O型血孕妇产前不规则抗体效价与ABO型新生儿溶血症关系研究

李彩梅，席真艳

(榆林市第二医院输血科，陕西 榆林 719000)

ABO型新生儿溶血症(ABO hemolytic disease of newborn，ABO-HDN)是母体对胎儿红细胞发生同种免疫反应所致的溶血性疾病，严重者可引起核黄疸、胆红素脑病，死亡风险高，因此如何有效防治ABO-HDN至关重要[1-3]。ABO血型系统以外的所有红细胞血型抗体称为不规则抗体，其可通过母婴血型不合妊娠、输血等免疫刺激产生的IgG抗体经胎盘进入胎儿血液循环，再通过网状内皮系统破坏血型不相容的胎儿红细胞[4-5]。因此，对孕产妇开展产前不规则抗体(IgG抗A/B效价)检测十分必要，也是临床防治ABO-HDN的重要手段之一[6-7]。鉴于此，本研究将接受IgG抗A/B效价筛查的O型血孕妇作为研究对象，回顾性分析其IgG抗A/B效价检测结果，明确O型血孕妇产前IgG抗A/B效价与ABO-HDN的关系，为ABO-HDN的临床防治提供参考意见。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2018年12月至2019年12月在本院接受IgG抗A/B效价检测的孕妇为研究对象。纳入标准：孕妇血型为O型；临床资料完整，能够满足研究需求。排除标准：夫妇血型为O-O型。最终纳入1578例，其中年龄20～39岁，平均(30.17±2.05)岁；孕龄16～40周；夫妇血型A-O型694例，B-O型530例，AB-O型354例；56例孕妇的患儿出生后发生黄疸，母体IgG抗A/B效价高，新生儿血型鉴定明确为母婴ABO血型不合，间接胆红素增高，新生儿直接抗球蛋白实验(阳性提示红细胞表面包被不完全抗体)、游离实验(阳性提示血清中存在游离IgG抗体)和放散实验(阳性提示红细胞膜上有抗体吸附)实验中任意1项阳性，临床确诊为ABO-HDN。

1.2 研究方法 采集孕妇凝血、抗凝血2 ml血液样本，EDTA-K2抗凝，制备血清、0.8%红细胞悬液备用。微柱凝胶法检测IgG抗A/B血型效价，筛查母体不规则抗体，不规则抗体筛检卡(国械注准20163400856)、HDN母体IgG抗A/B效价检测卡(国械注准20163400869)均购自江苏力博医药生物技术有限公司，所有操作均严格参照试剂盒说明书。将经2-巯基乙醇处理后的血清用0.9%氯化钠溶液进行倍比稀释，再将0.8%红细胞悬液(A或B)加入微柱凝胶卡反应室。加入倍比稀释后的血清各50 μl，37 ℃条件下孵育15 min后离心15 min，观察其凝集情况。阳性标准：1+凝集强度，此血清稀释倍数的倒数则为IgG抗A/B效价。

1.3 观察指标 ①比较不同夫妇血型中IgG抗A/B效价筛查结果及发生ABO-HDN孕妇中不同IgG抗A/B效价占比。②以ABO-HDN是否发生为条件将研究对象分为ABO-HDN组和非ABO-HDN组，比较两组孕妇临床资料，包括年龄、妊娠次数、孕龄、新生儿性别、分娩方式及IgG抗A/B效价，并分析ABO-HDN发生的影响因素。

1.4 统计学方法 采用SPSS 17.0统计学软件进行分析。计数资料以[例(%)]表示，比较采用χ2检验或秩和检验。IgG抗A/B效价与ABO-HDN的关系采用Logistic回归分析。P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 1578例O型血孕妇IgG抗A/B效价筛查结果 见表1。1578例O型血孕妇中，IgG抗A/B效价≥256者占比45.44%(717/1578)。夫妇血型A-O型、B-O型、AB-O型中，IgG抗A/B效价≥256者占比分别为49.86%(346/694)、41.89%(222/530)、42.09%(149/205)。不同夫妇血型中IgG抗A/B效价≥256者占比比较差异有统计学意义(χ2=9.754，P=0.008)，A-O型中IgG抗A/B效价≥256者占比显著高于B-O型和AB-O型(H=10.224、11.663，均P=0.001)。

表1 1578例O型血孕妇IgG抗A/B效价筛查结果[例(%)]

2.2 发生ABO-HDN孕妇中不同IgG抗A/B效价占比比较 发生ABO-HDN的孕妇中，IgG抗A/B效价≥256者占比98.21%(55/56)，而IgG抗A/B效价<256者仅占1.19%(1/56)，前者明显高于后者(χ2=104.143，P=0.000)。

2.3 ABO-HDN组和非ABO-HDN组孕妇临床资料比较 见表2。两组孕妇年龄、孕龄、新生儿性别、分娩方式比较差异无统计学意义(均P>0.05)，但妊娠次数、IgG抗A/B效价比较差异有统计学意义(均P<0.05)。

2.4 ABO-HDN发生影响因素分析 见表3。以ABO-HDN为因变量(是=1，否=0)，将妊娠次数(1次=0，>1次=1)、IgG抗A/B效价一(<256=0，256=1，512=2，≥1024=3)、IgG抗A/B效价二(<256=0，≥256=1)作为协变量，进行Logistic回归分析。结果显示，妊娠次数>1次、IgG抗A/B效价≥256是ABO-HDN发生的独立影响因素，其中妊娠次数>1次是保护因素。

表2 ABO-HDN组和非ABO-HDN组

表3 ABO-HDN发生影响因素分析

3 讨 论

ABO-HDN是因母婴血型不合，母亲对胎儿红细胞发生同种免疫反应所引起的溶血性疾病，重症可引发核黄疸，甚至致死[8-9]。机体红细胞血型系统极为复杂，包括ABO、Rh、P、MN等多个血型系统，临床将ABO血型抗体以外的所有红细胞抗体均定义为不规则抗体，即不符合Landsteiner法则的抗体，包括完全抗体(IgM)及不完全抗体(IgG)[10-11]。既往研究[12-13]报道，正常人群中不规则抗体阳性率约0.3%～2%。妊娠、输血免疫刺激则均是不规则抗体产生的重要原因，不规则抗体IgG可经胎盘进入胎儿血液循环，破坏红细胞，最终引起HDN，以胎儿或婴儿水肿、黄疸、贫血、肝脾肿大为主要临床表现，严重者可并发胆红素脑病，预后不良[14-15]。同时，产后出血是产科常见并发症，也是导致产妇死亡的重要原因，而选择相配合的血液制剂则是赢得宝贵抢救时间的关键，因此对孕妇开展不规则抗体筛查十分必要，不仅可降低HDN发生风险，亦是为产妇输血提供参考依据。

本研究1578例O型血孕妇中，IgG抗A/B效价≥256者占比45.44%，夫妇血型A-O型、B-O型、AB-O血型中IgG抗A/B效价≥256者占比分别为49.86%、41.89%、42.09%，这与房笃智等[16]报道的45.69%接近。A-O型中，IgG抗A/B效价≥256者占比显著高于B-O型和AB-O型，提示血型可能与O型血孕妇血清IgG抗体效价存在一定关联，这与叶海辉等[17]的报道存在差异。另外，56例发生ABO-HDN的孕妇中，IgG抗A/B效价≥256者占比98.21%，而IgG抗A/B效价<256者仅占1.19%。为进一步明确IgG抗A/B效价与ABO-HDN的关系，本研究将1578例孕妇所生新生儿按是否发生ABO-HBN分组，结果显示两组妊娠次数、IgG抗A/B效价比较差异有统计学意义。Logistic回归分析结果显示，妊娠次数>1次、IgG抗A/B效价≥256均是ABO-HDN发生的独立影响因素。较妊娠次数为1次孕妇，>1次的O型血孕妇新生儿发生ABO-HDN的风险降低0.424倍。而较IgG抗A/B效价<256孕妇，IgG抗A/B效价256、512、≥1024的O型血孕妇新生儿发生ABO-HDN的风险分别增加2.951倍、3.056倍、3.501倍，可见其风险随着IgG抗A/B效价增加而上升。这与既往报道[18]结论相似，均提示IgG抗体效价与HDN发生率呈正相关关系。IgG是唯一可穿过胎盘的免疫球蛋白，因此IgG性质的抗体理论上均可引起HDN，随着抗体效价的上升，一旦超过机体保护机制，便可导致ABO-HDN发生。本研究中，Logistic回归分析也显示，较IgG抗A/B效价<256的孕妇，IgG抗A/B效价≥256的O型血孕妇新生儿发生ABO-HDN的风险增加5.709倍，因此临床对不规则抗体IgG效价≥256的O型血孕妇=应高度重视。

研究[19-20]指出，HDN发生、严重程度不仅与IgG抗A/B效价有关，IgG抗体亚类、IgG转运至胎儿效率、胎儿脾脏功能成熟度、人类白细胞抗原相关抑制抗体亦在HDN发生中起重要作用，因此不规则抗体筛查尚不能作为HND的预测指标。但结合当前研究，孕妇不规则抗体筛查所示IgG抗A/B效价与胎儿出生后24 h内胆红素水平正相关[21]，这也提示产前IgG抗A/B效价控制的必要性，尤其是对于血清IgG抗A/B效价≥256的孕妇，应给予动态持续监测，结合产前血浆置换等干预措施降低HDN风险。

综上所述，对孕妇开展不规则抗体筛查十分必要，并应重视IgG抗A/B效价≥256的孕妇，依据IgG效价进行积极的产前干预，最大限度地降低HDN风险。但本研究也存在一定局限性，如样本数量相对较少，产前不规则抗体筛查与HDN的相关性仍有待扩大样本量后深入探究。