6种药剂对党参根腐病病原菌（X7）的室内毒力测定

许 彦，刘 露，曹 剑，覃贵勇

（重庆三峡职业学院，重庆 404155）

党参[Codonopsispilosula (Franch.)Nannf.]是《中华人民共和国药典》收录的草药，为桔梗植物的根。具有健脾益肺、养血生津的功效[1]。重庆市种植的主要品种是川党参，已有近百年的栽培历史，主要种植区域在奉节、巫溪、巫山等地。随着人们保健意识的提高，党参保健用量比药用量大。党参种植面积不断扩大，同时病原菌不断积累，党参病害已成为制约重庆党参产量和品质进一步提升的重要因素[2-4]。

根腐病是重庆党参生产的主要病害之一，主要症状是主根腐烂，后期产生灰白色霉状物，对党参产量造成严重影响。病菌主要以菌丝体潜伏在种子、土壤或带病植株体内组织，也可以分生孢子黏附在种子表面越冬。带病种子、土壤中的病菌、带病菌的党参幼苗为其病源体[5]。

采集于重庆市奉节县党参种植基地的发病川党参（Codonopsis tangshen Oliv.），经前期试验研究，分离纯化出几种腐皮镰刀菌菌种，经回接都有致病力。本试验采用生长速率法研究苯醚甲环唑等6种药剂及其不同浓度对（X7）小种的抑制效果，意在筛选出效果好的药剂及浓度，为生产提供指导。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 供试菌株 样品采集于重庆市奉节县党参种植基地，于重庆三峡职业学院分离获得菌株，编号X7。

1.1.2 供试药剂 此次试验选取市面上常见的、可用于防治根腐病的6种杀菌剂。10%苯醚甲环唑:水分散粒剂，东莞市瑞德丰生物科技有限公司生产；30%噁霉灵:水剂，东莞市瑞德丰生物科技有限公司生产；70%甲基硫菌灵:可湿性粉剂，海利尔药业集团股份有限公司生产；50%咯菌腈:可湿性粉剂，先正达投资有限公司生产；80%福美双:水分散粒剂，比利时特胺有限公司；86%十三吗啉:油剂，浙江世佳科技股份有限公司。

1.1.3 培养基 马铃薯葡萄糖琼脂培养基（下文简称:PDA培养基）。

1.2 试验方法

1.2.1 PDA培养基制备 马铃薯200 g、葡萄糖20 g、琼脂20 g、蒸馏水1 000 ml，在120℃条件下灭菌20 min。

1.2.2 病原菌活化 在超净工作台中用打孔器从已纯化的培养皿中挑取直径为5 mm的菌饼，放在PDA培养基中央，用封口膜将其封好，在温度为28℃的培养箱中培养7 d，待用。

1.2.3 含毒培养基制备 将供试杀菌剂按照表1对应的质量浓度配置成不同浓度含毒培养基，以无杀菌剂加入的PDA平板为对照。各培养皿加入20 ml培养基，每个杀菌剂浓度5次重复。

表1 各供试杀菌剂含毒培养基质量浓度

1.2.4 接种菌饼并测量菌饼直径 接种:使用直径为5 mm的打孔器在菌落样本边缘处打下菌饼，将菌饼移入对应培养基中心位置，使用封口膜密封培养皿边缘使之隔绝污染物，用标签作相对应标记，将平板放置于28℃恒温条件下培养5 d。测量:恒温培养24 h、72 h、120 h后，分别取出培养皿测量菌落直径，每个菌落十字交叉测2次直径。记录好每次的数据。

1.2.5 数据处理

1.2.5 .1抑制率。测量后按照如下公式，计算杀菌剂的生长抑制率[6]。

1.2.5 .2回归方程及相关系数。以杀菌剂质量浓度的对数值为x，抑制率机率值为y，使用Excel进行回归分析，确定毒力回归方程y=ax+b、相关系数及EC50。

2 结果与分析

2.1 6种药剂对病原菌（X7）的抑制效果

从表2可以看出，6种药剂对X7均有抑制作用，且抑制率随着浓度的增加而增加。浓度均为0.5 g/L时，70%的甲基硫菌灵抑制效果最好，50%咯菌腈的抑制效果最差。

表2 不同浓度杀菌剂对病原菌（X7）的抑制率

2.2 毒力回归方程

利用药剂的浓度对数值x与药剂抑菌率几率值y的直线相关关系，求出供试药剂的毒力回归方程，并计算出相关系数和EC50，详见表3。几种药剂对党参根腐病病原菌（X7）都有不错的抑制作用，其中70%的甲基硫菌灵和86%的十三吗啉效果最优，EC50分别为0.000 224 g/L和0.083 g/L；80%福美双、30%噁霉灵、10%苯醚甲环唑次之；50%咯菌腈的EC50最大，为2.18 g/L。

表3 不同杀菌剂对病原菌（X7）的毒力回归方程

3 结论

党参作为一种药食同源的植物，具有很高的经济价值，根腐病的发生对其产量、品质及种植面积产生了巨大影响。因此，筛选行之有效的防治药剂对党参栽培具有重要意义。

试验结果表明:防治党参根腐病的最佳药剂是70%甲基硫菌灵和86%十三吗啉。本试验受试验条件、时间等因素的限制，试验结果存在一定局限性，应进一步进行田间试验，验证试验结果，筛选出防治效果好、防治成本低的药剂。