不同基因型幽门螺杆菌与冠心病的相关性研究

曹平良，刘小强，唐琼珍，刘 勇，王小琼

江西省人民医院干部保健门诊，江西南昌 330006

冠心病是严重危害人类的健康的疾病之一。传统的观点认为性别、吸烟、年龄、血压、肥胖、血脂、糖尿病是其发病的主要因素。越来越多的实验亦表明冠心病与一些非传统因素密切相关，例如高同型半胱氨酸（HCY）血症、幽门螺杆菌（Hp）感染等。关于不同基因型Hp感染与血浆HCY的水平以及与冠心病的传统因素之间的相互关系在国外研究尚少。本研究旨在探讨不同基因型Hp与冠心病的相关性。

1 对象与方法

1.1 对象

冠心病组：选取2009年11月～2010年11月于我院心血管内科住院的冠心病患者60例，包括稳定型心绞痛36例（男22例，女14例），不稳定型心绞痛17例（男9例，女8例），心肌梗死 7 例（男 5 例，女 2 例），年龄（51.9±5.8）岁，均经冠状动脉造影证实。非冠心病组（对照组）：选取同期收住我院心血管内科的非冠心病患者60例，男33例，女27例，年龄（52.2±6.0）岁，均经冠状动脉造影证实。纳入标准：心肌梗死患者处于稳定期（心肌梗死后≥6个月）、不稳定型心绞痛处于稳定期（经治疗后病情稳定＞1周）、无感染、无肿瘤、无全身免疫性疾病、无甲状腺异常、无严重贫血、无肝肾功能不全、无严重心脏瓣膜病变、无肥厚性心肌病、无心肌再梗死等疾病史。排除标准：糖尿病患者长期血糖未控制在正常范围之内，高血压病Ⅱ级以上，使用免疫抑制药物。

1.2 方法

详细记录所有入选患者的年龄、性别、身高、体重、血压、纤维蛋白原、吸烟史等资料。空腹取血，EDTA抗凝，以3000 r/min离心10 min，分离血浆，置于-70℃保存备测。采用ELISA法测定HCY，试剂盒购自法国GM公司。采用免疫散射比浊法测定CRP，以散射比浊法测定血浆纤维蛋白原。用Olympus Au5400型全自动生化仪测定血脂、血糖。

胃镜下取胃黏膜组织，制备组织切片，采用甲苯胺蓝法检测Hp。对于Hp阳性者，将石蜡切片烤箱中烘烤过夜，二甲苯脱蜡、无水乙醇脱水5 min，2次，空气中干燥；经硫氰酸钠、胃蛋白酶的作用，让样本DNA完全变性，-20℃梯度乙醇中各脱水1 min；滴加cagA基因型探针混合液于组织上孵育24 h，最后再洗脱、封片、遮光保存，在荧光显微镜下观察。幽门螺杆菌cagA基因型DNA探针试剂盒购自南京建成生物工程研究所。

1.3 统计学分析

采用SPSS 17.0统计软件包完成，计量资料数据以均数±标准差（）表示。统计前首先对数据进行Levene方差齐性检验，两组计量资料之间比较采用t检验；计数资料采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 冠心病组与对照组一般情况比较

冠心病组 SBP[（134±8）mm Hg vs（126±9）mm Hg]、DBP[（78±9）vs（73±8）mmHg）]、TC[（4.92±1.13）mmol/L vs（4.54±1.26）mmol/L）]、LDL-C[（3.60±1.18）mmol/L vs（3.45±1.09）mmol/L）]、CRP[（7.68±5.62）mg/L vs（3.57±2.68）mg/L]显著高于对照组，差异均有统计学意义（均 P＜0.05），而在性别、吸烟（35/25、37/23）、年龄、BMI[（22.9±2.9）vs（22.7±3.0）kg/m2]、TG[（1.86±0.58）vs（1.78±0.62）mmol/L]、HDL-C[（1.12±0.34）mmol/L vs （1.13±0.43）mmol/L）]、空腹血糖[（5.32±0.76）mmol/L vs（5.29±0.81）mmol/L）]、Fib[（4.58±0.78）g/L vs （3.82±0.67）g/L]方面与对照组比较，差异均无统计学意义（均 P＞0.05）。

2.2 冠心病组与对照组Hp感染率及cagA基因型Hp的检出率比较

冠心病组的Hp感染率显著高于对照组Hp感染率（55%vs 30%），差异有统计学意义（χ2=7.67，P＜0.01）。 冠心病组中Hp阳性患者的cagA基因检出率高于对照组中Hp阳性患者（60.6%vs 27.8%），差异有统计学意义（χ2=5.01，P＜0.05）。

2.3 Hp感染患者与无Hp感染患者血浆同型半胱氨酸水平比较

Hp 阳性患者血浆 HCY 水平[（17.91±3.08）μmol/L]显著高于 Hp 阴性患者血浆 HCY 水平[（13.13±4.08）μmol/L]，差异有高度统计学意义（P＜0.001）；无论冠心病组还是对照组Hp阳性患者血浆HCY水平均显著高于Hp阴性患者。见表 1。

表1 Hp感染与血浆HCY水平之间的关系

2.4 不同基因型Hp感染患者的HCY水平比较

Hp阳性患者中cagA基因型患者血浆HCY水平[（21.19±4.69）μmol/L] 高于非 cagA 基因型患者血浆HCY水平[（15.80±2.79）μmol/L]，差异有高度统计学意义（P＜0.001）。 冠心病组中cagA 基因型患者血浆 HCY 水平[（22.61±4.98）μmol/L]高于非cagA基因型患者血浆 HCY 水平[（17.10±3.41）μmol/L]，差异有高度统计学意义（P＜0.01）。对照组中cagA基因型患者血浆 HCY 水平[（16.92±3.82）μmol/L]高于非 cagA 基因型患者血浆 HCY 水平[（13.99±1.92）μmol/L]，差异有统计学意义（P＜0.05）。 见表 2。

表2 不同基因型Hp感染与血浆HCY水平之间的关系

2.5 不同基因型Hp与冠心病传统因素的关系

2.5.1 冠心病组中，cagA基因型患者与非cagA基因型患者的血压、性别、吸烟与否、年龄、肥胖、血脂、血糖、纤维蛋白原相比较，差异无统计学意义（均P＞0.05）；cagA基因型患者与非cagA基因型患者的CRP水平比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

2.5.2 对照组中，cagA基因型患者与非cagA基因型患者的血压、性别、吸烟与否、年龄、肥胖、血脂、血糖、纤维蛋白原相比较，差异均无统计学意义（均P＞0.05）；cagA基因型患者与非cagA基因型患者的CRP水平比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表4。

表3 冠心病组中不同基因型幽门螺杆菌与冠心病传统因素之间的关系（）

表3 冠心病组中不同基因型幽门螺杆菌与冠心病传统因素之间的关系（）

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3 讨论

3.1 Hp感染在冠心病发病中的作用

大量研究表明血浆高同型半胱氨酸血症是冠心病的一个新的独立危险因素[1]。目前，许多实验表明Hp的感染与冠心病的发生有密切关系，许多学者通过临床和血清流行病学等方面进行了大量研究，虽然存在一些争议，但绝大多数学者肯定了两者之间的关系。贾爱堂等[2]通过对抗Hp治疗组、对照组随访1年后发现抗Hp治疗组心肌缺血事件发生显著低于对照组（P＜0.01）。这表明Hp的感染可明显提高冠心病的发生率。本研究亦发现：冠心病组与对照组相比，冠心病组的Hp感染率明显高于对照组，这一结果与国外Ponzetto[3]、Patel[4]等报道基本一致。这说明Hp感染是CHD发病的一个重要危险因素。

表4 对照组中不同基因型幽门螺杆菌与冠心病传统因素之间的关系（）

表4 对照组中不同基因型幽门螺杆菌与冠心病传统因素之间的关系（）

传统因素 性别（男/女）吸烟（是/否）BMI（kg/m2）TC（mmol/L）TG（mmol/L）HDL-C（mmol/L）LDL-C（mmol/L）血糖（mmol/L）Fib（g/L）CRP（mg/L）cagA基因型非cagA基因型χ2/t值P值3/26/70.272＞0.0513/79/40.062＞0.05年龄（岁）53.6±5.851.4±6.20.374＞0.05 SBP（mm Hg）126±8125±90.217＞0.05 DBP（mm Hg）72±973±70.252＞0.0521.8±3.220.1±3.40.495＞0.054.56±1.224.51±1.130.083＞0.051.72±0.281.81±0.360.501＞0.051.10±0.431.01±0.320.488＞0.053.46±1.04340±1.100.105＞0.055.26±0.944.92±0.441.069＞0.053.14±0.703.01±0.640.377＞0.053.68±1.022.06±1.002.355＜0.05

3.2 不同基因型HP感染与HCY水平的关系

Franceschi等[5]发现，多克隆cagA抗体与人正常脐静脉组织和动脉硬化组织中的平滑肌细胞、内皮细胞表面抗原发生交叉反应，在动脉硬化形成过程中，内皮细胞功能受损，平滑肌细胞和成纤维细胞大量增殖，导致了动脉粥样硬化的发展。本研究亦发现冠心病组中cagA基因型Hp患者的检出率高于对照组，cagA基因型患者血浆HCY水平显著高于非cagA基因型患者血浆HCY水平。Pasceri等[6]通过对社会背景相似冠心病患者和相同年龄、性别的对照中，携带cagA抗原的、毒力更强的Hp感染发生率进行评估，结果发现，冠心病患者幽门螺杆菌的IgG抗体显著高于对照组。由此可见,在Hp感染中，以cagA基因型Hp感染与冠心病密切相关，这说明cagA基因型Hp感染是冠心病发病的一个重要危险因素。

3.3 不同基因型幽门螺杆菌与CRP的关系

血清CRP含量不但是预测未来心血管危险因素的炎症标志物，也是心血管疾病的直接致病因素[7]。左晶[8]和董立[9]等的研究结果表明Hp感染和CRP水平及冠心病危险事件发生率相关，对冠心病的病变程度有预测价值。本研究表明：不同基因型Hp组，冠心病传统因素之间差异无统计学意义，但是cagA基因型Hp感染患者血浆CRP水平显著高于非cagA基因型Hp感染患者，与吴钰燕等[10]的研究结果一致。总之，cagA基因型Hp感染与CRP水平和冠心病发生、发展相关。

3.4 cagA基因型Hp感染致冠心病发生的机制

cagA基因型Hp感染致冠心病发生的机制尚不明确，可能是通过：①cagA+Hp感染诱导抗原模拟现象；②cagA+Hp感染与自身免疫反应；③cagA+Hp感染与全身性或动脉局部炎症反应[11]。本研究认为可能是cagA基因型Hp感染后通过增高血浆HCY水平、增加血浆中CRP的浓度这一中间环节致动脉粥样硬化的发生、发展

本实验中由于样本容量有限，并未给予Hp感染对照治疗组，但是否冠心病伴Hp感染者一律给予抗Hp感染尚需进一步研究。

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[3]Ponzetto A,Sndrone N,Pellicano JR,et al.Helicobacter pylori infection with arterial obstruction[J].Gastroenterology,1998,114(1):260.

[4]Patel P,Mendall MA,Carrington D,et al.Association of helicobacter pylori and chlamydia pneumonia infections with contain heart disease and car-diovascular risk factors[J].BMJ,1995,311(7007):711-714.

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[9]董立,刘成玉.超敏C反应蛋白和幽门螺杆菌感染与冠心病的关系[J].青岛大学医学院学报,2007,43(2):110-114.

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[11]许先进,金立军.幽门螺杆菌与冠心病的相关研究[J].医学综述,2010,16(2):244-248.