影响动物免疫抗体检测结果的因素分析

苑彬

（河北省廊坊市安次区农业农村局 河北廊坊 065000）

免疫接种作为防控动物疫病的主要手段，在实际养殖过程中起着至关重要的作用。动物免疫抗体检测是检验动物免疫接种效果，了解动物体内抗体水平，掌握抗体消长规律的实验室检测技术。在动物疫病防控和流行病调查等工作中发挥着重大作用。然而，实际生产和检测过程中涉及动物免疫抗体检测的环节众多，除了临床疫苗接种工作外，实验室检测的各个环节也是影响动物免疫抗体检测结果的重要方面。为有效提高动物免疫抗体检测结果的准确性，本文对影响动物免疫抗体检测结果的因素进行了具体分析总结，并探寻了有效的应对之策，以期能为动物免疫抗体检测工作提供参考。

1 生理因素影响

疫苗免疫效果的好坏与动物的身体状况、饲养水平、母源抗体水平、健康状况以及遗传因素等均有着密切的相关性。研究表明，动物机体的免疫应答在一定程度上受遗传因素的影响，不同品种、不同种群或者同一群体的不同个体对同一抗原的免疫刺激所产生的抗体强弱各不相同[1]。此外，母源抗体水平的干扰以及部分免疫抑制类疾病的产生都会对动物机体的免疫系统产生损伤，导致动物机体免疫应答能力下降，抗体水平不达标。另外，日常的饲养管理水平的高低不仅会直接影响动物的营养状况和健康状况，同时也会对动物机体的免疫力产生影响。动物在饲养条件良好的条件下，体况良好，生长迅速，抗病力较强；反之，饲养条件不达标的情况下，动物圈舍及环境中病原微生物含量巨大，动物机体极易受到野毒侵袭，进而干扰免疫抗体的产生，影响免疫检测结果。部分资料表明，疫苗免疫前使用磺胺类、氯霉素类免疫抑制药物也会影响动物机体免疫应答的产生，导致免疫抗体检测结果不准确[2]。因此，为防止此类现象的产生，在免疫接种前一周内禁止饲喂除多维等抗应激类药物之外的其他化学药物。

2 免疫因素影响

2.1 疫苗的选择和存储

疫苗是影响动物免疫结果的首要因素，随着世界生物技术领域的不断发展，目前在动物养殖生产过程中广泛应用的疫苗种类越来越多。但是，不同类型疫苗的使用、运输和存储方法各不相同，比如：灭活苗的储存条件是2～8 ℃，需要冷藏处理；减毒疫苗的最佳储存条件是-15～-25 ℃之间，需要冷冻处理[3]。因此，要保证疫苗的性状和效果，就必须要按照相应的要求进行储存和运输，特别是夏季疫苗转运过程中必须注意降温措施，可以使用冷藏车或者加入冰袋进行降温。此外，注意疫苗的甄别，市场上针对同一动物疫病的疫苗种类众多，广大养殖户在进行疫苗选择的过程中需结合本地流行毒株进行有效甄别，选择最适合本场的疫苗种类，切勿贪图便宜。

2.2 免疫操作

正确的免疫操作步骤和方法是影响免疫效果的关键，为保证良好的免疫效果，首先要制定规范的操作流程，严格进行免疫接种人员培训，保证接种环节流畅，接种部位合理，接种剂量充足，不漏免，不打飞针。其次，要加强疫苗配制环节的管理，对于干粉剂疫苗使用之前需先使用疫苗稀释液进行配置，配置比例务必严格按照使用说明进行，保证计算准确，稀释浓度合理。最后，为防止疫苗注射过程中造成传染病的接触传播，通常会在接种前使用碘酊对注射部位进行消毒，但在碘酊未干的情况下直接注射疫苗，碘酊则会跟随针头一同进入动物体内，进而干扰疫苗的免疫效果，进而导致免疫抗体检测结果不准确[4]。

2.3 免疫程序

免疫程序对动物疫苗免疫的时间、方式、次数及疫苗种类等进行了详细的计划，合理的免疫程序是免疫成功的前提条件。实际生产过程中，免疫时间不合理，免疫次数不达标，免疫方式不正确等，均会使疫苗的免疫效果大打折扣。因此，广大养殖户在制定免疫程序时务必要对当地的疫病流行情况进行详细的调查，再结合本养殖场的实际情况及抗体消长规律，进行合理的免疫规划，同时按照实际情况进行细微调整，保证免疫程序的合理性和科学性[5]。

3 样品采集因素

血液、尿囊液、组织液、胸腹腔积液、唾液、鼻腔分泌等送检样品，在采样送检的过程中，一旦操作不当或者运输、保存条件不合格，均会造成样本污染或者失效，进而导致免疫抗体检测结果出现偏差。尤其是血液样品在送检样品中出现频次最高，一旦处理不当极易发生污染、溶血、腐败等现象。因而，在采集血液样本时务必注意不可剧烈震荡，避免阳光直射，运输过程中加冰袋，切记反复冻融，样本到达实验室后尽早检测，避免长时间保存。此外，样品采集时间与疫苗接种时间有一定的相关性，过早或过晚采集样本都会对抗体检测结果产生一定影响[6]。通常减毒疫苗的抗体产生时间早，而灭活疫苗产生抗体的时间较晚。在实际生产过程中送检样品的采集要根据疾病的发展规律和抗体消长规律制定合理的采集时间，从而保证抗体检测结果的准确性。

4 实验室检测因素影响

4.1 检测人员

实验室检测人员的操作水平和专业技术素养是保证免疫抗体检测结果准确与否的关键所在。实验室内无论是样品登记，组织破碎，样品提取还是技术检测及其他各个环节都是由检测人员具体操作完成的。部分检测人员专业知识不扎实，对试验仪器和设备使用不熟练，责任性差，容易出现重复加样、漏检、加样剂量不准确，重复使用一次性试验耗材，样品污染、检测结果判断不准确等情况，这些都会对动物免疫抗体检测结果造成影响。要保证检测结果的准确性，首先要保证人员的专业性和操作的熟练程度，上岗前对检测技术人员进行专业的技能和操作培训，使其熟练掌握相关的检测方法和原理的同时，还要加强责任感和使命感的培养，树立其高度的敬业精神和负责任的态度，从而保证其在工作中能过恪尽职守，认真负责，避免因人为操作失误出现的试验结果偏差。

4.2 检测器械及耗材

实验室检测器械的灵敏度和准确性，直接关系到免疫抗体检测结果的真实性和可靠性。在实验室进行免疫抗体检测的过程中，使用的检测器械种类众多：冰箱、恒温培养箱，酶标仪、分光光度计、核酸提取仪等抗体检测常用仪器，在使用过程中要注意加强对仪器的维护和保养，定期对实验仪器进行检测和校准。同时，严格按照实验室规定对仪器进行清洗、消毒和保管保证实验仪器的精准度。

对于实验过程中一定会用到的移液枪、移液管、容量瓶、吸头、96 孔微型版、离心管等实验器具和耗材，要做到专区专用，一次性耗材不得重复利用。实验结束后对操作台面或者是器具等进行擦拭和消毒，避免污染情况的产生，保证实验结果的准确性。

4.3 检测试剂

目前，实验室常用的免疫抗体检测方法主要包括血清学检测和分子生物学检测技术。这两种检测技术多采用成品试剂盒进行，市场上可供选择的商品化试剂盒种类繁多，虽然都已经经过农业农村部审核通过，但是不同厂家和不同批次的试剂盒产品质量仍然存在一定的差异性。在实际检测过程中，检测人员要正视不同厂家试剂之间的差异性，严格按照试剂说明书进行使用和操作，坚决不使用破损、污染、过期的试剂。

此外，为保证免疫抗体检测结果的准确性，防止假阳性现象的产生，在试剂配制过程中要严格遵守无菌操作规则，保证加样枪、蒸馏水、容器等的清洁，避免试剂被污染。同时，为避免因加样次数频繁造成的污染可能性，可以提前对试剂进行预混合分装，将所有的试剂小量分装，减少加样次数，并与其他物品分开保存，放置于不同的冰箱内，保证试剂的准确性。

5 结语

综上所述，影响动物免疫抗体检测结果的因素主要有生理因素、免疫因素、样品因素和实验室检测因素等几大方面。要避免上述因素对试验结果的影响，不仅要把控疫苗质量，建立科学合理的免疫程序和免疫操作流程，还要加强采样时间和采样过程的管理，保证样品的质量。同时，加强实验室检测人员的管理和培训，定期对试验设备进行养护和校准，选择优良的试验试剂，严格按照试剂说明书进行操作，确保动物免疫抗体检测结果的准确性，从而更好地指导生产。■