酒精对雄性大鼠性激素、精浆果糖、精浆锌的影响

杨向峰 徐计秀 梁廷宇

在中华民族的历史长河中，酒及酒文化一直占据着重要地位，素有无酒不成席之说。过度饮酒对身体的危害很大，特别是对男性不育方面。从遗传学角度分析，酒精对人体生殖细胞的损伤，是导致出生缺陷的重要原因之一[1-2]。有关男性生殖的状况和研究是近十多年来男性学研究的热门话题。研究表明，人类的生殖功能正逐渐退化，在过去五十年内，人类精液质量下降了近一半，将来不育症的发生率可能高于目前文献报道的12%～15%，甚至达到30%以上[3]。通过动物实验研究过度饮酒对男性不育症的机制，对男性不育症的防治有着重要的意义。

1 资料与方法

1.1 实验动物及分组处理 选择8周龄实验用健康成年雄性SD大鼠40只，体重(210±20)g，由山西医科大学实验动物中心提供。将雄性大鼠随机分成四组，每组10只。对照组(酒精0.0 g/kg)、低量组(酒精2.7 g/kg)、中量组(酒精4.5 g/kg)、高量组(酒精7.5 g/kg)。各酒精处理组均用无水酒精加入不同量蒸馏水灌胃，灌胃量为1.5 ml/l00 g，对照组给予等量蒸馏水，1次/d，连续13周。于末次染毒24 h后采用颈椎脱臼法处死，经下腔静脉采血并分离血清，置-20 ℃冰箱冻存，待测血清中睾酮(T)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)含量；取大鼠精囊中精液，放入37 ℃恒温箱中液化，5000 r/min离心30 min，分离出精浆于-70 ℃冰箱冻存，待测精浆中果糖含量、精浆中锌含量。

1.2 观察指标及方法

1.2.1 血清性激素测定 13周后，分别经下腔静脉采血并分离血清，置-20 ℃冰箱冻存待测。采用放免法检测血清中睾酮(T)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)含量。

1.2.2 精浆果糖、锌测定 13周后，分别剖取大鼠精囊中精液，放入37 ℃恒温箱中液化，5000 r/min离心30 min，分离出精浆于-70 ℃冰箱冻存待测。采用紫外法检测精浆中果糖含量，采用比色法检测精浆中锌含量。

1.3 统计学处理 采用SPSS 16.0统计软件进行分析。计量资料以()表示，多组间的均数比较采用单因素方差分析(One-Way ANOVA)；方差齐性时采用Dunnett法，若方差不齐，采用Tamhane’s T2进行校正两两比较，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 酒精对性激素(T、FSH、LH)的影响 各酒精处理组大鼠血清T、FSH、LH含量均明显低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。详见表1。

表1 酒精对血清T、FSH、LH的影响()

表1 酒精对血清T、FSH、LH的影响()

*P<0.05，△P<0.01，与对照组相比

组别 T(nmol/L) FSH(mIU/L) LH(mIU/L)对照组(n=10) 12.952±2.89 1.395±0.19 1.539±0.31酒精2.7 g/kg组(n=10) 8.598±2.19△ 0.716±0.14△ 1.213±0.26*酒精4.5 g/kg组(n=10) 6.321±2.77△ 0.582±0.31△ 1.098±0.20△酒精7.5 g/kg组(n=10) 3.005±2.21△ 0.421±0.47△ 0.821±0.11△

2.2 酒精对精浆生化(果糖、锌)的影响 各酒精处理组大鼠精浆果糖、锌的含量均明显低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。详见表2。

表2 酒精对精浆果糖、锌的测定结果()

表2 酒精对精浆果糖、锌的测定结果()

*P<0.05，△P<0.01，与对照组相比

组别 果糖(mg/dl) 锌(μg/ml)对照组(n=10) 0.133±0.021 0.019±0.003酒精2.7 g/kg组(n=10) 0.058±0.025△ 0.016±0.003*酒精4.5 g/kg组(n=10) 0.033±0.013△ 0.011±0.002△酒精 7.5 g/kg组(n=10) 0.029±0.010△ 0.006±0.003△

3 讨论

性腺轴功能的调节是人类生殖生理活动的关键，任何一个环节异常都可能导致男性不育。睾丸是精子发生和雄激素合成的重要器官。睾酮主要由睾丸的Leydig间质细胞分泌，后者是黄体生成素(LH)作用的靶细胞，黄体生成素是控制睾酮产生的主要刺激激素。雄性激素睾酮(T)是维持精子发生和成熟的必要条件，睾酮的分泌不足可影响精子的发生和成熟，造成生殖能力的下降。刘长云等[4]研究了乙醇可以直接作用于睾丸间质细胞，使间质细胞合成和分泌T的能力下降，从而使血中T浓度降低。Shi等[5]的观点是，乙醇对下丘脑、垂体及睾丸均存在毒性作用。正是乙醇的这种毒性作用影响了下丘脑-垂体-性腺轴的调节作用，致使血LH、FSH浓度降低[6]。El-Sokkary 等[7]用体视学方法观察长期给予乙醇的雄性大鼠的睾丸组织，曲细精管直径明显缩小，各级生精细胞数目减少，并可见退化变性的生精细胞。Martinez等[8]给予大鼠含乙醇的液体饮食，亦有类似报道。可以看出，酒精在体内经血-睾屏障进入睾丸组织，损害生殖器官，还可经血-脑屏障进入脑组织，代谢产生的自由基直接损害下丘脑和垂体，对下丘脑-垂体-性激素内分泌轴造成损害，影响促性腺激素的分泌，影响支持细胞的内分泌功能[9-10]。

随着生物化学技术手段不断发展，精浆生化检测在男性不育诊断中起着越来越重要的作用。精囊腺分泌的果糖是供精子利用的主要能源物质。前列腺分泌的锌能促进生殖器官发育，维持正常生精功能，提高精子密度和活力[11]。Dieudonne等[12]报道，精浆果糖可作为男性不育症研究中一项筛查指标。精浆果糖为精子直接利用，其浓度与精子运动及受精能力呈正相关。当精浆果糖浓度低于正常时，不能提供精子能源，影响精子运动，以致不易受孕[13]。精浆果糖的检测有助于了解不育患者精囊腺的功能状态以及不育症的病因诊断，对判断男性生育力具有重要意义。

锌是人体重要的微量元素，锌含量的测定也反映前列腺的功能。精浆锌对男性生殖功能有非常重要的作用，通过影响下丘脑-垂体-睾丸轴的功能，进而影响性腺的发育及睾丸的生精功能[14]；锌是维持精子染色质稳定性的重要物质，可以清除由白细胞和有缺陷精子产生的氧自由基，减少氧自由基对精子的毒性[15]，锌直接参与精子生成、成熟、激活和获能过程，对精子活力、代谢及其稳定性都具有重要作用。Chia等[16]报道，精浆锌浓度与精子密度、活力和活率呈正相关。Ali等[17]报道，雄激素水平低下的少或无精子症患者精浆锌水平显著下降，认为精浆锌缺乏是不育患者睾丸功能低下的原因之一。提示锌在精子发生过程中起重要作用，锌的缺乏可能导致精子发生异常或停滞。

酒精是乙醇的俗称，乙醇是亲脂性的小分子物质，过量饮用后，迅速吸收进入体内的乙醇超过了肝脏的氧化代谢能力而蓄积，乙醇的代谢产物乙醛能与各种蛋白质结合，形成乙醛-蛋白质毒物，此毒物可以抑制蛋白质合成，干扰细胞膜中类脂和蛋白结构，引起细胞功能障碍。

Christeff报道，长期饮酒的人可导致细胞及机体免疫力异常，这可能是饮酒对睾丸功能产生影响的原因之一[18]。在本研究中，饮酒大鼠血清激素的含量，如LH、FSH及T都较正常对照组降低。本研究结果表明，各酒精组血清T水平均明显低于对照组，说明酒精可以抑制睾丸间质细胞合成睾酮，这与有关报道一致[19-20]，从而提示酒精所致的睾丸损伤的另一特征是抑制睾丸类固醇合成。本研究显示，各酒精处理组大鼠血清LH均明显低于对照组，高剂量组血清FSH水平也明显低于对照组。酒精抑制睾丸间质细胞合成T，使血清T水平下降，随即因长反馈机制，下丘脑、垂体促使LH分泌增多来弥补间质细胞功能受损，但随着酒精暴露时间的延长，这种“中枢性补偿”发生缺陷。从而引发下丘脑-垂体轴的损伤。另有研究表明，酒精可以使下丘脑LHRH mRNA表达上调，还使垂体雄激素受体数目减少，这说明除睾酮反馈机制外，酒精可以直接作用于下丘脑或垂体来干扰下丘脑-垂体-性腺轴的功能，从而进一步影响睾丸的结构和功能。

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