sdLDL-C、Annexin A2、Hcy对AIS患者颈动脉斑块稳定性的评估价值

高永超 刘晓文 王晓玙 王少兰

急性缺血性脑卒中（acute ischemic stroke，AIS）是危害中老年人健康的常见病，随着社会老龄化和生活方式改变，我国老年人群中AIS 发病率呈逐年上升趋势，已成为影响人类健康最重要的疾病之一。研究显示［1］，动脉粥样硬化是AIS 的主要病因，且与动脉粥样硬化易损斑块不可预测的破裂有关。因此，准确评估颈动脉粥样硬化斑块的稳定性对防治AIS 具有十分重要的意义。目前临床主要通过超声、CT 血管造影或磁共振等影像学方法评估颈动脉粥样硬化斑块的稳定性，但尚缺乏定量的评估指标。国内外研究表明［2-4］，小而密低密度脂蛋白胆固醇（small dense Low-Density Lipoprotein，sdLDL-C）、膜联蛋白A2（Annexin A2）、同型半胱氨酸（homocysteine ，Hcy）均与动脉粥样硬化的发生发展关系密切，但与颈动脉斑块稳定性关系的报道较少。本研究通过探讨sdLDL-C、Annexin A2、Hcy与AIS 患者颈动脉斑块稳定性的关系，为临床评估颈动脉斑块稳定性提供新指标与新方法。

1 对象与方法

1.1 研究对象

便利抽样法选取2019年8月至2022年2月期间河北北方学院附属第二医院AIS 患者92 例为研究对象。纳入标准：①符合《中国急性缺血性脑卒中诊治指南2018》［5］中AIS 的诊断标准并经CT 或MRI 检查确诊；②发病时间＜7 d；③近3 个月内未发生非颈动脉栓塞；④患者知情并签署同意书。排除标准：①脑肿瘤、脑外伤、血液病等引起的脑卒中；②患有神经系统疾病，如意识障碍、帕金森等，无法配合研究；③近一个月内服用过影响脂代谢药物和抗氧化剂。根据颈动脉斑块的影像学检查结果将92 例AIS 患者分为稳定斑块组（n=33）与不稳定斑块组（n=59），另选取同期30 名健康体检者为健康组。稳定斑块组男18 例，女15 例，年龄（74.36±14.24）岁；不稳定斑块组男29 例，女30 例，年龄（73.87±12.63）岁；健康组男12 例，女18 例，年龄（72.09±13.76）岁。3 组性别、年龄等一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。本研究经河北北方学院附属第二医院医学伦理会审批并通过。

1.2 颈动脉超声检查方法

采用西门子Acuson S2000 彩色多普勒超声诊断仪进行诊断，采用914 探头沿患者胸锁乳突肌外缘进行横、纵扫查颈总动脉和分叉部以及颈内动脉起始位置。并测定颈动脉内膜中层厚度（intimamedial thickness，IMT），IMT＞1.5 mm 提示斑块形成。依据病理学分为扁平斑和软斑以及硬斑与溃疡斑，其中软斑和溃疡斑归为不稳定斑块，硬斑和扁平斑归为稳定斑块［6］。

1.3 sdLDL-C、Annexin A2、Hcy 检测方法

于研究对象入院次日清晨采集空腹肘正中静脉血10 mL，注入含有抗凝剂的试管中混匀后于室温静置30 min，3 000 r/min 离心10 min（离心半径10 cm）后取上层血清，保存于-20℃冰箱中待测。sdLDL-C、Hcy 检测：采用AU5800 系列全自动生化分析仪（美国Beckman Coulter 公司）采用去除法、免疫透射比浊法进行测定。Annexin A2 检测：采用双抗体夹心法使用试剂盒（广州祺正生物科技有限公司）进行测定。

1.4 统计学方法

采用SPSS Statistics 21 统计学软件进行分析。计量资料以（）表示，组间采用t检验；计数资料以n（%）表示，采用χ2检验；多组间比较采用单因素方差分析，采用ROC 曲线分析各指标诊断价值，曲线下面积值（AUC）的比较采用非参数检验，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3 组sdLDL-C、Annexin A2、Hcy 水平比较

3 组sdLDL-C、Annexin A2、Hcy 水平比较：不稳定斑块组＞稳定斑块组＞健康组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 3 组sdLDL-C、Annexin A2、Hcy 水平比较（±s）Table 1 Comparison of the levels of sdLDL-C，Annexin A2 and Hcy among the three groups（±s）

表1 3 组sdLDL-C、Annexin A2、Hcy 水平比较（±s）Table 1 Comparison of the levels of sdLDL-C，Annexin A2 and Hcy among the three groups（±s）

注：与健康组比较，aP＜0.05；与不稳定斑块组比较，bP＜0.05。

组别不稳定斑块组稳定斑块组健康组F 值P 值n 59 33 30 sdLDL-C（mmol/L）1.55±0.34a 1.32±0.28ab 0.36±0.11 179.585＜0.001 Annexin A2（ng /L）2.53±0.71a 2.27±0.65ab 1.58±0.32 23.468＜0.001 Hcy（μmol/L）22.48±4.15a 18.32±4.37ab 11.27±4.68 66.324＜0.001

2.2 AIS 患者颈动脉斑块稳定性的多因素分析

以颈动脉斑块是否稳定为因变量，否赋值0，是赋值1；以两组比较差异有统计学意义的指标作为自变量，sdLDL-C、Annexin A2、Hcy 低于两组均值赋值0，高于两组均值赋值1，应用多因素Logistic 回归方程分析，结果显示，sdLDL-C、Annexin A2、Hcy是AIS 患者颈动脉斑块稳定性的独立影响因素（P＜0.05）。见表2。

表2 AIS 患者颈动脉斑块稳定性的多因素Logistic回归分析Table 2 Multivariate logistic regression analysis of carotid plaque stability in patients with AIS

2.3 sdLDL-C、Annexin A2、Hcy 对AIS 患者颈动脉斑块稳定性的评估价值

ROC 曲线分析显示，Hcy、sdLDL-C、Annexin A2 对应的AUC 分别为0.862、0.837、0.795，判断AIS 患者颈动脉斑块稳定性的敏感度、特异度分别为86.4%、84.8%；83.1%、81.8%；79.7%、81.8%。见表3、图1。

表3 sdLDL-C、Annexin A2、Hcy 对AIS 患者颈动脉斑块稳定性的评估价值Table 3 Evaluation value of sdLDL-C，Annexin A2 and Hcy on carotid plaque stability in patients with AIS

3 讨论

AIS 是由于正常血液循环受阻，脑组织血液供应不足导致脑细胞不同程度的缺血缺氧，最终软化或坏死。医学研究表明［7］，动脉粥样硬化与其基础上的颈动脉不稳定斑块突然破裂或溃疡/血栓形成均属AIS 的发病机制。此外，AIS 的发生与颈动脉斑块的稳定性密切相关，不稳定性颈动脉斑块是缺血性脑卒中的危险因素［8］。因此，准确预测斑块性质为预防AIS 发生的关键。虽然影像学方法可用于判断斑块的稳定性，但传统的影像诊断技术只能显示动脉管腔或斑块的形态，严重缺乏对斑块稳定性的评估。

近期研究发现［9］，降低sdLDL-C 水平可增加斑块的稳定性，表明sdLDL-C 水平与斑块稳定性之间存在内在联系。本研究采用颈动脉超声造影根据斑块稳定性对AIS 患者进行分组，分析了sdLDL-C水平与颈动脉斑块稳定性的关系。结果显示，sdLDL-C 水平：不稳定斑块组＞稳定斑块组＞健康组，且多因素Logistic 回归分析显示sdLDL-C 是AIS 患者颈动脉斑块稳定性的独立影响因素。这可能是由于不稳定斑块通常伴随巨噬细胞聚集和平滑肌细胞增殖减少，LDL 亚组分更密集，更容易到达内皮下层被氧化，从而加速斑块的形成［10］。Qiao等［11］在一项横断面研究中发现，不稳定斑块患者的sdLDL-C 水平高于稳定斑块与无斑块患者，并通过Logistic 回归分析证明sdLDL-C 是不稳定斑块的危险因素，这表明sdLDL-C 可作为评估颈动脉斑块稳定性的重要指标，与本研究结论部分相符。

Annexin A2 是一种多效性蛋白质，可通过钙依赖性方式结合阴离子磷脂，参与细胞运动、内吞作用、离子通道形成等多种细胞过程。Annexin A2还通过TLR4 内化和易位到内体中发挥作用，这有助于从巨噬细胞释放抗炎/促炎细胞因子。此外，相关研究表明［12-13］，Annexin A2 在血管新内膜中的表达增加，并介导血管平滑肌细胞迁移和增殖，促进动脉粥样硬化斑块的形成。本研究发现，不稳定斑块组Annexin A2 水平高于其他组，提示Annexin A2 与动脉粥样硬化斑块的形成与稳定性均相关。本研究还发现，不稳定斑块组Hcy 水平亦高于其他组。Hcy 水平异常是导致脑卒中发生的危险因素，其通过内皮细胞损伤、氧化应激、炎症反应等多种机制参与缺血后引起的的一系列损伤。如产生超氧化物和过氧化物，导致血管内皮细胞损伤和功能障碍，增加血栓及斑块形成［14］。此外，Hcy 还能够促使血管平滑肌细胞过度增殖，从而加快动脉粥样硬化。武晓玲等［15］通过将163 例急性脑梗死患者按IMT 及斑块稳定性分为两组，结果发现不稳定斑块患者Hcy 水平明显高于稳定斑块患者，且Hcy 水平与急性脑梗死病情严重程度相关。张帆等［16］也发现，Hcy 表达水平过高是导致AIS 患者颈动脉硬化斑块不稳定的独立危险因素。

综上所述，伴有颈动脉斑块的AIS患者sdLDL-C、Annexin A2、Hcy 水平均高于健康人群，并且不同斑块稳定性患者sdLDL-C、Annexin A2、Hcy 水平也存在差异，sdLDL-C、Annexin A2、Hcy 水平检测对AIS 患者颈动脉斑块稳定性的判断具有重要价值。本研究还存在许多不足之处：①研究样本量较少，且研究对象均来自河北北方学院附属第二医院，可能由于地域、文化或习俗差异，导致代表性不高。②本研究为横断面调查，而AIS 的疾病发展存在一定的动态性，可能对实验结果有一定影响。希望将来可进行多中心、大样本的前瞻性纵向研究，以便更深入地探究sdLDL-C、Annexin A2、Hcy 对AIS 患者颈动脉斑块稳定性的评估价值。