高效液相色谱法测定蒙药暖宫七味散中丁香酚含量

吴军侠，赵红侠

（1.陕西天远药业有限公司，陕西 西安 710072； 2.陕西诚信制药有限公司，陕西 渭南 715200）

暖宫七味散收载于1998年版《卫生部药品标准·蒙药分册》，由白豆蔻、天门冬、手掌参、沉香、肉豆蔻、黄精、丁香7味药材组方，具有调经养血、暖宫止带功效，用于治疗心、肾脏“赫依”病所致气滞腰痛、小腹冷痛、月经不调、白带过多。原质量标准中未收载含量测定项，不能有效控制制剂的质量。为此，笔者采用高效液相色谱（HPLC）法测定该制剂中丁香酚含量，报道如下。

1 仪器与试药

L2000型高效液相色谱仪，包括紫外可见光检测器和N2000色谱工作站；UV－1200紫外－可见分光光度计；Sartrius BP211D型电子天平；SB3200－T型超声清洗器。丁香酚对照品（中国药品生物制品检定所，批号为110725－200610）；暖宫七味散（自制）；甲醇为色谱纯；超纯水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：Shim －pack C18柱(250 mm ×4.6 mm，5!m)；流动相：甲醇 － 水(58 ∶42)；流速：1.0 mL/min；检测波长：280 nm；柱温：25℃；进样量：10!L。

2.2 溶液制备

精密称取丁香酚对照品，加甲醇制成0.2 g/L的溶液，作为对照品溶液。取样品粉末适量，研细，称取1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50 mL，密塞，称定质量，放置过夜，超声处理60 min，放冷，再称定质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，静置，取上清液，微孔滤膜滤过，取续滤液，即得供试品溶液。按处方比例取除丁香外的其他药材，按制剂处方制备阴性样品，按供试品溶液制备方法制备阴性对照品溶液。

2.3 方法学考察

干扰试验：分别精密吸取2.2项下3种溶液各10!L，注入色谱仪，记录色谱图。结果在阴性对照品溶液色谱中未检出丁香酚色谱峰，表明处方中其他成分对丁香酚的测定无干扰（见图1）。

图1 高效液相色谱图

线性关系考察：精密称取丁香酚对照品，加甲醇制成贮备液，分别精密移取该贮备液适量，加甲醇制成系列对照品溶液。分别精密进样10!L测定，以峰面积（Y）对进样量(X）进行线性回归，得回归方程 Y=1 066 505 X－24 154，r=0.999 3。结果表明丁香酚进样量线性范围是 0.406 4 ～8.128!g。

精密度试验：取同一对照品溶液，按拟订的色谱条件重复进样5次，依法测定。结果丁香酚峰面积的 RSD=0.77%（n=5），表明仪器精密度良好。

稳定性试验：取同一供试品溶液，分别于0,2,4,8,12 h时进样测定。结果丁香酚峰面积的 RSD=1.32%（n=5）,表明供试品溶液在12 h内稳定。

重现性试验：准确称取同一批号的样品6份，依法制备供试品溶液并测定。结果丁香酚平均含量为28.67 mg/袋，RSD=0.89%（n=6），表明方法重现性良好。

加样回收试验：精密称取已精确测定含量样品6份，分别精密加入丁香酚对照品适量，按供试品溶液制备方法制备溶液并依法进样测定含量，计算回收率。结果见表1。

表1 丁香酚加样回收试验结果(n=6)

2.4 样品含量测定

依法对3批样品的丁香酚含量进行了测定。结果批号为20070729，20070731，20070802的每袋样品中丁香酚含量分别为29.10，29.87，28.29 mg(n=2)。

3 讨论

取丁香酚的甲醇溶液，于200～400 nm波长范围内扫描，结果在280 nm波长处有最大吸收，故选择280 nm作为检测波长。

丁香为桃金娘科植物丁香 Eugenia caryophyllata Thunb.的干燥花蕾，有效成分为挥发油（含量为15% ～20%），其中主要成分为丁香酚，含量为80% ～95%[1]。现代药理学研究表明，丁香具温中降逆、补肾助阳功效，用于治疗脾胃虚寒、呢逆呕吐、食少吐泻、心腹冷痛、肾虚阳痿等症；丁香酚具有抑制血小板聚集、抗氧化和抗衰老、清除活性氧自由基、抗菌、抗炎等多种药理作用，与本制剂的功能主治有密切的关系。采用HPLC法测定暖宫七味散中丁香酚含量，为控制该制剂的质量提供了依据。

[1]康廷国.中药鉴定学[M].北京：中国中医药出版社，2003：304.