强心颗粒对耐常压缺氧、利尿及抗氧化作用的初步观察

秦文艳， 李春伟， 董 波， 陈 贺， 孟 莉， 赵金明*

(1.辽宁省中医药研究院，辽宁沈阳110031;2.辽宁电力中心医院，辽宁沈阳110015)

慢性心力衰竭 (chronic heart failure，CHF)，简称心衰，是指各种心脏病及其他脏器疾病发展到严重阶段所致心功能不全的一种综合征，病机为各种原因导致心肌收缩力下降使心排血量不能满足机体代谢的需要，器官组织灌注不足，临床表现为肺循环和 (或)体循环瘀血症状，如呼吸困难、水肿等。心力衰竭时通常伴有肺循环和 (或)体循环的被动性充血故又称之为充血性心力衰竭［1］。强心颗粒由红参，制附子，黄芪，葶苈子等中药组成，具有益气温阳、强心、活血利水的功效，本实验主要考察了强心颗粒改善心肌供氧、利尿及抗氧化作用。

1 材料

1.1 试验药物 强心颗粒由辽宁省中医药研究院药学实验室提供，棕褐色颗粒，1 g颗粒含3.67 g生药，批号:20081015;心宝丸，广东省药物研究所制药厂，批号:20080922;注射用盐酸多柔比星 (阿霉素)，山西普德药业有限公司，批号:20080103;盐酸普萘洛尔片，东北制药总厂，批号:20080103;氢氯噻嗪片，天津力生制药股份有限公司，批号:0806010;马来酸依那普利片，扬子江药业集团，批号:08100902;SOD酶联免疫试剂盒，美国ADL公司，批号:SM200908;MDA酶联免疫试剂盒，美国ADL公司，批号:SM200908。

1.2 实验动物 ICR小鼠及Wistar大鼠由中国医科大学实验动物中心提供，动物许可证号:SCXK(辽)2007-0009。

1.3 仪器 LD5—2A离心机，北京医用离心机厂。

1.4 统计学处理 应用SPSS11.5统计软件进行处理。

2 方法和结果

2.1 强心颗粒对小鼠常压耐缺氧的影响［2］体质量18～22 g健康ICR小鼠60只，雌雄各半，按性别体质量随机分为6组，每组10只。分别为空白对照组，强心颗粒低剂量组21.5 g/kg、中剂量组43 g/kg、高剂量组86 g/kg，中药阳性对照药心宝丸组0.28 g/kg和西药阳性对照药盐酸普萘洛尔片组0.052 g/kg。每天灌胃 (ig)给药1次，连续7 d，空白对照组给予同体积蒸馏水。试验前各组小鼠禁食16 h，末次给药后45 min，将小鼠放入装有15 g钠石灰的250 mL广口磨口瓶中，用凡士林涂抹瓶口盖严，使之不漏气，立即计时。以小鼠呼吸停止时间为指标，记录小鼠因缺氧而死亡的时间 (存活时间)，t检验比较各给药组与空白对照组之间差异显著性，结果见表1。

表1 强心颗粒对小鼠常压耐缺氧的影响 (±s)

表1 强心颗粒对小鼠常压耐缺氧的影响 (±s)

注:与空白对照组比较，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01，＊＊＊P ＜0.001。

/min空白对照组 —组别 剂量/(g·kg-1)动物数/只 存活时间10 29.4±2.0强心颗粒低剂量组 21.5 10 30.1±5.5强心颗粒中剂量组 43 10 32.3±3.6*强心颗粒高剂量组 86 10 35.1±4.4＊＊心宝丸组 0.28 10 36.4 ±6.3＊＊盐酸普萘洛尔组 0.052 10 39.3±4.4＊＊＊

结果表明，强心颗粒中、高剂量组，中药对照药心宝丸组和西药对照药盐酸普萘洛尔组均显著延长小鼠在常压缺氧条件下的存活时间，与空白对照组比较差异显著 (P＜0.05，P＜0.01和P＜0.001)。提示强心颗粒具有增强小鼠耐常压缺氧能力的功效。

2.2 强心颗粒对代谢笼法小鼠利尿作用的影响［3］体质量18～22 g健康ICR小鼠60只，雌雄各半，按性别体质量随机分为6组，每组10只。分别为空白对照组，强心颗粒低剂量组21.5 g/kg、中剂量组43 g/kg、高剂量组86 g/kg，中药阳性对照药心宝丸组0.28 g/kg和西药阳性对照药氢氯噻嗪片组0.026 g/kg。每天灌胃给药1次，连续给药7 d，空白对照组给予同体积的蒸馏水。试验前将各小鼠放入代谢笼中适应两天，试验前小鼠禁食16 h，末次给药后各小鼠同时灌胃给予蒸馏水1 mL/只进行水负荷，然后观察并记录水负荷后1 h、2 h、3 h、4 h、5 h时各小鼠的尿量，t检验比较各给药组与空白对照组之间各时间点尿量差异显著性，结果见表2。

表2 强心颗粒对小鼠利尿作用的影响 (±s)

表2 强心颗粒对小鼠利尿作用的影响 (±s)

注:与空白对照组比较，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01，＊＊＊P ＜0.001。

组别 剂量/(g·kg-1) 动物数/只 尿量/mL 1 h 2 h 3 h 4 h 5 h空白对照组 — 10 0.15±0.14 0.19±0.13 0.16±0.11 0.08±0.06 0.18±0.16强心颗粒低剂量组 21.5 10 0.18±0.10 0.34±0.30 0.46±0.48 0.83±0.68＊＊ 0.46±0.50强心颗粒中剂量组 43 10 0.16±0.08 0.23±0.16 0.21±0.13 0.35±0.18＊＊ 0.23±0.17强心颗粒高剂量组 86 10 0.09±0.02 0.27±0.18 0.22±0.15 0.22±0.12＊＊ 0.22±0.14心宝丸组 0.28 10 0.14±0.08 0.15±0.11 0.20±0.08 0.08±0.04 0.09±0.06氢氯噻嗪组 0.026 10 0.28±0.17 0.43±0.12＊＊＊ 0.34±0.17* 0.29±0.24*0.27±0.29

结果表明，强心颗粒低、中、高剂量组，氢氯噻嗪片组给药后均能增加小鼠水负荷后4 h的尿量，与空白对照组比较，有显著性差异 (P＜0.01)。提示强心颗粒给药后4 h具有利尿作用。

2.3 强心颗粒对心衰大鼠血清SOD和MDA的影响［4-5］体质量200～250 g健康Wistar大鼠120只，雌雄各半。饲养1周后，除10只大鼠作为空白对照组外，其它大鼠腹腔注射3 mg/kg注射用盐酸多柔比星，每周1次，连续腹腔注射4周，空白组腹腔注射同体积生理盐水。末次注射1周后，造模大鼠较空白组大鼠进食量减少，毛色欠华，体质量减轻，活动量减少，注射时挣扎力明显减弱。心脏彩超显示，左室射血分数 (LVEF＜50%)则心衰造模成功。挑选造模成功的大鼠60只，按体质量随机分为6组，即模型组，强心颗粒低剂量组15 g/kg、中剂量组30 g/kg、高剂量组60 g/kg，中药阳性对照药心宝丸组0.2 g/kg和西药阳性对照药马来酸依那普利片组0.001 8 g/kg。每天灌胃给药1次，连续给药30 d，空白对照组和模型组给予同体积的蒸馏水。末次给药后，10%水合氯醛 (3.5 mL/kg)腹腔注射麻醉，腹主动脉取血5 mL，分离血清 (3 000 r/min，离心15 min)，酶联免疫试剂盒测定血清中SOD活性和MDA水平。t检验比较各给药组与模型组之间差异显著性，结果见表3。

表3 强心颗粒对心衰大鼠SOD和MDA的影响(±s)

表3 强心颗粒对心衰大鼠SOD和MDA的影响(±s)

注:与模型组比较，*P＜0.05;与空白对照组比较，#P＜0.05，##P＜0.01。

组别 剂量/(g·kg-1) 动物数/只 SOD/(U·L-1) MDA/(mmol·L-1)空白对照组-10 19.87±8.18 0.78±0.10模型组 - 10 12.26±6.50# 1.12±0.27##强心颗粒低剂量组 15 10 19.00±8.34 0.89±0.20*强心颗粒中剂量组 30 10 20.36±8.96* 0.88±0.13*强心颗粒高剂量组 60 10 23.07±11.02* 0.85±0.16*心宝丸组 0.20 10 20.14±7.92* 0.86±0.20*马来酸依那普利片组 0.018 10 19.40±6.77* 0.86±0.14*

结果表明，模型组SOD和MDA与空白对照组比较差异显著 (P＜0.05，P＜0.01)。强心颗粒低、中、高剂量组、心宝丸组和马来酸依那普利片组均能提高心衰大鼠血清中SOD活力，并降低MDA水平，与模型组比较差异显著 (P＜0.05)。表明强心颗粒可通过抗氧化作用发挥其改善心功能的作用。

3 讨论

心肌缺血缺氧会引起心肌细胞代谢过程紊乱，尤其是能量物质的生成锐减，正常心功能难以维持，进而发生心衰。又因血流中断，有害的产物难以清除。因此，可以通过改善血供，降低氧耗，清除或对抗有害物质对心肌的不良影响以保护心肌［6］。近年来发现氧自由基 (oxygen free radicals，OFR)及其脂质过氧化物 (Lipidperoxide，LPO)可能参与了心衰形成、发展的病理过程。生理情况下，体内氧自由基的产生和清除保持动态平衡，心衰时由于心肌缺血缺氧，使氧自由基产生增加，同时清除氧自由基的防御系统活性下降，从而使氧自由基进一步增多，而氧自由基的增多又可损害心肌导致或加重心衰。膜的脂质过氧化反应是氧自由基损伤的主要途径，MDA是脂质过氧化损伤的主要代谢终产物，而SOD则是机体抗氧化防御系统中的重要金属酶，是体内唯一直接淬灭自由基的酶，其活性直接影响体内脂质过氧化的平衡。本实验结果表明，强心颗粒中、高剂量组均显著延长小鼠在常压缺氧条件下的存活时间;提高心衰大鼠血清中SOD活性，并降低MDA水平。提示强心颗粒具有增强小鼠耐常压缺氧能力的功效，同时可通过清除氧自由基和脂质过氧化物发挥其改善心功能的作用。利尿剂是治疗心力衰竭的关键药物之一，它能较快的缓解心力衰竭的症状，比其他药物作用迅速;也是唯一可以适当控制心力衰竭患者体内水钠潴留的药物。强心颗粒低、中、高剂量组均能增加小鼠水负荷后4 h的尿量，提示其可能通过利尿作用减轻心衰患者的水钠潴留，降低前负荷，从而改善心衰。综上可见，强心颗粒可能通过增加心肌供氧，抗氧化作用及利尿作用而发挥其抗心力衰竭的作用。

［1］汪艳丽，刘如秀，刘志明.中西医结合治疗对慢性心衰患者心功能的影响［J］.中西医结合心脑血管病杂志，2010，8(10):1151-1152.

［2］朱秋萍，李洪亮，范小娜.黄花倒水莲水提取物耐缺氧作用的研究［J］.赣南医学院学报，2007，27(4):510-511.

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［4］韩 凡，罗 翌，梅广源.参附芪注射液治疗充血性心力衰竭的实验研究［J］.中国中医急症，2005，14(11):1088-1089.

［5］韩红亚，李 瑞，仙人强心片对充血性心力衰竭家兔氧自由基清除作用的实验研究［J］.山西中医学院学报，2004，5(1):19-21.

［6］付晓春，王 希，郑 辉，等.荭草苷对缺血缺氧心肌的保护作用［J］.南方医科大学学报，2007，27(8):1173-1175.