相应显著性概率(P值)，若存在异质性，进行亚组分析。采用剪补法进行敏感性分析，Begg秩相关法和Egger回归法检验发表偏倚。

2 结果与分析

2.1 纳入文献的特征

数据库里共搜集到42篇相关文献。按上述纳入及排除标准筛选，共有13篇文献[6-18]29项随机对照研究纳入本次Meta分析，被纳入的文献发表于2003-2018年间。

2.2 Meta分析结果

2.2.1 功能性寡糖对肉仔鸡胸腺指数的影响 对纳入的29个肉仔鸡胸腺指数研究资料不具有同质性(Q统计量检验为755.68，P<0.05；I2=96.3 %)，采用随机效应模型。其中4个研究显示胸腺指数低于对照组，其余25个研究胸腺指数低于对照组，合并效应量及95 %CI为[WMD=0.243，(0.173，0.314)，P=0.000]，差异有统计学意义，日粮中添加功能性寡糖能显著提高肉仔鸡胸腺指数(图1)。

图1 功能性寡糖对肉仔鸡胸腺指数的影响Fig.1 The effect of functional oligosaccharide on thymic index of broilers

2.2.2 功能性寡糖对肉仔鸡法式囊指数的影响 经检验，筛选的29个肉仔鸡胸腺指数研究资料不具有同质性(Q统计量检验为136.64，P<0.05；I2=79.5 %)，采用随机效应模型。其中4个研究显示胸腺指数低于对照组，其余25个研究胸腺指数低于对照组，合并效应量及95 %CI为[WMD=0.097，95 %CI为(0.072，0.122)，P=0.000]，差异有统计学意义，日粮中添加功能性寡糖能显著提高肉仔鸡法式囊指数(图2)。

图2 功能性寡糖对肉仔鸡法氏囊指数的影响Fig.2 The effect of functional oligosaccharide on bursa index of broilers

2.2.3 功能性寡糖对肉仔鸡脾脏指数的影响 对纳入的29个肉仔鸡脾脏指数研究资料不具有同质性(Q统计量检验为142.85，P<0.05；I2=80.4 %)，采用随机效应模型。其中4个研究显示脾脏指数低于对照组，其余25个研究脾脏指数低于对照组，合并效应量及95 %CI为[WMD=0.094，95 %CI为(0.067，0.121)，P=0.000]，差异有统计学意义，日粮中添加功能性寡糖能显著提高肉仔脾脏指数(图3)。

图3 功能性寡糖对肉仔鸡脾脏指数的影响Fig.3 The effect of functional oligosaccharide on spleen index of broilers

2.3 功能性寡糖对肉仔鸡免疫器官指数影响的亚组分析

功能性寡糖对肉仔鸡免疫器官指数影响meta分析结果显示具有较大的异质性，鉴于所选研究的日粮类型及肉仔鸡日龄一致，而寡糖有效添加剂量无法精确度量，按照寡糖类型进行亚组分析，以初步确定异质性来源(表1)。

表1 功能性寡糖对肉仔鸡免疫器官指数影响亚组Meta分析

随机效应模型 Meta 分析结果显示，不同类型功能性寡糖对肉仔鸡胸腺指数影响表现出较大差异。果寡糖添加组提高肉仔鸡胸腺指数效果最为显著(0.082 g/kg体重)，依次为异麦芽糖添加组、复合寡糖添加组、壳寡糖添加组、甘露寡糖添加组和果胶寡糖螯合锌添加组；对法式囊指数影响效果不一致，果胶寡糖螯合锌添加组添加组提高肉仔鸡法式囊指数效应最高(0.168 g/kg体重)，依次为异麦芽糖添加组、果寡糖添加组、甘露寡糖添加组和壳寡糖添加组，复合寡糖添加组表现出相反效果，法式囊指数降低了-0.178 g/kg体重；对肉仔鸡脾脏指数也表现出较大差异。果胶寡糖螯合锌添加组添加组提高肉仔鸡脾脏指数效应最高(0.463 g/kg体重)，依次为复合寡糖添加组、壳寡糖添加组、异麦芽糖添加组、甘露寡糖添加组、果寡糖添加组。

2.4 敏感性分析

运用剪补法对肉仔鸡免疫器官指数做敏感性分析，比较剪补前后合并效应量WMD、95 %CI及其相应P值是否发生明显变化，判断分析结果的稳健性。

运用随机效应模型分别计算剪补前后各免疫器官指数合并效应量WMD和95 %CI，结果分别为胸腺指数[0.243(0.173，0.314)，P=0.000]和[0.119(0.047，0.191)，P=0.001]，法式囊指数[0.097(0.072，0.122)，P=0.000]和[0.097(0.072，0.122)，P=0.000]，脾脏指数[0.094(0.067，0.121)，P=0.000]和[0.044(0.014，0.074)，P=0.004]，结论均未发生明显变化，表明日粮中添加功能性寡糖显著提高肉仔鸡免疫器官指数的结论较为稳健(图4～6)。

图4 功能性寡糖对肉仔鸡胸腺指数的影响敏感性分析Fig.4 Sensibility analysis for the effect of functional oligosaccharide on thymic index of broilers

2.5 发表偏倚检验

运用Begg秩相关法和Egger回归法对纳入的29个研究进行发表偏倚的检验。对肉仔鸡胸腺指数、法式囊指数和脾脏指数的Begg秩相关法检验结果显示不存在明显的偏倚，P值分别为0.442，0.822和0.693)。对肉仔鸡胸腺指数、法式囊指数和脾脏指数的Egger回归法检验结果的回归方程截距、截距95 %CI及P值分别为[2.378515(-0.0298504，4.78688)，P=0.053]，[2.378515(-0.0298504，4.78688)，P=0.053]和[1.49354(0.6626559，2.324424)，P=0.001]，显示胸腺指数和法式囊指数不存在明显的偏倚，而脾脏指数存在较明显的偏倚。

图5 功能性寡糖对肉仔鸡法氏囊指数的影响Fig.5 Sensibility analysis for the effect of functional oligosaccharide on bursa index of broilers

图6 功能性寡糖对肉仔鸡脾脏指数的影响Fig.6 Sensibility analysis for the effect of functional oligosaccharide on spleen index of broilers

3 讨 论

动物体中枢免疫器官和外周免疫器官的发育状态及其机能的强弱，直接决定着动物体的全身免疫水平。胸腺、法式囊和脾脏作为禽类的主要免疫器官，在机体的体液免疫和细胞免疫中发挥着极为总要的作用。动物体免疫器官重量的增加是由于其自身细胞生长发育和分裂增值所致[6]，免疫器官指数的高低决定了其中淋巴细胞增殖的程度，Rivas等[19]认为，免疫器官重量可用于评价雏鸡的免疫状态，免疫器官指数是反映家禽免疫功能的重要指标。

胸腺和法式囊是禽类的中枢免疫器官，它们分别控制着与细胞介导免疫有关的淋巴细胞的形成和体液免疫活性细胞的发生[20]。胸腺主要是产生与细胞免疫活动有关的T细胞，这些细胞可以转移到脾脏、盲肠、扁桃体和其他淋巴组织中，在特定区域定居、繁殖，并参与细胞免疫应答[21]。法式囊分化生成大量的浆细胞和各种特异性的B细胞，参与体液免疫反应。脾脏则是禽类最大的外周淋巴器官，具有丰富的淋巴细胞和巨噬细胞，其中B淋巴细胞的比例较大，与体液免疫的关系更为密切。大量的研究报道称，功能性寡糖能够提高肉仔鸡免疫器官指数，本次Meta分析结果显示，日粮中添加功能性寡糖能显著提高肉仔鸡免疫器官指数，并且结果较为稳健。

本次Meta分析部分结局指标的异质性较大，通过肉仔鸡日粮中添加不同的寡糖类型的亚组分析找到了部分异质性的来源，通过剪补法进行的敏感性分析结果显示各指标的结论较为可靠；然而纳入的13篇文献29项随机对照研究均来自于中文，文献资料偏少同时缺乏外文文献；另外样本量偏小也可能是其中的影响因素，同时研究结果也提示了脾脏指数存在一定的发表偏倚。因此提示本次系统评价尚存在一定的局限性，仍需要规范标准后采用高质量、大样本的RCT研究结果以获得更为清晰准确的评价结论。

4 结 论

本研究通过对29项对照试验的Meta分析发现，日粮中添加功能性寡糖能够极显著的提高肉仔鸡免疫器官指数，对胸腺指数、法氏囊指数和脾脏指数分别提高了0.243、0.097和0.094 g/kg体重。本系统评价为功能性寡糖在肉仔鸡中的应用提供了一定的科学依据。