滑液支原体的临床鉴定方法及防控

陈圆圆，李双双，丁丽萍，张真真，王新港，王称心，王蕾，张先锋，沈丹丹★

（1.商丘美兰生物工程有限公司，河南商丘 476000；2.河南普华基因科技有限公司，河南郑州 450000）

鸡滑液支原体病是由滑液支原体（Mycoplasma synoviae，MS） 引起的一种急性或慢性传染病，该病常见于鸡或火鸡。 能引起家禽传染性滑膜炎、呼吸道疾病、蛋壳顶端异常及生长迟缓等，MS 主要侵害鸡关节滑液囊膜及腱鞘，引起渗出性滑膜炎、腱鞘炎，主要表现为关节及脚掌肿胀。 MS 也可引起以气囊炎为主的呼吸道疾病。 MS 不仅可以通过直接接触横向传播，也可以通过种蛋垂直传播， 为MS 的清除加大难度。MS 在鸡群中广泛流行，商品肉鸡、蛋鸡或种鸡均可感染，给养鸡业造成巨大的经济损失。 为引起养殖户对鸡滑液支原体感染防控高度重视，现将鸡滑液支原体病的临床鉴定及其防控做一系统介绍，以供养殖户参考。

2022 年7 月河南信阳一鸡场疑似鸡滑液支原体感染，蛋壳顶端异常、 脚掌肿胀、脾脏肿大、肝脏坏死（见图1）。

图1 蛋壳顶端异常、脚掌肿胀、脾脏肿大、肝脏坏死

采集病鸡咽拭子、 跗关节样品进行细菌鉴定，对该病原菌进行染色后形态观察、平板凝集试验、动物感染试验，现将实验鉴定方法总结如下：

1 镜检

用棉拭子无菌沾取病鸡关节液及上颚裂隙的黏液，放入改良Frey 氏液体培养基中，37℃烛缸内培养3～4 小时后， 用0.2 微米滤器过滤后，加入到无菌改良Frey 氏固体培养基上， 继续放入37℃烛缸中培养3～7 天，观察菌落生长情况。培养至5 天时可见细小、光滑、致密的小菌落，半凹陷于培养基内， 于低倍显微镜下可见固体培养基上形成“煎蛋样”菌落（见图2）；分离株经吉姆萨染色后低倍显微镜下观察可见多形态的球状菌（见图3）。

图2 显微镜下分离株的菌落形态

图3 分离菌经吉姆萨染色后的镜检图

2 平板凝集试验

将细菌培养液高速离心10 分钟，收集管底浓缩的分离菌用少量PBS 溶解后作为抗原分别与阴、阳性血清进行平板凝集试验。 同时设置对照试验， 结果表明该分离菌株能够与滑液支原体标准阳性血清呈凝集反应， 与阴性血清不产生凝集反应（见图4 和图5）。

图4 分离菌平板凝集试验

图5 阳性对照和阴性对照

3 动物感染试验

20 日龄肉鸡感染后第10 天剖检结果表明，对照组鸡未见明显变化， 足垫和关节无肿胀和积液渗出。

本实验室分离的疑似滑液支原体菌株经过瑞氏染色后镜检、 平板凝集实验、 证明确为滑液支原体病后，对20 日龄肉鸡进行了动物感染实验，试验组鸡只食欲减退、羽毛蓬乱，胸部肌肉溃烂，龙骨变形，足垫、关节肿胀，关节腔中有炎性渗出液，为鸡滑液支原体病的典型症状。

4 临床防控措施

目前， 临床上鸡滑液支原体病的防控措施主要是三个方面：疫苗预防、 药物防治和培育净化鸡群。临床生产中，多采用药物预防和疫苗接种或联合使用，两种方法联合使用对本病的保护率达80%。

临床上常用四环素类、大环内酯类等药物，对支原体病的作用明显，其中以泰乐菌素、替米考星和强力霉素较为敏感。 药物治疗可在短期内减轻症状、减少损失，但不能消除鸡群感染。 目前国内MS 疫苗主要是灭活疫苗和基因工程苗，能诱导免疫鸡群产生较好的抗体水平， 可预防和减轻临床症状，显著减少蛋壳顶端异常，提高产蛋率，增加蛋重。 做好免疫接种工作，制定合理的免疫程序， 在免疫接种过程中尽可能保证一针一鸡，确保所有的鸡都免疫。 在发病区和发病季节做好疫苗接种。

另外，加强饲养管理，严把鸡苗引种关，提高饲养管理水平，选择质量较好的饲料，严格控制人员和车辆进出，建立健全的消毒制度，加强生物安全等级，轮流使用抗生素类药物，同时做好消毒工作，在养殖过程中，尽可能做到全进全出，均能为MS 的有效防控提供可能。