药材鹿角的性状鉴定及其抗骨质疏松的活性分析

王晓明

《神农本草经》记载道：鹿角乃为药材之上品。《中国药典》中指出药用鹿角为梅花鹿、动物马鹿，具有活血、强筋壮骨及温肾补虚的作用[1]。现实当中，存在着多种带角的鹿，不同样式的角枝实为鹿类动物最为典型的结构特征。我国与鹿之间渊源深厚，实为鹿类进化的中心，有着丰富的鹿资源，不仅能有马鹿、梅花鹿等药典当中记载的鹿，而且还有其他数十种鹿科动物，其数量在全球鹿类总数中的比重达45.8%。尽管药典当中明确规定可当作中药来用的鹿角仅为马鹿、梅花鹿的角及其角盘，但其他鹿类的角同样有着不错的药用价值，比如毛冠鹿、赤麂、林麂及马鹿等。骨质疏松实为一种临床多发病，典型特征为骨组织显微结构出现进行性改变、骨量减少等，患此病后，患者非常容易引发骨折，尤其是全身代谢性骨症，因而对人们日常生活、工作均造成了严重影响。骨质疏松有着十分复杂的发病机制，且许多学者[2-3]指出，其发病根源在于骨胶原合成速度较正常低。因此，此病可看作一种胶原病。本文围绕中医“肾藏精，主骨”等理论，探讨鹿角对骨质疏松所产生的影响，现探讨如下。

1 材料与方法

1.1 材料

2021年1月—2022年1月期间，选取7种鹿角，即赤麂、毛冠鹿、小麂、林麂、黑麂、马鹿及梅花鹿角等,并围绕梅花鹿鹿角，测定其抗骨质疏松的活性。

1.2 方法

1.2.1 鹿角的性状鉴定

以手摸、眼观等方式来分析鹿角的性状特点，以鹿角的形态特征为依据（如角干形态、分叉等），进行鹿角形态公式的编制，用B代表角柄，C代表角干部分，A表示角的前叉，P代表角的后叉，S代表坐地叉，α代表前叉与后叉间的角度，X为分一叉，而“X……”代表分叉数据＞3个，“⌒”此角呈虹状，据此来阐述鹿角的物理特征。

1.2.2 梅花鹿鹿角盘抗骨质疏松的活性测定

（1）实验动物。小鼠80只，（22.3±1.2）g，雌雄均为40只。（2）实验药品。葡萄糖酸钙片（海南制药厂有限公司，国药准字H46020253，规格：0.5 g×100片）、注射用环磷酰胺（江苏恒瑞医药股份有限公司，国药准字H32020857，规格：0.2 g×10瓶）、羟脯氨酸标准品（浙江紫荆生物技术有限公司杭州分公司，国械注准20163400047，规格：20人份）等。（3）仪器。山东高密彩虹分析仪器有限公司产的紫外可见分光光度计（UV-754型）；上海亚荣生化仪器厂生产的旋转蒸发器（RE-52AA型）；金羊天平仪器厂生产的电子计数天平。（4）实验方法。①提取有效部位。把梅花鹿的鹿角研磨成粉（300 g），采用乙醇（70%）浸泡，时间为24 h，过滤且合并提取液，用旋转蒸发仪对提取液进行减压浓缩，且将乙醇回收，用冻干机把浓缩之后的提取液进行冻干处理，最终便能获得乙醇提取物（70%）；提取乙醇后，把粉干燥处理，然后用蒸馏水（80℃）进行提取（24 h），过滤、合并水提液，且进行减压浓缩，把浓缩的水体液进行冻干处理，最终便能获得鹿角盘水提物。②制备供试药品。乙醇提取物组：取冻干之后的鹿角盘70%乙醇提取物0.6 g、1.8 g，置入到容量瓶中（100 mL），用生理盐水稀释到刻度，配成溶液6 mg/mL、18 mg/mL。环磷酰胺：取注射用环磷酰胺（0.4 g），融入生理盐水中（200 mL），得到溶液2 mg/mL备用。③实验分组。随机将小鼠分成空白组、水提物低剂量组（500 mg/kg）、环磷酰胺模型组（20 mg/kg）、水提物高剂量组（1 000 mg/kg）、乙醇提取物高剂量组（180 mg/kg）、乙醇提取物低剂量组（60 mg/kg）。④构建动物模型及给药。建立环磷酰胺骨质疏松模型，采用上午造模而下午用药的范式，除空白组外，其他组均灌胃使用造模药物：环磷酰胺20 mg/（kg·d），连续用药14 d。

1.3 观察指标

分析鹿角的性状，对比各组免疫器官指数[免疫器官质量（mg）/小鼠体重（g）=免疫器官指数]、古骨计量学指标（如股骨长度、股骨横径等）。

1.4 统计学方法

采用SPSS 21.0统计学软件处理数据，计数资料用n（%）表示，行χ2检验；计量资料以（±s）表示，行t检验，P＜0.05则差异有统计学意义。

2 结果

2.1 鹿角的性状鉴定结果

（1）毛冠鹿。又被称之为青麂。雄性具非常短且不分叉的桩角，被毛遮盖而不明显，公式为♂C。（2）赤麂。雄性赤麂长，并且向后还有弯曲的双叉角，其角向后且朝内弯曲，最突出特点即为角柄多长于角干，公式为♂Cx。（3）小麂。雄性小麂的角较为简单，公式为：♂Cx，C＞B。（4）黑麂。相似于赤麂，其角柄较角干长，并且很小，公式：♂C，C＜B。（5）林麂。其角比较小，角尖且直，角柄长于角干，公式为：♂Cx，C＜B。（6）梅花鹿。其角一般为4叉角，眉叉于角干近基部与角干之间呈锐角，且向前伸出，二叉处在角干的中部，公式为♂A1P1A2P2A3P3。（7）马鹿。角枝呈现为圆形，分为6～9叉。眉叉在鹿角主干的基部伸出，向前方延展，并且与主干间呈近似直角，公式为♂A1P1SA1P2A1P3。

2.2 药材鹿角抗骨质疏松的活性分析

20 mg/（kg·d）环磷酰胺能够降低小鼠胸腺指数（t=4.28，P＜0.05），且股骨横径、股骨干重、股骨长减少（t=5.47、6.12、6.61，P＜0.05），羟脯氨酸、骨钙含量较空白组低（t=5.41、6.29，P＜0.05），造成小鼠骨丢失。组合物低剂量组股骨干重、横径较模型组高（t=4.26、5.14，P＜0.05）。与模型组相比，组合物高剂量组股骨干重有明显增加（t=4.91，P＜0.05），且组合物髙、低剂量都能够对小鼠骨钙的流失进行拮抗，差异有统计学意义（t=6.81、7.56，P＜0.05），见表1、表2。

表1 各组小鼠脏器指数对比（mg/kg，±s）

表1 各组小鼠脏器指数对比（mg/kg，±s）

组别 数量 脾脏指数 胸腺指数 肝脏指数空白组 10 4.72±1.00 3.56±0.97 49.67±14.08环磷酰胺模型组 10 4.69±2.18 1.43±0.36 47.67±10.49水提物低剂量组 10 4.02±1.35 1.96±0.93 49.98±19.17水提物高剂量组 10 4.61±1.15 1.86±0.73 49.80±15.31乙醇提取物低剂量组 10 3.38±1.23 1.53±0.51 37.80±7.05乙醇提取物高剂量组 10 3.44±1.26 1.72±0.65 47.06±8.26组合物低剂量组 10 3.75±1.44 1.82±0.71 44.14±8.39组合物高剂量组 10 3.75±1.49 2.22±0.50 46.07±14.44

表2 各组股骨计量学指标对比（±s）

表2 各组股骨计量学指标对比（±s）

组别 数量 股骨干重（g） 股骨长（mm） 股骨横径（mm）空白组 10 0.049±0.003 15.18±0.56 1.65±0.08环磷酰胺模型组 10 0.035±0.003 13.74±0.40 1.49±0.08水提物低剂量组 10 0.046±0.003 14.90±0.47 1.54±0.12水提物高剂量组 10 0.041±0.002 14.80±0.30 1.51±0.05乙醇提取物低剂量组 10 0.041±0.003 14.80±0.38 1.51±0.10乙醇提取物高剂量组 10 0.042±0.003 14.81±0.65 1.55±0.14组合物低剂量组 10 0.046±0.003 14.77±0.47 1.60±0.09组合物高剂量组 10 0.045±0.001 14.84±0.38 1.52±0.05

3 讨论

鹿角每年都会脱落，之后会有新的角干产生，而对于新生鹿角而言，其外观会变得更为复杂[4]。需要指出的是，鹿角大小不一，部分比较简单，仅有一个角干，且没有分叉，如毛冠鹿，但通常情况下，鹿角均会有分叉；有些角的形态却比较复杂，并且还比较大，比如马鹿、梅花鹿等，马鹿角成角规模大，而且还有着非常多的分叉[5-6]。依据鹿角的不同形状特征，可对其进行准确区分。现阶段，在研究药用鹿角上，大多集中于梅花鹿、马鹿的鹿角上，而对诸如赤麂、毛冠鹿、小麂、林麂、黑麂等，却较少涉足[7-8]。因此，通过对多种鹿角的性状特征进行研究，且展开比对，能够为药用鹿角资源的合理化、充分化利用，提供可靠保障与理论支撑，而到底何种鹿角的药用价值更高，仍需深究。

需要指出的是，骨组织多有矿物质、有机质等构成，而在矿物质当中，含量最高的是骨钙、骨磷，而在骨骼当中的钙、磷，其存在形式为羟基磷酸钙，组建成了骨骼的基本框架[9]，同时还是骨的重要硬度部分。另需指出的是，在骨骼当中，骨胶原占比大于90%[10]，所以，通过明确羟脯氨酸的具体含量，便能够将骨当中的有机质含量给推算出来。因此，羟脯氨酸的含量多少，能够将骨质量状况、骨骼硬度、骨骼矿化程度及骨量多少等给反映出来；另外，通过与小鼠骨长、骨干重、骨径等骨计量学指标相结合，能够从中明确小鼠骨质疏松的具体程度[11]。针对葡萄糖酸钙来讲，其不仅有着良好的补钙效果，而且还是对骨质疏松进行预防的不错药物，本文将葡萄糖酸钙当作对照，目的在于分析鹿角盘水提物、鹿角盘组合物以及醇提物对骨质疏松所产生的影响，并且分析其与葡萄糖酸钙之间的联系，从中找出供试药物对抗骨质疏松作用的具体途径。

对于骨质疏松而言，其作为一种以骨组织微观结构出现进行性改变以及骨量异常减少为典型特征的骨病类型，患病后，骨脆性会大幅增加，容易引发以骨折为典型特征的全身性骨代谢疾病[12]。针对环磷酰胺来讲，其乃是当前临床中一种比较常用的抗肿瘤药物，有研究[13]指出，其容易造成患者骨的快速丢失。另有报道[3]指出，环磷酰胺会将脂质过氧化进行激活，从而容易产生骨髓损伤毒性，最终会减少骨细胞的数量。经本次试验得知，小鼠环磷酰胺20 mg/（kg·d）持续灌胃14 d，模型小鼠的股骨干重有明显减少。另外，横径、股骨长均有显著减少，羟脯氨酸、骨有机质同时也处于不断减少状态，与骨质疏松的基本特征相符，提示模型构建成功。有学者[14]指出，环磷酰胺能够通过抑制骨细胞，从而达到阻止骨胶原合成的目的，并且还能减少其分泌量，从而减少钙盐沉积，加速钙吸收，减少骨量，从而引发骨质疏松。而针对葡萄糖酸钙来分析，其能够对环磷酰胺所造成的钙丢失进行抑制，但对羟脯氨酸所造成的影响却并不明显，鹿角盘水提物可以增加股骨干重、骨钙的含量；水提取物高剂量组不仅能对小鼠骨干重、骨钙含量进行改善，而且还能促进羟脯氨酸含量的增加。高剂量组股骨干重增加幅度高于模型组；高、低剂量组都可以对小鼠骨钙的流失进行拮抗，其多作用于小鼠股骨干重及骨径。另外，还需要强调的是，由环磷酰胺所造成的小鼠丢失实验当中，鹿角盘70%乙醇提取部位、水提物高剂量可以对环磷酰胺的副作用所造成的骨胶原、骨钙流失进行抑制。因此，单纯的钙制剂难以对骨骼对钙的利用进行改善，而高剂量鹿角盘水提物、乙醇提取物等，则能加速骨细胞对胶原的分泌，促进钙沉积以及骨形成，因而能够对骨质疏松进行有效防止，所以，鹿角盘实为一种抗骨质疏松中药的重要资源。

综上，鹿角盘对环磷酰胺所导致的骨质疏松，有着良好的拮抗作用，应用效能突出。