乙型肝炎人免疫球蛋白联合替诺福韦对妊娠合并慢性乙型肝炎患者的治疗效果研究Δ

刘晓红，张 雅，韩 曦

(陕西省人民医院产科，陕西 西安 710068)

临床医学将乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)检测呈阳性、具有慢性肝炎症状、发病时期不确定以及病程>6个月的症状定义为慢性乙型肝炎[1-2]。该病主要是由HBV感染导致的，患者主要临床表现为肝区疼痛、恶心及无力感等[3-4]。作为一种传染性疾病，乙型肝炎主要传播途径包括血液制品传播、遗传及母婴传播等，其中母婴传播是最常见的传播途径[5-6]。近年来，随着我国二胎政策的开放，携带HBV的新生儿越来越多，引起广大专家学者的关注。有研究结果表示，对妊娠合并乙型肝炎患者进行治疗，阻断HBV的母婴传播是控制新生儿携带HBV的重要措施[7]。本研究采用乙型肝炎人免疫球蛋白联合替诺福韦对妊娠合并慢性乙型肝炎患者进行治疗，观察效果，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 资料来源

选取2017年4月至2020年4月于陕西省人民医院接受治疗的妊娠合并慢性乙型肝炎患者90例。纳入标准：所有患者均符合中华医学会对慢性乙型肝炎的诊断标准[8]，妊娠周期>24周。排除标准：(1)病历资料不全者；(2)多胎妊娠者；(3)对本研究所用药物过敏、不耐受者；(4)心肺功能障碍者；(5)沟通障碍者。采用随机数字表法分为替诺福韦组、联合组，每组45例。替诺福韦组患者中，初产妇29例，经产妇16例；年龄25～35岁，平均(30.1±4.1)岁；妊娠周期27～30周，平均(28.5±1.3)周。联合组患者中，初产妇26例，经产妇19例；年龄24～33岁，平均(28.5±3.6)岁；妊娠周期27～29周，平均(28.1±0.8)周。两组患者一般资料具有可比性。本研究中所有患者家属均知情同意，且本研究获得陕西省人民医院伦理委员会批准。

1.2 方法

替诺福韦组患者给予富马酸替诺福韦二吡呋酯片(规格:300 mg)1次300 mg，1日1次，清晨空腹温水吞服，也可与食物同服。联合组患者在替诺福韦组的基础上加用乙型肝炎人免疫球蛋白(规格:2ml∶200 IU/瓶),肌内注射，1次200 IU，1个月1次，连续用药至产后1个月，替诺福韦用法用量与替诺福韦组保持一致。

1.3 观察指标

1.3.1 HBV DNA水平检测：治疗前后各抽取患者静脉血5 ml，以2 500 r/min离心机处理20 min，于-80 ℃环境中保存待检。采用反转录聚合酶链反应法检测HBV DNA水平。

1.3.2 丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平检测：采用酶标分析仪进行检测。将血清标本、稀释液以及检测卡平衡至24 ℃，对检测卡进行编号后置于平台之上，配制标准液并按照1∶10的比例对待测标本进行稀释。酶标板中添加血清标本或标准液100 μl，混合均匀后在恒温箱(37 ℃)中静置0.5 h，洗板，每孔中添加一抗50 μl以及蒸馏水50 μl，混匀后于37 ℃环境中静置0.5 h。洗板后每孔中添加酶标抗体100 μl，于37 ℃环境中静置10 min，洗板后每孔中添加底物液100 μl，于37 ℃、阴暗环境中静置15 min后，每孔中添加终止液100 μl混匀，使用酶标仪对待测酶标板450 nm处测吸光值，根据公式计算ALT、AST水平。

1.3.3 T淋巴细胞亚群水平检测：抗凝后分为2管，分别加入CD8+、CD4+和CD3+单克隆抗体各20 μl，在室温(25 ℃)环境下孵育30 min后在各管中加入融血剂，待其完全溶血后进行离心处理，转速2 000 r/min下离心5 min，弃上清液，使用洗涤液对其进行洗涤后在各管中加入固定剂150 μl、PBS 0.5 ml混合制备悬液，以流式细胞仪检测。

1.3.4 母婴状况观察：统计对比两组患者的ALT复常率、HBV DNA转阴率，新生儿乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen，HBsAg)阳性率、乙型肝炎表面抗体(hepatitis B surface antibody，HBsAb)阳性率以及母婴阻断成功率。

1.3.5 新生儿免疫球蛋白(Ig)A、IgM及IgG水平：采用免疫透射比浊法进行检测。取3个清洁试管备用，并分别记作空白、标准及测定管，每管中添加缓冲液350 μl，此外，空白管添加蒸馏水20 μl，标准管添加IgA、IgM和IgG标准液各20 μl，测定管添加待测标本20 μl，均震荡均匀，于27 ℃静置10 min，使用分光光度计比色，于500 nm波长处以空白管调零，记录吸光度，计算IgA、IgM及IgG水平。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 两组患者治疗前后HBV DNA、ALT和AST水平比较

治疗前，两组患者HBV DNA、ALT及AST水平比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗后，两组患者的HBV DNA、ALT及AST水平均较治疗前明显降低；与替诺福韦组比较，联合组患者的HBV DNA、ALT及AST水平明显较低，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 两组患者治疗前后HBV DNA、ALT和AST水平比较Tab 1 Comparison of levels of HBV DNA,ALT and AST between two groups before and after

2.2 两组患者治疗前后T淋巴细胞亚群水平比较

治疗前，两组患者CD8+、CD4+及CD3+水平比较，差异均无统计学意义(P>0.05)；治疗后，与替诺福韦组比较，联合组患者的CD8+水平明显较低，CD4+、CD3+水平明显较高，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 两组患者治疗前后T淋巴细胞亚群水平比较Tab 2 Comparison of T lymphocyte subsets between two groups before and after

2.3 两组患者ALT复常率、HBV DNA转阴率和阻断成功率比较

与替诺福韦组比较，联合组患者的ALT复常率、HBV DNA转阴率及阻断成功率明显较高，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表3。

表3 两组患者ALT复常率、HBV DNA转阴率和阻断成功率比较[例(%)]Tab 3 Comparison of the normalization rate of ALT,negative rate of HBV DNA and success rate of blockade of mother-to-child transmission between two groups [cases (%)]

2.4 两组新生儿HBsAg阳性率、HBsAb阳性率比较

与替诺福韦组比较，联合组新生儿HBsAg阳性率、HBsAb阳性率明显较低，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表4。

表4 两组新生儿HBsAg阳性率、HBsAb阳性率比较[例(%)]Tab 4 Comparison of positive rate of HBsAg and positive rate of HBsAb between two groups [cases (%)]

2.5 两组新生儿IgA、IgM及IgG水平比较

与替诺福韦组比较，联合组新生儿IgA、IgM及IgG水平明显较低，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表5。

表5 两组新生儿IgA、IgM及IgG水平比较Tab 5 Comparison of IgA，IgM and IgG levels of newborns

3 讨论

近年来，我国慢性乙型肝炎的发病率逐年升高，每年新增妊娠合并慢性乙型肝炎患者数也居高不下[9]。有学者在研究中表示，妊娠合并慢性乙型肝炎患者分娩产下的新生儿的健康、成长发育会受到严重影响，因此对妊娠合并慢性乙型肝炎患者进行及时有效的治疗至关重要，但不当的治疗可能会威胁胎儿的健康、发育[10]。乙型肝炎人免疫球蛋白为一种免疫球蛋白制剂，具有调节免疫、清除HBV的药理作用，常用于HBV母婴阻断[11]。替诺福韦是临床较为常用的抗病毒药，常用于乙型肝炎症状的临床治疗[12-13]。研究结果表明，使用替诺福韦对妊娠合并慢性乙型肝炎患者进行治疗，能够使患者的肝功能明显改善，具有较为理想的母婴阻断效果[14]。但是，目前关于乙型肝炎人免疫球蛋白联合替诺福韦治疗妊娠合并慢性乙型肝炎的研究还鲜有报道。

HBV携带者体内的HBV DNA水平明显异常，检测HBV DNA水平能够对患者的HBV清除情况进行较为准确的判断[15]。乙型肝炎的发生发展会对机体肝功能造成严重的影响，ALT、AST是常用的评价机体肝功能的指标，检测ALT、AST水平变化能够对机体肝功能状况进行评价[16-17]。本研究结果显示，采用乙型肝炎人免疫球蛋白联合替诺福韦对妊娠合并慢性乙型肝炎患者进行治疗，患者的HBV DNA、ALT及AST水平均出现降低，说明乙型肝炎人免疫球蛋白联合替诺福韦能够有效清除妊娠合并慢性乙型肝炎患者的HBV，使患者肝功能得到明显提高，从而发挥治疗效果。

乙型肝炎症状的发生发展与机体免疫功能变化密切相关[18]。检测T淋巴细胞亚群能够较为准确地对机体免疫功能变化情况进行评价[19-20]。本研究结果显示，采用乙型肝炎人免疫球蛋白联合替诺福韦对妊娠合并慢性乙型肝炎患者进行治疗，患者的CD8+、CD4+和CD3+水平受到明显调控，说明上述2药联合应用能够增强妊娠合并慢性乙型肝炎患者的免疫功能，对患者病情的恢复具有重要意义。

ALT复常情况、HBV DNA转阴情况以及新生儿HBsAg阳性率、HBsAb阳性率是临床常用的评价乙型肝炎症状治疗效果、母婴阻断效果的指标。研究结果表明，采用替诺福韦对妊娠合并乙型肝炎患者进行治疗，患者的ALT复常率、HBV DNA转阴率较高，具有较为理想的母婴阻断效果[21]。本研究结果显示，采用乙型肝炎人免疫球蛋白联合替诺福韦对妊娠合并慢性乙型肝炎患者进行治疗，患者的ALT复常率、HBV DNA转阴率较高，新生儿HBsAg阳性率、HBsAb阳性率较低，母婴阻断成功率较高，说明上述2药联合应用能够有效清除HBV，并且具有较为理想的母婴传播阻断效果，治疗效果显著。

有研究结果显示，与健康新生儿相比，携带HBV新生儿的免疫功能异常，可对新生儿的健康成长造成严重影响。Ig是临床较为常用的评价机体血清免疫功能的指标[22-23]。本研究结果显示，采用乙型肝炎人免疫球蛋白联合替诺福韦治疗妊娠合并慢性乙型肝炎，患者分娩的新生儿IgA、IgM及IgG水平较低，原因可能是联合用药能够有效清除妊娠合并慢性乙型肝炎患者的HBV，具有理想的母婴阻断效果，从而可改善新生儿的免疫功能。

综上所述，采用乙型肝炎人免疫球蛋白联合替诺福韦对妊娠合并慢性乙型肝炎患者进行治疗，能够调控患者的HBV DNA水平，改善患者肝功能、免疫功能，提高患者ALT复常率、HBV DNA转阴率，降低新生儿HBsAg阳性率、HBsAb阳性率，改善新生儿免疫功能，母婴阻断效果显著，可为妊娠合并慢性乙型肝炎的临床治疗提供参考依据。