格列齐特片(Ⅱ)溶出曲线的一致性评价研究

孔 彬，刘晓霞，赵 昕

0 引言

格列齐特片(Ⅱ)是磺酰脲类降糖药，临床用于治疗非胰岛素依赖型糖尿病，该药物的药理作用是选择性作用胰岛B细胞，促进胰岛素分泌，进食后产生葡萄糖时，快速提高胰岛素的释放，抑制肝糖生成以及输出；能降低血小板的聚集和黏附力，有助于防治糖尿病微血管病变。其药物分子结构中有氮杂环结构，具有独特的药物特点[1]。本品具有缓释作用，可以显著增加餐后胰岛素和C-肽分泌水平，疗效持久。本实验参照药典方法[2-4]，采用光纤药物溶出度过程分析仪(简称：FODT-601)对格列齐特片(Ⅱ)开展溶出度实验[5-8]：参照药典通则，用磷酸盐缓冲液(pH 8.6) 1 000 ml作为溶媒，选取测定波长226 nm，实验转速150 r/min，分别在60、180 min时按缓释制剂溶出度进行判定。180 min后，观察溶出曲线，并获得对应时间的相对溶出百分率，比较溶出曲线的一致性。

1 仪器与试剂

光纤药物溶出度过程分析仪(FODT-601，上海富科思生物技术发展有限公司)、分析天平(梅特勒-托利多 AB135-S)、脱气仪(天大天发)，纯水仪(艾柯)。

格列齐特对照品(中国食品药品检定研究院，批号100269-201004)；格列齐特(Ⅱ)片(A厂，法国某公司，规格：80 mg×60片，批号：4C747T；B厂，贵州某公司，规格80 mg×60片，批号：20140901；C厂，石家庄某公司，规格：80 mg×60片，批号：G0130513)。磷酸二氢钾(分析纯)；氢氧化钠(分析纯)；冰醋酸(分析纯)；醋酸钠(分析纯)；浓盐酸(分析纯)。

2 方法与结果

2.1 配制溶媒 磷酸盐缓冲液(pH 8.6)：氢氧化钠42.0 g加入脱气水至5 000 ml，摇匀得溶液1。称得磷酸二氢钾136.0 g，加入脱气水至5 000 ml，摇匀得溶液2。取溶液1与溶液2，加3 150 ml乙醇，加脱气水至10 000 ml，摇匀，测得pH值(8.6±0.05)，用于溶出度实验。

2.2 配制对照品溶液 精密称取对照品16.39 mg置于100 ml容量瓶中，用磷酸盐缓冲液(pH 8.6)溶解并稀释至刻度，摇匀，制成浓度为163.0 μg/ml的对照品溶液。

2.3 配制供试品溶液 格列齐特片(Ⅱ)10片，研磨成细粉，精密称得格列齐特片(Ⅱ) 16.07 mg置于100 ml容量瓶中，加入磷酸盐缓冲液(pH 8.6)溶解后，稀释至100 ml，制成供试品溶液。

2.4 检测方法的建立 将浓度81.35 μg/ml的片粉溶液，浓度为81.95 μg/ml的格列齐特标准溶液，在220～600 nm光谱范围内扫描。见图1。

图1 仪器扫描格列齐特片(Ⅱ)吸收光谱图注：A.片粉，B.对照品

通过在分析仪上扫描对照品光谱显示：在波长226 nm处有明显吸收峰，且吸收度大小符合测定要求，采用550 nm为参比波长，仪器软件用双波长法扣除辅料。

2.5 线性与范围 分别精密量取4.0、6.0、12.0、18.0、25.0 ml浓度为163.9 μg/ml的格列齐特对照品溶液，分别置于50 ml容量瓶中，用pH 8.6磷酸盐缓冲液稀释后配制成梯度溶液。分别在分析仪上进行测定，将相对浓度C%作为纵坐标，以吸收度A作为横坐标，作每个通道的线性回归方程。在FODT-601的6个通道上测定后得到标准方程。见表1。

表1 溶出介质为pH 8.6磷酸盐缓冲液的标准方程

2.6 精密度与回收率

2.6.1 日内及日间精密度 取“2.5.1”项下溶液，24 h内在仪器上连续测定6次，获得吸收度RSD=1.94%；并连续测定6 d，吸收度的RSD为2.08%，证明该方法日内及日间精密度良好。

2.6.2 准确度 精密称取相当于20 mg格列齐特的药粉适量，用溶媒溶解并稀释至250 ml 量瓶中，摇匀。分别称得约7.0、9.0、10.0 mg的格列齐特对照品加入上述片粉溶液中，分别配制成各3份高、中、低浓度的供试品溶液，在FODT-601上测定吸收度，后带入标准方程计算回收率。结果显示，高、中、低浓度溶液的平均回收率在90.2%～105.7%范围内(RSD=2.56%～3.78%，n=6)，表明本方法的准确度较好，符合要求。

2.7 溶出度试验 转篮法在光纤药物溶出度过程分析仪(FODT-601)测定，使用探头为1 mm，溶媒为磷酸盐缓冲液(pH 8.6) 1 000 ml，转速为150 r/min，温度设定(37±0.5) ℃，将各通道上的线性方程带入监测软件，设定226 nm作为测定波长，550 nm作为参比波长，扫描空白溶液，并把6片药片投入经脱气处理的溶媒中，同时按下“开始”按键，设定溶出时间180 min，进行监测溶出曲线。

2.8 三个厂家的溶出曲线比较结果 见图2。

图2 三个厂家实时溶出曲线

2.9 溶出度曲线相似性评价 FODT-601软件结果显示，仿制药与原研药在药典规定的溶出介质中的f2分别为65.6、50.4。结果显示，样品2厂家的仿制药与原研药在药典规定的溶出介质中的溶出行为相似。

3 讨论

3.1 依据国家公布的“仿制药质量一致性评价意见”的质量标准以及《普通口服固体制剂溶出度试验技术指导原则》，采用相似因子f2法，遵照取点原则，本实验参比制剂180 min内平均溶出率达85%以上，为严格试验结果，本实验增加了60、120 min两个点进行采样，采用相似因子法比较溶出曲线，参比制剂与受试制剂累积溶出量差的平方和最小，当f2在50～100之间时表明二者溶出曲线相似[3-4]。由结果f2分别为65.6、50.4可知，仿制药与原研药在药典规定的溶出介质中的溶出行为相似[6-7]。并实时得到180 min内的真实溶出曲线。

3.2 目前，格列齐特片(Ⅱ)的释放度测定方法 主要采用2015年版中国药典的方法[2]，需要人手动抽溶出液、补充取出液、膜过滤后稀释等步骤，操作费时繁琐，针对缓释制剂溶出度试验周期较长，耗时耗力，容易产生疲劳后带来操作误差。光纤药物溶出度过程分析仪可全程记录药物溶出曲线过程，节省实验人员的时间精力和物力；简化缓释制剂释放度测定的繁琐过程，并获得真实完整的大量监测过程数据[7-8]；有利于药品工艺的研究，为仿制药一致性评价中的制剂溶出度试验提供现代化的测定方法[4]。