稻谷中脂肪酸值的测定及关键点控制的探索

◎ 陈垂凤

（海口市粮油产品质量监测站，海南 海口 570145）

脂肪酸值是反映稻谷品质优劣的主要指标，是判定稻谷储存品质优劣的主要依据之一。因此，准确测定稻谷中脂肪酸值的重要性不言而喻。稻谷中脂肪酸值的测定方法虽是一项简单的酸碱滴定法，然而，要取得理想的检测结果并非易事，因为影响脂肪酸检测结果的因素很多，特别是滴定终点的颜色变化不明显、不容易判定，从而容易产生较大的误差[1]。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

1%天平、砻谷机、锤式旋风磨、振荡器；95%乙醇、无水乙醇、1%酚酞-乙醇溶液；具塞三角瓶、三角瓶、量筒、50 mL比色管、25 mL移液管、50 mL移液管、中速定性滤纸、微量滴量管、容量瓶等。

1.2 0.5 mol/L 氢氧化钾标准储备液的配制

称取32 g优级纯氢氧化钾放在200 mL的烧杯中，用无二氧化碳的蒸馏水少量多次溶解氢氧化钾到1000 mL的容量瓶中，并定容至刻度，放置到第2天标定。

1.3 0.5 mol/L 氢氧化钾标准储备液的标定

用8个30×60 mm的称量瓶，每瓶约装4 g邻苯二甲酸氢钾放在105 ℃的烘箱中烘到恒重，按GB/T 601—2016《化学试剂 标准滴定溶液的制备》规定，称取8份邻苯二甲酸氢钾3.6 g（精确到0.00001 g）放在250 mL的锥形瓶中，各加80 mL无二氧化碳的蒸馏水振摇到溶解，加2滴1%的酚酞-乙醇溶液，用配制好的氢氧化钾溶液滴定到微红色，30 s不褪为终点。记录消耗KOH溶液的体积，同时做空白试验，计算氢氧化钾标准储备液的浓度。

1.4 临用时稀释成0.01 mol/L的氢氧化钾标准滴定溶液

准确移取10 mL已经标定好的氢氧化钾标准储备液至500 mL容量瓶中，用中性95%乙醇稀释定容至刻度。

1.5 扦样

扦样前先了解粮堆的情况，制定扦样方案，科学扦取具有代表性的样品。

1.6 试样制备

分样、去杂（包括石头、沙子、凝土；稻梗、2.0筛的筛下物等无使用价值的无机、有机杂质和异种粮粒等），但不去除谷外糙米，取适量混合均匀样品脱壳，取混合均匀的糙米约80 g,经锤式旋风磨粉碎,装入磨口瓶中备用。

1.7 试样处理

称取制备好的试样约10 g,于250 mL具塞磨口锥形瓶中，并用移液管加入50 mL无水乙醇，振摇10 min，静置1～2 min，用定性滤纸过滤。弃去最初几滴滤液，收集滤液约30 mL。

1.8 测定

用移液管移取 25 mL滤液于150 mL锥形瓶中，加50 mL一级水，滴加4滴1%酚酞-乙醇指示剂,用已标定好的氢氧化钾标准滴定溶液滴定至变色，再继续滴加5～8滴氢氧化钾标准滴定溶液到颜色呈现淡粉色，取下加50 mL一级水显粉红色即为滴定终点。记下耗用的氢氧化钾标准滴定溶液体积（V1），同时做空白试验，计算结果。

2 影响稻谷中脂肪酸值检测结果的关键点控制

本文是通过对十年粮油检验工作的总结，综合分析影响稻谷脂肪酸测定的各种因素，最终达到提高稻谷脂肪酸值测定准确度的目的。下文将细述影响稻谷中脂肪酸值检测结果的关键点控制[2]。

2.1 样品

样品是一批粮油的代表和判定这批粮油质量的依据，是否具有代表性，是影响检测结果的关键因素。

2.2 扦样

由于大量储存的稻谷来自多个农户，各个农户的稻谷品质都不相同，所以扦样前必须先了解粮堆的情况，科学制定扦样方案，确保扦样具有代表性。

2.3 温度

在进行稻谷脂肪酸值测定试验时，温度是一个非常敏感的因素。试验表明，随着环境温度的升高，脂肪酸值也随之升高。原因可能是随着环境温度的升高，脂肪酸在乙醇中的溶解度增大，脂肪酸的提取率增大，从而使脂肪酸值增大；滴定过程环境的温度最好控制在20 ℃，因为体积的读数在20 ℃时是不需要校正的，因此20 ℃是最理想的环境温度。无水乙醇、一级水和磨粉后的样品，都需要放在此环境下冷却再使用[3]。

2.4 滴定

2.4.1 氢氧化钾标准储备液的优化

由于储备液存放的时间比较长，且乙醇又容易挥发，因此，用一级水配储备液稳定性好；氢氧化钾标准储备液最好配0.5 mol/L的，因为0.5 mol/L的氢氧化钾溶液2人共做8平行标定时颜色变化明显，重现性很好，经多次配制和标定，2人共做8平行的极差的平均值都小于0.18%，临用时用调到中性的95%的乙醇稀释到0.01 mol/L。

2.4.2 滴定时用一级水代替无二氧化碳的蒸馏水

随机取8份稻谷样品，分别以现制无二氧化碳蒸馏水和一级水测定相同样品的脂肪酸值，结果见表1。

表1 稻谷在不同测定用水条件下的脂肪酸值表(mg/100 g)

经多次试验，滴定时用一级水和用无二氧化碳的蒸馏水结果接近，差值在0.03～0.26之间，而脂肪酸值平行试验的允许差为2。因此，可以用一级水代替无二氧化碳的蒸馏水进行滴定；机制的一级水刚接出来时温度有点高，须降到20 ℃再使用。

2.4.3 滴定速度

滴定速度是影响检测结果的关键因素，滴定速度过快会造成反应不充分，终点会提前出现，检测结果偏低；反之，滴定速度过慢会造成空气中更多的二氧化碳与氢氧化钾反应，致使消耗的氢氧化钾量增多，从而使检测结果偏大。因此，滴定前期最佳速度一般保持在6～8 mL/min，接近终点时应减慢滴定速度,逐滴加入。

2.4.4 滴定台面光线

由于稻谷中脂肪酸值滴定终点颜色变化不明显，滴定时光线不足会影响终点颜色判定，滴定应在散射日光或日光性日光灯下对着光源方向进行[4]。

2.4.5 滴定终点判定

脂肪酸的终点判定对测定结果的影响很大，GB/T 20569—2006附录A规定，滴至微红色30 s不褪视为滴定终点，因操作人员对颜色的敏感程度不一致，从而造成较大的误差[5]。方法1：滴定过程中看到颜色变化时再加5～8滴氢氧化钾标准滴定溶液，直至颜色变粉，就可作为滴定终点，之后，可以向滴定液中加入50 mL一级水验证，若看到粉红色为滴定终点判断正确。在此过程中，至少要做2个平行，同一分析者需要对同一试样同时进行2次测定，脂肪酸值结果的差值应不超过2 mg/100g。因为不同的稻谷品质不同，有少数稻谷在滴定过程中不变色，若向滴定液中加入50 mL一级水时显红色，这种情况应多称样再测，下一个样品滴定时适当减少滴定液体积，直到向滴定液中加入50 mL一级水时显粉红色为适，且两平行试验结果之差不能超过2 mg/100g；也有少数稻谷在滴定过程中颜色已明显变深，但向滴定液中加入50 mL一级水时不变红，这种情况应多称样再测，下一个样品滴定时适当增加滴定液体积，直到向滴定液中加入50 mL一级水时显粉红色为适，且两平行试验结果之差不能超过2 mg/100g。方法2：滴定过程中看到液面瞬间有红色铺满时，一般就为滴定终点，接着可以向滴定液中加入50 mL一级水验证，若看到粉红色为滴定终点判断正确。2019年11月17—22日，在湖南国家粮食质量监测中心参加国家粮食质量监测机构检验技术培训结束后，我们将国家粮食和物资储备局标准质量管理办公室发放的盲样带回单位检测，采用以上2种方法判定滴定终点，考核结果为满意。

3 讨论

影响稻谷脂肪酸值的因素还有玻璃器皿是否干净、读数是否准确、仪器设备是否符合标准要求（是否经过检定或校准）、操作是否规范等。此外，操作人员要多练习，特别是对于滴定终点的判定，因为颜色变化不明显，只能靠自己多练、多摸索，才能找到感觉。因此，为了减少测定误差，操作人员必须严格采用规范的扦样方法、检测步骤、操作和测定条件等进行检验，力争做到检测结果真实准确。

勤俭节约，珍爱生命。