丹霞铁皮石斛保健功能的实验研究

胡宗礼，黄晓萍，于白音

（韶关学院 英东生物与农业学院，广东 韶关 512005）

铁皮石斛（Dendrobium officinaleKimura et Migo）属于兰科石斛属中多年生草本植物，以茎入药，性微寒，味甘，具有益胃生津、滋阴清热等功效. 研究表明，铁皮石斛主要含石斛多糖、黄酮类、石斛碱等活性成分，具有抗肿瘤、增强机体免疫力、抗衰老、降血糖等作用［1-2］.

丹霞铁皮石斛是产于广东省韶关市仁化县丹霞山地区的一个新品种，前期的研究显示主要含多糖类成分，生物碱和黄酮类含量较低. 有研究显示，各地区铁皮石斛的成分及其功效存在明显差异，而这些差异与地理位置、种质资源与人工繁育体系有关［3-4］.

本文通过对丹霞铁皮石斛的抗疲劳、耐缺氧、抗氧化作用与免疫调节等作为指标来评价丹霞铁皮石斛的作用，为其开发应用提供实验依据.

1 实验材料

丹霞铁皮石斛、广西铁皮石斛由韶关学院石斛研究基地提供；SOD试剂盒、MDA试剂盒、GSH试剂盒均购于南京建成生物工程研究所；雄性昆明小白鼠购于南方医科大学实验动物中心.

2 实验方法

2.1 受试铁皮石斛液的制备

干燥的铁皮石斛经粉碎，按料液比（W/V）1∶40加蒸馏水回流煮沸1 h后过滤，丹霞铁皮石斛滤液分别浓缩为2.5%、5.0%、10.0%，广西铁皮石斛滤液浓缩为10.0%，冰箱冷藏保存备用.

2.2 丹霞铁皮石斛的抗疲劳作用

小白鼠随机分配给对照组、丹霞铁皮石斛不同浓度组和广西铁皮石斛组，每组10只. 各组小鼠自由进食进水，每天上午灌胃给石斛液，剂量为0.02 mL·（g体质量）-1，对照组灌胃给予等量生理盐水，连续给石斛液20 d；第21 d，小鼠称重后，腰部固定10%体质量的负荷，然后放进水温30 ℃、水深25 cm的水槽中，记录从入水开始至鼻腔第一次沉下水面的时间.

2.3 丹霞铁皮石斛的耐缺氧作用

实验分组、给石斛液剂量和时间同“2.2”. 第21 d，将小鼠单只放进装有10 g钠石灰的250 mL广口瓶内，盖上盖子，密封，观察并记录小鼠缺氧死亡的时间.

2.4 丹霞铁皮石斛的抗氧化作用

实验分组、给石斛液剂量和时间同“2.2”. 游泳实验结束后将小鼠脱臼处死，剖腹，切开腹主动脉取血，离心分离血清，按试剂盒说明书方法测定SOD、MDA及GSH含量.

2.5 丹霞铁皮石斛对小鼠免疫功能的影响

实验分组、给石斛液剂量和时间同“2.2”. 游泳实验结束后将小鼠脱臼处死，称重，然后取小鼠胸腺和脾脏，用吸水纸吸干胸腺和脾脏表面的水分与血液后称重，分别计算胸腺、脾脏等器官指数.

2.6 数据处理

所有数据用SPSS 16统计软件进行统计处理，以P＜0.05为显著性差异.

3 结果

3.1 丹霞铁皮石斛对小鼠游泳时间的影响

实验结果显示，丹霞铁皮石斛能显著延长小鼠负重游泳时间（P＜0.05，P＜0.01），而且呈现明显的量效关系，表明丹霞铁皮石斛有明显的抗疲劳作用（表1）；同时，实验结果显示，10.0%丹霞铁皮石斛延长小鼠负重游泳时间优于10.0%广西铁皮石斛，但无显著性差异（P＞0.05）.

表 1 丹霞铁皮石斛对小鼠负重游泳时间的影响（n=10）

3.2 丹霞铁皮石斛对小鼠耐缺氧的影响

实验结果显示，与对照组相比，丹霞铁皮石斛和广西铁皮石斛均能明显延长小鼠在缺氧环境中的存活时间（P＜0.05）（丹霞铁皮石斛与广西铁皮石斛无显著性差异），表明丹霞铁皮石斛具有良好的耐缺氧作用（表2）.

表 2 丹霞铁皮石斛对小鼠耐缺氧时间的影响（n=10）

3.3 丹霞铁皮石斛对小鼠抗氧化作用的影响

实验结果显示，与对照组相比，丹霞铁皮石斛能明显提高小鼠血清SOD和GSH水平、降低MDA含量（P＜0.05）（但与广西铁皮石斛无显著差异），表明丹霞铁皮石斛具有良好的抗氧化作用（表3）.

表 3 丹霞铁皮石斛对小鼠抗氧化水平的影响（n=10）

3.4 丹霞铁皮石斛对小鼠免疫功能的影响

实验结果显示，2.5%和5.0%丹霞铁皮石斛对小鼠胸腺器官指数和脾脏器官指数无明显影响 （P＞0.05），而10.0%的丹霞铁皮石斛和广西铁皮石斛能明显提高小鼠胸腺器官指数和脾脏器官指数 （P＜0.05），表明丹霞铁皮石斛具有增强小鼠免疫功能作用（表4）.

表 4 丹霞铁皮石斛对小鼠免疫器官指数的影响（n=10）

4 讨论

铁皮石斛是众多兰科植物中重要的药用植物之一，位列“中华九大仙草”之首，其药用价值及保健功效被人们广泛认可. 随着人们保健意识的增强，以铁皮石斛为原料开发的保健品在市场非常畅销.

铁皮石斛的主要有效成分包括多糖、黄酮及生物碱. 中药多糖是从天然中药中提取的有效成分，是所有生命有机体的重要组成成分并与维持生命所必需的结构材料，具有广泛的生物学活性，如抗肿瘤、增强机体免疫力［5］、抗衰老［6］、抗氧化［7］、降血糖、降血脂、保护肝脏、抗炎、抗病毒、调节肠道菌群等［8］.

研究表明中药多糖对肿瘤具有抑制增殖和转移、诱导凋亡等抗肿瘤活性［9］，而肿瘤的发生、发展与机体免疫功能低下密切相关. 胸腺和脾脏是机体重要的免疫器官，胸腺主要介导细胞免疫，脾脏主要介导体液免疫. 丹霞铁皮石斛能明显增加小鼠胸腺和脾脏器官指数而增加机体免疫功能，与丹霞铁皮石斛多糖组分密切有关.

机体进行各项生命活动时发生的新陈代谢会连续不断生成自由基，而自由基通过介导脂质过氧化反应能破坏生物膜，导致细胞功能障碍，如心脑血管疾病. 黄酮类化合物中的羟基能高效精准捕捉反应链中的自由基并终止自由基介导的反应，保护造血干细胞和促进造血系统的修复功能［10］. 丹霞铁皮石斛含多种黄酮类成分，能显著提高小鼠血清抗氧化酶SOD、GSH水平，降低脂质过氧化产物MDA的含量，从而提高小鼠抗疲劳和耐缺氧能力.

实验结果表明，丹霞铁皮石斛作为石斛家族中的一个新品种，具有良好的保健功效，具有广阔的开发前景.