血清CYFRA21-1、TSGF及miR-93检测在鼻咽癌早期诊断中的应用

柳帅 王振鹏 张治文 宋照营★

鼻咽癌指发生于鼻咽腔顶部和侧壁的恶性肿瘤，是我国常见的恶性肿瘤之一。由于鼻咽癌病理位置隐匿，且早期表现无明显特征，多数患者就诊时已显示转移［1-2］。目前，临床主要依靠影像学、病理活检、细胞涂片等方式进行检查。研究认为鼻咽癌肿瘤标志物或相关指标有助于早期诊断鼻咽癌［3］。血清细胞角蛋白19 片段（cytokeratin 19 fragment，CYFRA21-1）、恶性肿瘤特异性生长因子（tumor specific growth factors，TSGF）是临床常见的血清肿瘤标志物，研究显示鼻咽癌等恶性肿瘤患者具更高的血清CYFRA21-1、TSGF 水平，两者可作为临床诊断早期鼻咽癌的辅助血清肿瘤标志物［4-5］，但血清CYFRA21-1、TSGF 诊断早期鼻咽癌的特异度欠佳［6-7］。

miR-93 是具有调控作用的非编码RNA，最新研究认为miR-93 与鼻咽癌肿瘤生成/侵袭/转移、细胞有丝分裂、信号转导通路等紧密相关［8］。本研究将通过分析CYFRA21-1、TSG 及miR-93 检测对早期鼻咽癌的诊断应用价值，以期为早期鼻咽癌的临床诊治提供参考，具体报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2018年6月至2020年6月于安阳市中医院接受诊疗的78 例早期鼻咽癌患者为鼻咽癌组。纳入标准：①磁共振成像（MRI）检查、病理活检综合确诊早期鼻咽癌；②年龄≥18 岁；③符合鼻咽癌临床分期标准［9］，Ⅰ期48 例、Ⅱ期30 例；④临床资料完善。排除标准：①合并其他恶性肿瘤疾病；②确诊严重器质性疾病；③确诊神经系统病变；④存在认知障碍。另选取同期78 例鼻咽炎患者为鼻咽炎组，选取同期体检的78 例健康成人为对照组。三组一般资料比较差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1。本研究符合《赫尔辛基宣言》原则。

表1 三组的一般资料比较［（±s），n（%）］Table 1 Comparison of general data of the three groups［（±s），n（%）］

表1 三组的一般资料比较［（±s），n（%）］Table 1 Comparison of general data of the three groups［（±s），n（%）］

组别鼻咽癌组鼻咽炎组对照组F/χ2值P 值性别男58（74.35）59（75.64）61（78.21）0.856 0.214女20（25.64）19（24.35）17（21.79）年龄（岁）55.16±5.09 56.91±7.12 55.57±6.28 1.689 0.187 BMI（kg/m2）24.98±2.69 24.74±2.77 24.81±3.05 0.147 0.863

1.2 方法

抽取所有受试者空腹肘部静脉血3 mL，放入EDTA 抗凝管中，12 000 rpm（离心半径10 cm）离心处理15 min 得血清与血浆，将血清置于-20℃保存待测。采用Elecsys1010 型电化学发光免疫分析仪及其配套试剂盒（瑞士Roche 公司）检测CYFRA21-1；采用生化比色法检测TSGF，试剂盒购于新大陆生物技术有限公司；采用荧光定量PCR 检测miR-93 水平，试剂盒购自新大陆生物技术有限公司，引物序列由赛百慷（上海）生物技术股份有限公司合成。

1.3 统计学方法

采用统计学软件SPSS24.0 分析整理数据，计量资料采用（±s）表示，多组间比较采用单因素方差分析（两两比较采用LSD-t检验）；计数资料采用n（%）表示，行χ2检验；Logistic回归分析构建血清CYFRA21-1、TSGF、miR-93 联合诊断模型，模型拟合度采用Hosmer-Lemeshow 检验，绘制受试者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲线分析诊断价值，曲线下面积值（area under the ROC curve，AUC）的比较采用非参数检验；以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组血清指标比较

鼻咽癌组、鼻咽炎组CYFRA21-1、TSGF、miR-93 水平均显著高于对照组，且鼻咽癌组CYFRA21-1、TSGF、miR-93水平显著高于鼻咽炎组，差异均有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 三组血清指标比较（±s）Table 2 Comparison of serum indexes of the three groups（±s）

表2 三组血清指标比较（±s）Table 2 Comparison of serum indexes of the three groups（±s）

注：与对照组相比，aP＜0.05；与鼻咽炎组相比，bP＜0.05。

组别鼻咽癌组鼻咽炎组对照组F 值P 值n 78 78 78 CYFRA21-1（ng/mL）2.70±0.63ab 1.99±0.49 1.58±0.35 98.93＜0.001 TSGF（U/L）79.14±15.22ab 60.49±18.24 55.11±15.15 48.88＜0.001 miR-93 17.06±5.82ab 11.58±3.03 4.05±0.95 227.13＜0.001

2.2 早期鼻咽癌患者不同临床分期的血清指标比较

Ⅱ期血清CYFRA21-1、TSGF、miR-93 水平高于Ⅰ期（P＜0.05）。见表3。

表3 早期鼻咽癌患者不同临床分期的血清指标比较（±s）Table 3 Comparison of serum indexes among patients with early nasopharyngeal carcinoma in different clinical stages（±s）

表3 早期鼻咽癌患者不同临床分期的血清指标比较（±s）Table 3 Comparison of serum indexes among patients with early nasopharyngeal carcinoma in different clinical stages（±s）

组别Ⅰ期Ⅱ期t 值P 值n 48 30 CYFRA21-1（ng/mL）2.43±0.65 3.13±0.62 4.709＜0.001 TSGF（U/L）75.35±14.29 85.21±16.05 2.827 0.006 miR-93 15.07±5.31 20.25±6.20 3.928＜0.001

2.3 血清CYFRA21-1、TSGF、miR-93 及其联合诊断早期鼻咽癌的价值

ROC 曲线分析显示CYFRA21-1、TSGF、miR-93 联合诊断鼻咽癌AUC 为0.938，敏感度、特异度分别为91.03%、85.90%，高于单一指标诊断（P＜0.05），见表4、图1。

图1 联合诊断早期鼻咽癌的价值Figure 1 The value of combined diagnosis of early nasopharyngeal carcinoma

表4 各项血清指标联合诊断早期鼻咽癌的价值分析Table 4 Value of the combination of serum indexes in the diagnosis of early nasopharyngeal carcinoma

3 讨论

鼻咽癌是我国相对高发的疾病，相关研究显示，早期鼻咽癌患者的5年生存率可达95%，而晚期患者低于70%，因此早期诊断尤为重要［10］。目前，鼻咽癌诊断多数为存在临床症状时，通过病理学检查与多聚酶联检查为参考诊断。但早期鼻咽癌临床症状不明显，且病理检查在一定程度上受采样、病变部位等因素影响，存在漏诊、误诊风险。探究可靠的血清肿瘤生物标志物用于鼻咽癌的早期诊断一直是临床关注的焦点，于高危鼻咽癌的早发现、早诊断及早治疗有重要意义［11］。

血清CYFRA21-1 是指细胞角质蛋白19 片段，其广泛分布于鳞状上皮和组织表面，正常状态下以寡聚物的形式存在，含量极低。以往研究证实恶性肿瘤患者血清CYFRA21-1 水平存在异常升高现象［12］。本研究结果显示，鼻咽癌患者血清CYFRA21-1 水平显著高于鼻咽炎及健康人群，且Ⅱ期患者血清CYFRA21-1 水平明显高于Ⅰ期患者，说明鼻咽癌分期越高，CYFRA21-1 水平越高，这与以往报道结论相符［13］。究其原因，当鳞状上皮组织恶变激活蛋白酶后，激活的蛋白酶可加快降解细胞速度，使细胞中大量角蛋白碎片断释放进入血液，导致血清CYFRA21-1 水平升高。在诊断价值上，本研究ROC 曲线分析显示CYFRA21-1 诊断鼻咽癌的灵敏度与特异度分别为85.90%、62.82%，虽AUC 高于血清TSGF、miR-93，但其特异性不甚理想，分析可能与相关上皮起源的肿瘤均可表达细胞角质蛋白19 片段有关，由此也可见，单一血清CYFRA21-1 诊断早期鼻咽癌存在局限性。

TSGF 是肿瘤特异性生长因子，与肿瘤细胞及肿瘤细胞周围毛细血管增生密切相关，作为广谱的肿瘤生物标志物，其在乳腺癌、肝癌等多种恶性肿瘤疾病中均有异常高表达现象。本研究结果显示，鼻咽癌组TSGF 水平显著高于鼻咽炎及健康对照组。随着恶性肿瘤的形成及增殖，TSGF 可逐渐被释放至外周血，因此在恶性肿瘤形成早期TSGF便可明显上升［14］。本研究结果还显示，Ⅱ期患者血清TSGF 水平明显高于I 期患者，说明鼻咽癌分期越高，TSGF 水平越高。既往研究报道，血清TSGF 可作为临床监测肿瘤消长的标志物，但TSGF 监测也存在一定局限性，其不仅可促进肿瘤血管的增生，对非肿瘤血管同样起到作用［15］。本研究ROC 曲线分析结果显示，TSGF 诊断鼻咽癌的特异度相对欠佳，仅为74.36%，敏感度也仅为80.77%、74.36%，由此可见，血清TSGF 虽可作为临床诊断早期鼻咽癌的血清标志物，但其效能仍有提升空间。

miR-93 是临床发现的一种非编码短序小RNA，其可发挥抑制癌基因的作用，同时作为检测早期癌症的分子标记，其能预测或早期诊断喉鳞癌等肿瘤疾病［16］。本研究结果显示，鼻咽癌患者的miR-93 水平显著高于鼻咽炎组及对照组，且伴随肿瘤分期的增加，血清miR-93 水平显著上升。李中华等［17］研究也显示miR-93 在鼻咽癌组织中具有较高表达。既往研究也显示，miR-93 参与鼻咽癌发展进程，促进癌细胞的增殖及侵袭，且可通过靶向上调表皮生长因子与白细胞介素8 的表达促进肿瘤血管的生成［18］。在诊断价值上，本研究ROC 曲线分析显示，miR-93 诊断鼻咽癌的灵敏度与特异度分别为53.85%、93.59%，虽特异性较高，但敏感度不足60%。基于不同血清肿瘤生物标志物诊断早期鼻咽癌的优劣势，本研究将血清CYFRA21-1、TSGF、miR-93 进行联合检测，结果显示三者联合诊断鼻咽癌AUC 上升至0.938，显著高于单一指标诊断。何平等［19］研究也联合VCA-IgA、CEA 及CYFRA21-1 等指标诊断早期鼻咽癌，认为上述指标联合检测有助于提高诊断效能，这一定程度支持了本研究结论。

综上所述，血清CYFRA21-1、TSGF、miR-93 均可作为临床诊断早期鼻咽癌的血清肿瘤生物标志物，且上述三种血清指标联合检测可进一步提升诊断效能，弥补单一血清指标辅助诊断的局限性。