STAT4基因多态性与类风湿关节炎病情活动的关系

庞红梅,崔刘福,陈 红,贾育红,杨文浩

(1唐山市工人医院分院,河北唐山 063000；2华北煤炭医学院附属开滦医院；3唐山市工人医院)

类风湿关节炎(RA)是以慢性进行性关节病变为主的全身性自身免疫性疾病,在世界范围内成年人 RA患病率约 1%,我国为 0.26%～0.50%。目前,对 RA的病因不十分清楚,其可能相关因素包括遗传、细菌与病毒感染、免疫、环境及激素等[1]。一项对北美白色人种的研究证明[2],定位于染色体 2q的 STAT4单倍型与 RA和系统性红斑狼疮相关,且其结果在韩国、日本及欧洲 3国 RA人群中得到证实。这些证据表明,STAT4基因多态性在不同种族人群 RA发病中均有明显作用。为探讨 RA病情活动度及疾病严重度与 STAT4rs7574865基因多态性的关系,我们进行了相关研究。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择 2008年 4月 ～2009年 10月在华北煤炭医学院附属开滦医院确诊 RA患者 139例 ,男 39例 、女 100例,年龄 21 ～82岁 ,平均 51.96岁,病程 6个月 ～20 a、平均 6.12 a,均为唐山地区汉族人群,符合 1987年美国风湿病协会制定的 RA诊断标准[3]。排除其他结缔组织病、感染性疾病或恶性肿瘤等患者。

1.2 方法

1.2.1 STAT4rs7574865基因多态性检测 以酚—氯仿法提取患者外周血基因组 DNA,用 PCR扩增目的基因片段在 LDR仪下行 PCR产物连接酶检测,对LDR产物进行测序分析,用 Genemapper软件对单核苷酸多态性位点基因型行数据分析和基因分型。

1.2.2 实验室检查 采集患者空腹静脉血,用魏氏法检测血沉(ESR),男 ＞15 mm/h、女 ＞20 mm/h为阳性。

1.2.3 DAS28评分 参照文献[4]方法计算 DAS28评分。28个关节包括双手近指关节、双手掌指关节、双腕关节、双肘关节、双肩关节、双膝关节。DAS28评分 ＜2.6分示疾病缓解；2.6～3.2分示活动度低度；3.3～5.1分示活动度中度；＞5.1分示活动度高度。

1.2.4 双手/双腕关节 X线分期 依据美国风湿病协会标准分期:Ⅰ期:关节正常或关节面下骨质疏松。Ⅱ期:关节面下骨质疏松,关节周围软组织肿胀,关节间隙正常或轻微关节面骨质侵蚀或破坏；无关节畸形。Ⅲ期:明显的关节面下骨质侵蚀和破坏,关节间隙狭窄或消失；无纤维性或骨性强直、关节半脱位畸形。Ⅳ期:除Ⅱ、Ⅲ期表现外,合并关节纤维性或骨性强直。

1.3 统计学方法 采用 SPSS13.0统计软件,计量资料用±s表示,组间比较用t检验,计数资料用百分率表示。P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 STAT4rs7574865基因多态性 本组 STAT4rs-7574865基因型分布频率为 40.3%,T/G、TT基因型频率分别为 46.0%、13.7%,T等位基因频率为36.7%。

2.2 ESR与是否携带 T等位基因的关系 本组ESR正常36例,携带与不携带 T等位基因者分别为19、17例；ESR升高 103例,分别为 64、39例；是否携带T等位基因与ESR水平无相关性(P=0.324)。

2.3 DAS28评分与是否携带 T等位基因的关系本组 DAS28评分 2.3～8.0分,疾病缓解、活动度低度、活动度中度、活动度重度者分别为 2、2、33、102例。患者是否携带 T等位基因与 DAS28评分无相关性(P=0.759)。

2.4 双手/双腕关节 X线分期与是否携带 T等位基因的关系 本组双手/双腕关节 X线分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期者分别为 37、37、27、38例。患者是否携带T等位基因与 X线分期无相关性(P=0.366)。

2.5 STAT4rs7574865基因多态性与 RA患者性别、年龄、病程的关系 见表1。

表1 STAT 4rs7574865基因多态性与RA患者性别、年龄、病程的关系

3 讨论

RA的基本病理特征是滑膜血管增生、炎性细胞浸润、血管翼形成,导致滑膜、软骨乃至软骨下骨组织破坏。RA可累及心、肺、肾、动脉、神经及眼等脏器组织,其病变呈持续性、反复发作过程,致残率明显,可缩短患者的预期寿命。目前认为,RA可能是携带 RA易感基因者被某种病原体感染后引起的机体免疫系统功能紊乱。

STAT4编码一种存在于多种重要细胞因子通路上的转录蛋白,在 IL-12介导的 T细胞向 Th1细胞分化中发挥主要作用,并参与 Th17分泌 IL-17。因此,STAT4在调节 Th1、Th17细胞应答中发挥重要作用。因两个谱系在 RA发病中均起主要作用,故有学者[5]推测 STAT4可能通过不完全信号传导在RA中发挥作用。国外研究证实,STAT4基因多态性在亚洲及欧洲人群中均与 RA发病相关。本研究也证明,STAT4rs7574865T等位基因与 RA发病相关,与国外研究一致。

RA发生于任何年龄,以育龄女性多发,更年期发病率明显高于同龄男性及老年女性。本研究发现,STAT4rs7574865位点各基因型与 RA患者的性别、年龄及病程无相关性,与国外研究一致。ESR是操作简便、重复性好的急性时相反应指标,RA加重时 ESR增快,缓解时恢复正常。本研究显示 RA患者是否携带 T等位基因与 ESR无相关性。

DAS28评分是评价 RA疾病活动程度的指标,已广泛用于临床对 RA疾病活动及药物疗效的评价。因临床较易获得 DAS28评分要求的各项信息,故许多研究认为,DAS28评分是一种可靠、客观评价 RA疾病活动的指标。研究表明,较低的 DAS28评分是 RA患者长期疾病缓解的重要预示因子。RA的病理学改变是 X线特征性表现的基础,其骨关节病变可侵犯四肢关节,以手和足的小关节,腕、肘、膝、踝关节多见,且病变呈对称性分布。本研究发现,是否携带 T等位基因与 RA患者双手/双腕 X线分期及 DAS28评分均无相关性。

虽然本研究未发现 STAT4基因多态性与RA活动有关,但发现携带危险基因者 ESR升高的比例高于正常(作用不显著)。因此,对 STAT4基因多态性与 RA临床及预后的相关性,以及基因单倍型检验与细胞因子间的相关性,有待于进一步研究。

[1]Firestein GS.Evolving conceptsof rheumatoid arthritis[J].Nature,2003,423(6937):356-361.

[2]Remmers EF,Plenge RM,Lee AT,et al.STAT4 and risk of rheumatoid arthritis and systemic lupus erythe-matosus[J].N Engl J Med,2007,357(10):977-986.

[3]Arnett FC,Edworthy SM,Bloch DA,et al.The american rheumatism association 1987revised criteria for the classification of rheumatoid arthritis[J].Arthritis Rheum,1988,31(3):315-324.

[4]Prevoo ML,vant Hof MA,Kuper HH,et al.Modified disease activity scores that include twenty-eight-joint counts,development and vali-dation in a prospective longitudinal study of patients with rheumatoid arthritis[J].Arthritis Rheum,1995,38(1):315-324.

[5]Walker JG,Smith MD.The Jak-STAT pathway in rheumatoid arthritis[J].Rheumatol,2005,32(9):1650-1653.