血站HBsAg反应性样本的ELISA与PCR法检测结果的相关性

【摘要】目的：分析血站应用ELISA和PCR检测HBsAg反应样本在结果方面的联系。方法：选取2020年1月～2021年1月血液样本31203份，进行ELISA检测与PCR检测，比较检测结果。结果：ELISA双试剂检出28份，PCR在此基础上又检出11份，有效提高用血安全。与单试剂检测相比，双试剂阳性灵敏度较高（P<0.05），联合PCR检测后检出率高于ELISA双试剂检测。结论：血液筛查中应用ELISA时，试剂种类不同检测精密度存在差异，双试剂检测更易阳性确诊，但联合应用PCR检测可进一步提高HBV-DNA的漏检风险，确保用血者安全。

【关键词】血液筛查;乙肝感染;血站;ELISA检测;PCR检测;HBsAg

【中图分类号】R446.6 【文献标识码】A 【DOI】10.12332/j.issn.2095-6525.2021.15.223

前言

HBsAg即乙肝表面抗原，在进行血液乙肝病毒（简称HBV）感染筛查时通常可进行HBsAg反应性样本检测，从血液样本中筛选出HBV感染样本，促进血站安全供血。ELISA是酶联免疫吸附检测，PCR即聚合酶链式反应。乙肝是高发性公共卫生问题，相关调查显示，HBV感染人群已超3.5亿，其中约有1亿为国内患者。据不完全统计，当前国內HBV携带率>8%[1]。对HBV标志物即HBsAg进行科学检测，对乙肝感染防控意义重大。机体免疫反应变化可能影响ELISA结果可靠性，PCR对HBV复制数量灵敏度较高，可促进精准检验。本文从2020年1月～2021年1月血站血液样本中选取31203份，说明ELISA、PCR检测方法，分析其结果相关性。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2020年1月～2021年1月31203份血液样本，根据所用试剂分组检验结果资料，A初检：试剂为北京万泰试剂，B复检：试剂为厦门新创试剂，C：PCR选用上海浩源试剂。性别：男/女=18742/12461，年龄（18～54）岁，平均（35.79±6.42）岁。资料可予分析（P>0.05）。

1.2 方法

全部样本实施HBsAg ELISA检测，进行试剂检测后分析检测结果。阳性确诊：初检、复检显示S/CO不低于1;待查：单试剂检测时显示S/CO不低于1，同时可见单试剂（0.7～1）区间。对于待查样本，实施双试剂双孔复检。阳性反应归为不合格样本。ELISA阴性标本做PCR检测，ELISA反应性标本不做PCR检测。

1.3 观察指标

血清学检测：实施HBsAg ELISA检测，分析阳性率。

HBV-DNA检测：使用PCR法实施HBV- DNA检测，比较HBV-DNA检测、ELISA检测结果。

1.4 统计学方法

以SPSS 24.0分析HBsAg反应性样本数据，计量资料以“均数±标准差（x±s）”表示，t检验，计数资料（检测精度）以率（%）表示，x2检验，P<0.05差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清学检测

双试剂检测显示为HBsAg阳性28份，阳性率为0.09%（28/31 203）。其中双试剂皆显示阳性为15份，单试剂显示阳性13份;双试剂显示待查2份，单试剂显示待查45份。检出率情况如下（见表1）。

2.2 HBV-DNA检测

ELISA双试剂阳性28份，经PCR检测另行检出阳性11例，总计检出阳性病例39例。ELISA双试剂灵敏度为71.79%（28/39），漏检率为28.21%（11/39）。该数据表明，联合PCR检测有效降低了漏检率，促进HBV感染者阳性检出。ELISA单试剂阳性检出13份，灵敏度为33.33%（13/39）。ELISA双试剂待查2份，PCR阳性检出0份，占比为0.00%（0/28）。比较PCR检测在4种检测方法中阳性检出率，可见双阳性试剂+PCR检测>双试剂阳性>单试剂阳性>（P<0.05）。

3 讨论

本研究显示，PCR在不同ELISA检测试剂应用情况下阳性率不同。该数据说明，ELISA试剂存在质量差异，检测精密度不同。经分析，试剂制作中所用材料不同，组合工艺各异，纯度标准也不同，因而血站在使用ELISA试剂时应严格控制采购质量，优选重复性好的试剂，同时注意双试剂互补。在实际检测前，应测试应用精密度，并对重复性参数进行科学评价。除此之外，应在确认采购的试剂之外备选2种试剂，当实际检测出现异常数据时，及时对ELISA试剂进行更换，实施精准检测。

分析ELISA和PCR结果相关性，可知单试剂待查血样中含有符合性。分析检测数据和后续追踪结果，可知待查样本可能出现假阴性样本。ELISA待查样本存在传染性风险，在使用血液制品时可能造成乙肝传播。待查弱阳性成因是乙肝感染初期抗原含量较少，此时HBV基因可能发生突变导致阳性反应隐匿。在样本监控中，应监控S/CO值，当其出现增高趋势时，应加强乙肝预防。所以要联合PCR技术检测标本，减少标本的漏检风险。因免疫异常、溶血和检验技术、检验所用试剂质量影响，可能引起假阳性。通过ELISA筛查可促进乙肝输血传播控制，促进安全供血[2]。

综上所述，为提升HBsAg检测可靠性，在进行ELISA检测时应科学控制待查范围，积极复检或者进行实验验证，促进精准检测。同时，免疫学检测应与DNA检测相结合，综合技术应用，降低检测误差。此外，应完善追踪制度，促进后期确认，提高血液质量，对血液技术性浪费进行有效控制。

参考文献：

[1]张毓，田丰，孙国栋等.HBV相关免疫学指标与核酸检测HBV DNA的关联分析[J].医学动物防制，2021，37（01）：39-41.

[2]陈少彬，何子毅，陈庆恺等.ECLIA常规应用于献血者血液HBsAg检测的结果分析[J].临床输血与检验，2019，21（04）：383-386.

作者简介：范琼玉 （1994-9），女，汉 ，山西省长治，检验师， 研究方向：PCR实验室。