血清S100A12、sRAGE水平与AMI患者PCI术后冠状动脉无复流的相关性分析

张明磊，高建步，王星，解莉莉

急性心肌梗死（acute myocardial infarction，AMI）治疗的关键是尽快恢复心肌灌注，目前恢复灌注最有效的治疗手段是经皮冠状动脉介入治疗（PCI），其能够尽早开放梗死部位血管，防止心肌进一步坏死，从而改善患者生活质量；在某些情况下，心肌再灌注未能使心肌恢复到最佳水平，即无复流现象[1,2]。无复流现象的发生机理复杂，研究表明，炎症反应、远端血栓碎片造成的微栓塞、缺血再灌注损伤造成的内皮细胞肿胀、毛细血管内中性粒细胞激活并滞留、血小板聚集及微血管痉挛均可导致无复流现象的发生[3,4]。无复流可增加AMI患者左心功能不全和进行性心肌损害的发生风险[2]，有效预测PCI术后无复流的发生，采用相应的治疗措施可提高治愈率。通过对急性心肌梗死患者血小板基因表达分析发现，S100钙结合蛋白A12（S100A12）表达异常[5]。晚期糖基化终产物（RAGE）作为S100A12的唯一受体，在多种细胞类型中表达，可激活氧化应激和炎症程序，可溶性晚期糖基化终末产物受体（sRAGE）作为RAGE的胞外分泌型，与RAGE竞争结合相同配体，研究发现，单核细胞RAGE表达增强或血浆中sRAGE水平降低会增加AMI患者梗死相关性心源性休克的死亡率[6,7]。目前已有研究表明S100A12和sRAGE参与心血管疾病的发生，但二者是否与AMI患者PCI术后冠状动脉（冠脉）无复流相关还未明确，本研究通过对此探究，以期为预测PCI术后无复流的发生及其机制提供参考。

1 资料与方法

1.1 研究对象选取2017年7月～2020年10月于南阳市中心医院心血管内科收治确诊的258例行PCI的AMI患者，根据术中即刻心肌梗死溶栓（TIMI）血流分级[8]分为复流组176例（TIMI3级），其中男性91例，女性85例，年龄45～77岁，平均年龄（58.13±11.98）岁，Killip分级≥Ⅱ级84例，血栓高负荷71例，病变部位：左前降支50例、左回旋支68例、右冠脉58例。无复流组82例（TIMI≤2级，即0级、1级、2级），其中男性45例，女性37例，年龄46～79岁，平均年龄（59.01±12.68）岁，Killip分级≥Ⅱ级51例，血栓高负荷59例，病变部位：左前降支20例、左回旋支变32例、右冠脉30例。纳入标准：①符合美国心脏病学会/美国心脏协会AMI诊断标准[9]；②初始发病；③从发病到PCI＜12 h；④临床资料完整。排除标准：①凝血功能障碍或出血性疾病患者；②严重心脏瓣膜病的患者；③肾、脾、肺功能不全或其他免疫系统疾病的患者。本研究经我院伦理委员会批准，所有受试人员及家属均知情并签署同意书。

1.2 冠脉造影及PCI使用6 F动脉鞘管通过桡动脉或右股动脉路径行冠脉造影；患者PCI术前服用300 mg阿司匹林及氯吡格雷，静脉注射70～100 U/kg肝素。

1.3 主要试剂与仪器S100A12、sRAGE ELISA检测试剂盒（货号：SBJ-H1960、SBJ-H1620）南京森贝伽生物科技有限公司；超敏C反应蛋白（hs-CRP）ELISA检测试剂盒（货号：CK-E11183）武汉益普生物科技有限公司；AU5800全自动分析系统（美国贝克曼库尔特有限公司）；SPRT2100C全自动酶标仪（德国IFP公司）。

1.4 方法

1.4.1 样品采集及检测患者于PCI前抽取静脉血4 ml，经3000 rpm离心10 min后取上清置于-20 ℃冰箱待测。

1.4.2 生化指标检测使用全自动生化分析仪检测总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平。

1.4.3 ELISA法检测S100A12、sRAGE及炎症因子水平两组患者血清中hs-CRP、S100A12、sRAGE水平根据ELISA检测试剂盒说明书进行检测。

1.5 统计学分析SPSS 23.0统计学软件分析数据，计量资料用平均数±标准差（）进行描述，两组间比较采用t检验；计数资料以例数（构成比）表示，组间比较采用χ2检验；采用Pearson相关系数法对S100A12和sRAGE的相关性进行分析；使用Logistic回归分析影响AMI患者PCI术后冠脉无复流的因素；ROC工作特征曲线评估S100A12和sRAGE对AMI患者PCI后冠脉无复流的预测价值，P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组一般资料比较复流组和无复流组患者在年龄、体质指数（BMI）、性别、高血压、糖尿病、TC、TG、HDL-C、LDL-C、病变血管数、病变部位和发病至PCI时间相比，差异均无统计学意义（P＞0.05）；与复流组相比，无复流组患者Killip分级≥Ⅱ级、血栓高负荷例数及hs-CRP水平显著增加（P＜0.05），表1。

表1 两组患者一般资料比较

2.2 AMI患者血清中S100A12、sRAGE水平比较与复流组相比，无复流组患者血清中S100A12水平显著增加，而sRAGE水平显著降低（P＜0.05），表2。

表2 AMI患者血清中S100A12、sRAGE水平比较

2.3 无复流组患者血清中S100A12、sRAGE水平的相关性Pearson相关系数法结果表明无复流组患者血清中S100A12和sRAGE水平呈显著负相关（r=-0.476，P=0.000），（图1）。

图1 无复流组患者血清中S100A12、sRAGE水平的相关性

2.4 多因素Logistic回归分析影响AMI患者PCI术后冠脉无复流的因素以是否发生无复流为因变量（未发生=0，发生=1），S100A12、sRAGE水平、血栓高负荷、hs-CRP水平为自变量（根据平均数赋值），表3，进行多因素Logistic回归分析发现S100A12≥273.75 μg/L、sRAGE＜35.94 ng/L、发生血栓高负荷和hs-CRP水平≥51.76 mg/L均是导致无复流发生的独立危险因素（P＜0.05），表4。

表3 变量赋值

表4 Logistic回归分析影响AMI患者PCI术后冠脉无复流的因素

2.5 S100A12和sRAGE对AMI患者PCI术后冠脉无复流的预测价值由图2所示，S100A12预测无复流发生的ROC曲线下面积为0.858（95%CI：0.810～0.906），截断值243.426 μg/L，灵敏度87.80%（95%CI：78.70～94.00），特异性71.59%（95%CI：64.30～78.10）；sRAGE预测无复流发生的ROC曲线下面积为0.909（95%CI：0.874～0.944），截断值47.926 ng/L，灵敏度90.24%（95%CI：81.70～95.70），特异性76.70%（95%CI：69.80～82.70）；二者联合预测无复流发生的ROC曲线下面积为0.939（95%CI：0.909～0.969），灵敏度90.24%（95%CI：81.70～95.70），特异性85.23%（95%CI：79.10～90.10）。

图2 S100A12和sRAGE对AMI患者PCI术后冠脉无复流的预测价值

3 讨论

AMI是一种由于动脉粥样硬化斑块破裂和血栓形成而引起的冠脉闭塞事件[10,11]。PCI是目前最有效的恢复心肌梗死部位血流的方法。血液再灌注可能造成微栓塞和炎症相关因子的释放，损害内皮完整性，从而增加血小板活化、白细胞粘附及红细胞停滞，致使血管扩张转变为收缩，损害冠脉循环，最终导致无复流的发生[12]。无复流作为心肌梗死再灌注的严重并发症与梗死面积增加及患者预后不良有关[12-15]。因此，有效评估PCI术后无复流的发生对于患者的康复及预后至关重要。

炎症与心血管疾病的发生发展密切相关已被多项研究所证实，S100钙结合蛋白A12（S100A12）作为一种炎症介质，是S100钙结合蛋白家族成员之一，其主要由中性粒细胞产生，可在受到炎症刺激后改变蛋白构像，与其靶蛋白结合，从而参与炎症反应[7,16,17]。S100A12的表达与血管内皮黏附因子有关，在动脉粥样硬化患者血管中可通过激活炎症细胞加剧血管壁的炎症反应[17]。研究表明，其在冠心病及ST段抬高型心肌梗死患者血浆中表达异常增加[16,18]。hs-CRP作为一种临床中常用的炎性标志物，其可通过与脂蛋白结合形成不稳定斑块来致使斑块破裂出血，形成血栓[19]。本研究发现与复流患者相比，无复流组患者血清中hs-CRP及S100A12水平显著增加，与之前的研究结果相似，该结果表明，S100A12可能参与PCI术后无复流的发生，原因可能与其加剧患者血管内炎症损伤有关。

晚期糖基化终产物（RAGE）作为S100A12的唯一受体，其可溶性形式sRAGE可通过竞争性的结合RAGE配体，抑制下游信号通路的激活[20,21]。研究发现，晚期糖基化终末产物（AGEs）与RAGE结合后可促进巨噬细胞等炎症细胞的活化与迁移，造成炎症反应的发生，从而导致动脉粥样硬化的形成，而sRAGE与RAGE竞争性的与AGEs结合，抑制AGEs的激活，减少炎症损伤的发生[17,22]。另有研究发现，在2型糖尿病患者血清中sRAGE水平降低，S100A12水平增加，二者与心血管事件发生风险增加有关，表明sRAGE对心血管疾病具有潜在的保护作用[20]。sRAGE增加能够通过清除S100A12来防止急性冠脉综合征的发生[20]。本研究发现，与PCI术后复流患者，无复流患者血清中sRAGE水平显著降低，此外，无复流组患者血清中S100A12和sRAGE水平呈显著负相关，该结果表明sRAGE低水平与PCI术后无复流的发生有关，可能是由于sRAGE水平降低，其对S100A12的清除能力下降，致使S100A12水平增加，加剧炎症反应，因此其有望作为预测PCI术后无复流发生的指标。

多因素Logistic回归分析发现S100A12高水平和sRAGE低水平均是导致无复流发生的独立危险因素；二者联合预测无复流发生的ROC曲线下面积及特异性均高于二者单独预测。该结果表明，二者联合对PCI术后无复流发生的评估价值较高，有望作为预测无复流发生的评估指标。

综上所述，S100A12水平增加和sRAGE水平降低与AMI患者PCI术后冠脉无复流的发生密切相关，二者联合对预测PCI术后无复流发生具有较高的评估价值。本研究不仅为预测AMI患者PCI术后无复流发生评估指标的寻找提供参考，还初步探索了无复流的发生机制，在未来的研究中，还需对二者在PCI术后无复流中的详细作用机制进行深入研究。