甲磺酸托烷司琼含量测定

石云龙，孟祥军

(1.沈阳医学院沈洲医院药剂科，辽宁沈阳110002;2.沈阳医学院基础医学院化学教研室)

甲磺酸托烷司琼是一种外周神经原及中枢神经系统5-羟色胺3(5-HT3)受体的高效、高选择性竞争拮抗剂。用于预防和治疗癌症化疗引起的恶心和呕吐。在控制强致吐化疗药物的急性呕吐及改善食欲不振方面疗效好，不良反应少［1］。甲磺酸托烷司琼注射液现行质量标准为国家食品药品监督管理局甲磺酸托烷司琼注射液试行标准WS-695(X-509)-2002(北京四环医药科技有限公司)。该标准影响因素较多，试剂配制繁杂且有一定毒害，操作步骤也较繁琐。该制剂在《中国药典》化学药品标准第二册中没有收载。为了更好地控制本产品质量，提高甲磺酸托烷司琼注射液试行标准，保证产品的疗效，本文参照国家食品药品监督管理局盐酸托烷司琼注射液进口标准(JX20040224)［2］，采用高效液相色谱法对甲磺酸托烷司琼注射液中有关物质进行研究，建立了快速、准确、专属性强、灵敏度高的有关物质检查方法，可更好用于本品的质量控制。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

1.1.1 仪器 AUW120D型电子天平 (1/10万)(日本岛津仪器有限公司)、检测器SPD-20A、高压泵LC-20A、系统控制器CBM-20Alite高效液相色谱仪 (日本岛津仪器有限公司)。

1.1.2 主要试剂 甲磺酸托烷司琼对照品 (自制工作对照品，纯度为99.8%)，甲磺酸托烷司琼注射液 (山西诺成制药有限公司)，规格:2 ml∶6 mg(以甲磺酸托烷司琼计)。(批号为10101011、10101111、10101211)，乙腈 (色谱纯)，甲醇(色谱纯)，三乙胺 (色谱纯)，水 (纯化水)。

1.2 实验方法

1.2.1 色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相为甲醇－水－乙腈－三乙胺 (750∶200∶50∶0.2);流速为1.0 ml/min;检测波长284 nm;柱温为室温;进样量20μl。

1.2.2 溶液的配制 供试品溶液:取本品适量，精密称定，用流动相A溶解并稀释制成每ml中含有甲磺酸托烷司琼1 mg的溶液，作为供试品溶液。对照溶液:精密称取供试品溶液1 ml，置200 ml量瓶中，加流动相A稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。

1.2.3 检测波长的选择 取甲磺酸托烷司琼对照品适量，加流动相溶解并稀释制成每1ml含有甲磺酸托烷司琼10μg的溶液，照紫外分光光度法 (中国药典2010年版二部附录ⅣA)，在190～400 nm处扫描，甲磺酸托烷司琼在284 nm处有最大吸收，标准中确定的检测波长是本品的特征吸收峰，选择合理，因此确定标准中的检测波长为284 nm。

2 结果

2.1 线性实验 精密称取甲磺酸托烷司琼对照品约13.4 mg，置10 ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为储备液。精密量取贮备溶液0.8、0.9、1.0、1.1、1.2 ml分别置10 ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，以峰面积 (A)对检测量 (μg)进行线性回归 (n=5)，得回归方程为:Y=2 547.2X+3.456，r=1。结果表明，以高效液相色谱法测定甲磺酸托烷司琼的检测量在1.6～2.4μg范围内线性关系良好。

图1 甲磺酸托烷司琼标准曲线图谱

2.2 重复性实验 取本品 (批号10101011)，取装量差异项下的内容物，精密量取适量，加流动相稀释制成每1ml含0.1 mg的溶液，精密量取20 μl注入液相色谱仪，连续测定6次，记录色谱图;另取甲磺酸托烷司琼对照品适量，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。RSD为0.15%，结果表明，保留时间及含量测定结果的 RSD≤2.0%，本方法重复性良好。

2.3 稳定性实验 取同一供试品溶液分别于配制后0、1、2、3、4 h时内按“3.2.1”项下的色谱条件进行测定，连续测定5次，记录色谱图;另取甲磺酸托烷司琼对照品适量，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。RSD为0.15%，结论:5次进样所得的含量结果的RSD值均＜2.0%，表明供试品溶液在4 h内稳定。

2.4 耐用性实验 分别考察流动相比例变化±2%、流动相 pH值变化±0.2、柱温变化 ±5℃、检测变化±2 nm、流速变化±5%以及采用三根不同批号的色谱柱进行测定时，每个条件下各测试两次，可接受的标准为:主成分峰的拖尾因子不得大于2.0，主成分峰与其他成分峰必须达到基线分离;各条件下的含量结果 (n=18)的相对标准差应不大于2.0%。结论:试验结果表明，RSD均小于2%，本测定方法稳定，不会受到客观因素的影响，准确度高。

2.5 准确度实验 按处方量的80%、100%、120%精密称取甲磺酸托烷司琼对照品 (含量99.8%)各3份，加入相同辅料，再加流动相稀释制成甲磺酸托烷司琼质量浓度分别为0.08、0.10、0.12 mg/ml的溶液，精密量取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图;另取甲磺酸托烷司琼对照品适量，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得X(平均值)=99.99%，RSD=0.51%。

结论:本法回收率RSD＜2.0%，准确度良好。表明本方法准确可靠。

2.6 含量测定 含量测定结果10101011、10101111、10101211分别为99.8%、99.8%、99.6%。

3 讨论

对于高效液相色谱法含量测定，原采用以甲醇 －水 －乙腈 －三乙胺 (750∶200∶50∶0.3)为流动相，色谱峰形较好，但是考虑到三乙胺加入量较多会对色谱柱损害较大，所以采用以甲醇－水－ 乙腈 － 三乙胺 (750∶200∶50∶0.2)为流动相。

经上述方法学验证，本标准中最后确定的色谱条件及检测方法能够准确检测产品含量及其相关杂质，符合国家食品药品监督管理局甲磺酸托烷司琼注射液试行标准中相关杂质的限度要求，可以有效控制产品质量。本文建立了专属、灵敏、快速、准确的甲磺酸托烷司琼注射液的含量测定，可以更好的控制该药品的质量。

［1］王宏宇，冯奉仪，李青.甲磺酸托烷司琼预防化疗药物引起的恶心呕吐 (Ⅱ期临床试验报告) ［J］.中国新药杂志，2001，10(3):226－227.

［2］盐酸托烷司琼注射液.JX20040224.国家食品药品监督管理局.国家进口药品注册标准 ［S］.2005，1－3.