某品牌E801电化学发光分析仪A型的分析性能验证

李良敏，熊茂程，雷艳梅，毕冬明，王 渊，杨 雪

成都中医药大学附属医院，四川成都 610072

根据ISO 15189《医学实验室质量和能力认可准则》的规定，要求实验室必须按照标准建立规范化的质量管理体系，当开展新的检测项目，更换检测系统或改变检测试剂盒厂商时，实验室需对其相关方法学分析性能进行验证，对厂商提供的评价资料主要性能进行确认,并每年定期对仪器进行性能验证[1]。本文根据文献[2-6]相关文件，对某品牌E801电化学发光分析仪A型精密度、准确度和分析测量范围等进行评价。

1 材料与方法

1.1标本收集及处理 收集2020年7-12月本院住院部、门诊及健康体检中心体检标本40例，排除脂血、溶血、黄疸的血清样品。以4 000 r/min离心5 min，分离血清后于-70 ℃冷冻保存，5 d内复融后完成各项指标的验证。

1.2仪器与试剂 某品牌E801电化学发光分析仪A型试剂及校准品批号见表1。

表1 某品牌E801电化学发光分析仪A型试剂及校准品批号

1.3质控品及标准物质 此品牌通用激素质控品：PCU1(批号381162)、PCU2(批号381165)；标准品物质为原卫生部临床检验中心2020年第1次内分泌室间质量评价质控品(批号为202011、202012、202013、202014、202015)。

1.4方法 按照ISO 15189《医学实验室质量和能力认可准则》的规定，参照文献[2-6]相关文件。严格按照本实验室操作规程进行校准，质控在控后，对其分析性能进行验证。

1.4.1正确度验证 依据文献[6]，比对2020年原卫生部室间质质量评价结果回执。参加原卫生部临检中心组织的2020年第1次室间质量评价，对其发放的5份室间质控品进行检测，以室间质评回报结果的靶值为标准，计算检测结果与靶值的偏倚(%)，以允许总误差(TEa)的1/2为判断标准进行比较。

1.4.3线性范围验证 依据文献[2]对线性范围进行验证。使用低值、高值血清按一定比例关系配制形成系列浓度的稀释血清样本(每个实验样品在检测系统上重复测定3次，记录结果计算均值，做回归统计分析将实测值与预期值作比较分析)，需注意的是在配制系列稀释血清样本时使用的加样器需经过校准认可，保证稀释血清样本的准确度。各取份数按照5L、4L+1H、3L+2H、2L+3H、1L+4H、5H(L表示低值,H表示高值)的比例配置混合，形成系列验证样品。计算出以上6个样品的理论浓度，并对配制的6个样品进行重复测定，每份样品重复测定3次，将实测值与理论值作比较。做线性回归分析，得出实测值与理论值的线性关系Y=aX+b，计算相关系数(r2)，得到的线性范围与厂家声称的进行比较。

1.4.4临床可报告范围验证 参照文献[7-10]标准，选取已知浓度在分析测量范围内的高值样本1份(接近测量范围上限)，由临床可报告范围的上限值及厂家推荐稀释比例决定稀释倍数，根据稀释倍数计算预期值(理论值)；每份稀释样本重复测定2次，计算测定均值。评价标准：测定均值与预期值的偏差≤1/2TEa的最大稀释倍数乘以稀释前的浓度即为临床可报告范围。

1.4.5参考区间验证 按照文献[3]要求，从本院随机选择体检中心样本40例，男女各20例，年龄20～50岁。对结果进行统计并与试剂说明书提供的参考区间进行比较。R2≥90%以上的检测结果在参考区间范围内(判定标准R2=测定结果在参考范围的例数/总测定例数×100%，结果R2≥90%为合格)说明该参考区间符合对健康人群的筛选，即参考区间验证通过。

1.4.6方法学对比验证 根据文献[11]文件要求，收集每个项目浓度覆盖医学决定水平，并尽可能在线性范围内均匀分布的样本各20个，分别在某品牌E801电化学发光分析A型和E601电化学发光分析B型检测系统进行平行测定。每例样本在两个检测系统中的测试间隔不超过2 h，记录两个检测系统的值并做线性回归分析，得出此品牌E801电化学发光分析A型系统检测值与此品牌E601电化学发光分析B型系统检测值的线性关系Y=aX+b，计算相关系数(r2)，r2≥0.90即验证通过。

1.4.7携带污染验证 参照苏维等[12]对糖抗原携带污染率的参考，先取1份高浓度标本连续测定3次，测定结果为H1、H2、H3；再取1份低浓度标本连续测定3次，测定结果为Ll、L2、L3。按公式计算携带污染率。携带污染率=(L1-L3)/(H3-L3)×100%。携带污染率<1%即通过。

1.5统计学处理 采用Excel 2016和SPSS23.0统计软件进行数据分析，计算相关系数和回归方程。

2 结 果

2.1正确度验证结果 根据原卫生部临床检验中心2020年室间质评结果，从表2可见5份室间质控品的检测结果与靶值的偏倚在-1.91%～1.93%，均在允许范围之内，验证通过。

表2 正确度实验验证结果

2.2精密度验证结果 由表3、4显示可见，质控品和血清样本的实测批内CV%均<6%，批间CV%均<7%，均在厂家说明书给定的允许范围内，验证通过。

表3 2个质控水平批内和批间精密度

续表3 2个质控水平批内和批间精密度

表4 3个血清水平批内和批间精密度

2.3线性范围验证结果 由表5可知，性激素6项和HCG-β测量范围与厂家提供的测量范围相近，说明厂家提供的线性范围为实验室的可报告范围是可靠的。

表5 线性范围和临床可报告范围验证结果

2.4临床可报告范围验证结果 厂商认为FSH、LH、Test的检测范围较宽未给稀释倍数建议，本科室还是参考其他几个激素项目用此品牌稀释液进行1∶10的手工稀释，其余项目均用说明书推荐稀释液和稀释倍数直接上机稀释检测，由表5可以看出所有项目稀释后偏差均≤1/2 TEa，验证通过。

2.5参考区间验证结果 由表6可见在20～50岁的女性和男性中，性激素6项和HCG-β的符合率均为100%，验证通过。

表6 参考区间验证结果

续表6 参考区间验证结果

2.6方法学对比验证结果 某品牌E801电化学发光分析A型和E601电化学发光分析B型两个系统对比试验验证结果可见其每项激素对比验证结果的r2均大于0.99，可见其系统差异性小，故改变测试系统后对临床结果影响小。

2.7携带污染验证结果 通过测定可知HCG-β的H1、H2、H3测定值分别为8 141.00、8 188.00、8 158.00 mIU/mL有；L1、L2、L3测定值分别为5.56、5.65、5.56 mIU/mL。携带污染率=(L1-L3)/(H3-L3)×100%，计算得为0%，验证通过。

3 讨 论

对某品牌E601电化学发光分析B型和E602电化学发光分析C型进行性能评价已有相关报道[12-13]，而作为某品牌公司2019年生产的新一代E801电化学发光分析仪 A型，未见有研究对其进行性能评价。作为新一代检测系统应对其进行主要性能评价，是检验质量的重要保证，其分析性能满足临床要求是医学实验室认可和检验结果互认的根本保证[14]。检验人员也应对所使用仪器的性能全面了解，才能更好地完成临床检验工作。本科室通过对即将在此检测系统上进行测试的性激素6项及HCG-β做了正确度、精密度、线性范围、临床可报告范围、参考范围、方法学对比性能指标验证。同时还对HCG-β做了携带污染验证。

为了更好的验证其系统的精密度本科用了两种方案验证其批内、批间重复性，分别收集了每个项目高、中、低3个水平浓度的血清样本进行批内和批间精密度验证，验证CV%均不超过临床要求的1/4TEa和1/3TEa。对于正确度的验证，选取参加原卫生部临床检测中心的室间质评来进行验证，结果显示偏倚范围为-1.91%～1.93%，测定结果均在允许范围内，说明此品牌E801电化学发光分析仪A型检测性激素6项和HCG-β的正确度高，结果可靠。

线性范围指测定值与稀释倍数呈线性关系的范围，以保证样本的检测结果在线性范围内准确可靠。EP6-A采用多项式回归分析，是目前公认的分析测量范围评价中最好的统计学方法。验证结果显示本实验室测定的线性范围与厂家提供的线性范围相近，且都在厂家提供的范围内，各检测项目的a值和r2均符合要求，说明实测值与理论值具有良好的相关性，结果符合要求。

参考区间指某项检查结果在健康人群中的分布范围，是解释检验结果分析检验信息的一个基本尺度和依据[15]。几乎所有的试剂说明书都会建议各实验室应为其相应患者人群建立参考区间，而实际情况是实验室验证厂家提供的参考区间居多。本研究验证结果显示7种激素r2均在0.99以上，在推荐的参考区间内，符合要求，可直接引用厂家提供的参考区间。通过对某品牌E801电化学发光分析A型和E601电化学发光分析B型的试剂说明书进行对比，也看出厂商所提供的参考范围没有变化，通过比对两个系统做方法学对比试验验证结果可见其每项激素对比验证结果的r2均大于0.99，可见其系统差异性小，故改变测试系统后对临床结果影响小。

携带污染是评价检测结果可能受到该标本之前或之后标本的携带污染影响。由于某品牌E801电化学发光分析A型在加入样本和试剂前，会自动冲洗加样针，且在测试过程使用了一次性的吸头和反应杯，极大降低了发生携带污染的潜在风险。本实验室的验证结果表明，携带污染率极低，检验结果准确可靠。

综上所述，此品牌E801电化学发光免疫分析仪A型检性激素6项和HCG-β的正确度、精密度、线性范围、临床可报告范围、参考范围、方法学对比及携带污染能指标均验证合格，达到质量标准要求，可以用于临床检测。