脱落细胞形态学联合肿瘤标志物检测在良恶性浆膜腔积液鉴别中的价值

郑小金 张敏波 郑柳柳

浆膜腔积液包括腹腔积液、胸腔积液、心包腔积液等，通过对浆膜腔积液进行检验［1］，有助于恶性肿瘤诊断［2］，并追述其肿瘤来源、类别等，为临床诊断提供依据。临床上鉴别良恶性浆膜腔积液，一般采用病理液基联合免疫组化法，但此方法也有其弊端，操作复杂、费时等，因此探索新的快速便捷的诊断技术显得尤为关键［3］，本文探讨脱落细胞形态学联合肿瘤标志物检测在良、恶性浆膜腔积液鉴别的价值。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2020年6月至2021年5月本院同时采样的浆膜腔积液标本518例，分别送至检验科和病理科，检验科进行浆膜腔积液脱落细胞形态学法、血清肿瘤标志物检测，病理科进行浆膜腔积液脱落细胞病理液基和免疫组化试验。

1.2 方法 （1）材料：①浆膜腔积液沉渣涂片染液采用瑞氏-姬姆萨染色液，由珠海贝索生物技术有限公司生产；肿瘤标志物采用雅培Abbot i2000SR仪器进行检测，CEA、 Ca199、 Ca125、Ca153、AFP、PSA、SCC采用雅培配套试剂，NSE由罗氏诊断产品（上海）有限公司提供，采用朗道质控液。②病理液基和免疫组化：离心机采用4000型医用低速离心机；显微镜型号Leica Dxx 2500；细胞保存版由Hologic.Inc豪洛捷公司生产，主要成分是甲醇和水；液基薄层细胞制片机，型号THINPREP-2000；95%酒精；染料：苏木素、伊红；防腐剂：二甲苯；免疫组化试剂由基因科技（上海）股份有限公司生产的各种配套试剂。（2）检验方法：①浆膜腔积液脱落细胞形态学法：将送至检验科浆膜腔积液进行常规检测，并将白细胞计数＞150个/μL或＜150个/μL，但镜下可见大细胞的标本进行图文检验，取10 mL进行离心，相对离心力400 g，离心5 min，取底部沉渣大约 10μL标本滴加在载玻片一端，用推片向另一端推制成约 2～4 cm长度的涂片，制作2张，片膜的头、体、尾层次清晰，薄厚适度，干燥，并进行瑞氏-吉姆染色（A液染1 min，B液加上后与A液混合均匀再染5 min，A∶B比例1∶1.5～2），在显微镜下对细胞进行分类鉴别。由一名高级职称检验人员进行阅片，结果存在差异则由高级职称专业组长进行复核。若还存在技术疑问，请上级医院专家指导。②血清肿瘤标志物检测方法：CEA、Ca199、AFP、Ca125、Ca153、PSA、SCC采用化学发光微粒子免疫检测法；Ca724、NSE采用电化学发光法，质控检测每次结果在控制范围，以某一项目检测值超过临界值为阳性。③病理液基：标本瓶倒去部分上清液后取底部50 mL，2,500 r/min，离心4 min，离心后的标本放入细胞保存液中，用液基薄层细胞制片机制片，并放入95%酒精固定15 min，水洗，苏木素染3 min，流水返蓝5～10 min，伊红染1～3 min，95%酒精固定，100%酒精脱水，二甲苯防腐固定，制片完成。免疫组化：免疫酶标法。

1.4 统计学方法 统计使用SPSS18.0统计软件，计数资料以%表示，用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

临床诊断恶性肿瘤238例，无恶性肿瘤有280例，脱落细胞形态学与脱落细胞形态学联合肿瘤标志物比较，此组结果差异有统计学意义（χ2=20.045，P＜0.001）；脱落细胞形态学与病理液基联合免疫组化比较，差异有统计学意义（χ2=6.25，P=0.017）；脱落细胞形态学联合肿瘤标志物与病理液基联合免疫组化比较，差异无统计学意义（χ2=0.074，P=0.892）。见表1。

表1 518例浆膜腔积液良恶性鉴别三种检验方法评价比较

3 讨论

对浆膜腔积液进行检验有利于对其性质进行鉴别，而目前临床上鉴别良恶性浆膜腔积液，一般采用病理液基联合免疫组化法［3］。本资料结果显示，脱落细胞形态学法与病理液基联合免疫组化法比较，差异有统计学意义（P＜0.05），其原因是由假阳性和假阴性引起。假阳性主要是肺结核［4］和肝硬化患者会出现偶见的高度核异质细胞，假阴性主要是脱落细胞形态学标本量较少漏检、肿瘤细胞形态不典型等。肿瘤标志物不仅在患恶性肿瘤时会升高［5-6］，在某些炎症和急性时相反应中也可升高［7］，因此，在其用于检测恶性肿瘤时，方法敏感度较高，但特异度较低，通过脱落细胞形态学联合患者血清肿瘤标志物检测，可以增高特异度、阳性预测值及准确度［8-9］。病理液基联合免疫组化法作为临床常用的良恶性浆膜腔积液的鉴定方法，也有其弊端存在，如操作繁琐，程序复杂，常需要3～5天时间，延误患者病情；对单个脱落细胞大小、形态及内部结构观察不清晰［2］；对鳞癌、小细胞癌、恶性间皮瘤等形态不典型的肿瘤细胞难以鉴别［3］，需联合免疫组化加以鉴别，这就需要更长时间。脱落细胞形态学联合肿瘤标志物法能在2 h内快速作出鉴别，且敏感度、特异度及准确度均能达到病理液基联合免疫组化法，为鉴别良恶性浆膜腔积液的另一途径。在脱落细胞形态学中还需加强技术改进，如：增加浆膜腔积液的标本量；增强检验人员的镜下识别能力；对肺结核及肝硬化等标本需联合患者血清肿瘤标志物检测综合考虑并随访追踪观察；还可联合流式细胞术等其它检测技术［10］，为良恶性浆膜腔积液的鉴别提供更多的检测方法。

综上所述，对良恶性浆膜腔积液的鉴别，单靠一项指标对其作出诊断易产生误诊或漏诊，为提高对恶性浆膜腔积液的准确率，可联合多项指标综合考虑。脱落细胞形态学联合肿瘤标志物法可作为良恶性浆膜腔积液鉴别的又一可靠方法，且此方法快速、准确、简单方便，值得临床推广。