白芍总苷联合复方甘草酸苷治疗斑秃疗效评价及对血清TNF－α、TGF－β1和IL－12的影响

周 敏 万慧颖 刘杨英 陈 金

白芍总苷联合复方甘草酸苷治疗斑秃疗效评价及对血清TNF－α、TGF－β1和IL－12的影响

周 敏 万慧颖 刘杨英 陈 金

目的: 评价白芍总苷联合复方甘草酸苷治疗斑秃疗效及对血清TNF－α、TGF－β1和IL－12的影响。方法: 84例斑秃患者随机分为治疗组(43例)和对照组(41例)。治疗组给予口服白芍总苷及复方甘草酸苷，局部外用倍他米松溶液，对照组仅给予口服复方甘草酸苷及外用药物，3个月后评价疗效并采用ELISA法检测患者血清TNF－α、TGF－β1及IL－12水平。结果: 治疗组和对照组治疗有效率分别为83.7%和63.4%，差异有统计学意义。治疗组TNF－α、TGF－β1及IL－12水平较对照组明显降低(P＜0.05)。结论: 白芍总苷联合复方甘草酸苷可能通过调节血清细胞因子达到治疗斑秃的作用。

斑秃； 白芍总苷； 复方甘草酸苷

斑秃是一种头部的常见皮肤病，其病因和发病机理尚未完全明了，目前多数学者倾向于认为斑秃是在遗传易感性的基础上，在各种激发因素作用下由T细胞介导的自身免疫功能失调所致的针对生长期毛囊，以Th1型反应为特征的器官特异性自身免疫性疾病。1目前针对该病的治疗方法和药物很多，疗效不一。我们采用白芍总苷与复方甘草酸苷联合治疗斑秃，观察其疗效及治疗前后对患者血清TNF－α，TGF－β1和IL－12的影响。

1 资料与方法

1.1 一般资料 本组84例斑秃患者均来自我科门诊，临床表现符合斑秃诊断标准。2将患者随机分成两组。其中治疗组43例，男22例，女21例；年龄16～58岁，平均31.5岁；病程10天～1年，平均21.42周。对照组41例，其中男24例，女17例；年龄18～56岁，平均29.8岁；病程5～11个月，平均22.64周。皮损多表现为1～3片边界清楚的圆形或椭圆形秃发斑，直径1～7 cm。治疗组与对照组两组患者的年龄、性别、病情程度及病程经组间t检验，无统计学差异(P＞0.05)，具有可比性。对治疗组和对照组治疗前后均进行血清TNF－α、TGF－β1及IL－12水平检测，10名健康人血清作为对照。排除标准:严重心、肝、肾功能不全者；高血压、糖尿病、醛固酮症，肌病，低钾血症等患者；假性斑秃、拔毛癖、麻风脱发、头癣、梅毒性秃发患者；1个月内系统或局部应用过糖皮质激素；妊娠及哺乳妇女；对治疗所用药物过敏者；依从性差者。实验试剂、试剂盒购自深圳晶美生物工程有限公司

1.2 治疗方法 对照组予复方甘草酸苷片口服，每次50mg，日3次，予本院自配制剂倍他米松溶液(主要成分:倍他米松、二甲基亚砜)外用。治疗组在对照组的基础上口服白芍总苷日3次，每次600 mg。1个月为1个疗程，每月随访1次，3个疗程后评价疗效。观察患者病变区域治疗前后毛发再生情况判断疗效，观察治疗期间不良反应判断治疗安全性。

1.3 血清TNF－α、TGF－β1及IL－12测定 采集静脉血3mL，离心收集血清，－70℃保存。采用双抗夹心ELISA法，操作步骤按试剂盒说明进行。疗效评价方法3:痊愈，新发全部生长，分布密度、毛发粗细、色泽同正常毛发，拔发试验阴性；显效，脱发区普遍毳毛生长，毛发停止脱落，终毛覆盖率50%以上，有较多毳毛变为终毛，拔毛试验阴性；好转，新发生长10%以上(包括毳毛)，但生长缓慢，拔发试验阴性或阳性；无效，无新发生长或新发生长低于10%或继续脱发。总有效率＝痊愈率＋显效率。观察指标及疗效评判标准分别于开始治疗的当天、治疗后3个月进行。同时观察记录不良反应。

1.4 统计学方法 定性资料结果采用χ2检验，计量资料数据用(¯x±s)表示，各组资料间采用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 治疗结束时，治疗组与对照组有效率分别为83.7%和63.4%，差异具有统计学意义(P＜0.05，χ2＝8.24)，见表1。

表1 两组治疗斑秃疗效比较

治疗过程中两组均未发现严重不良反应，治疗期间治疗组有2例有轻微腹泻自行缓解，亦不影响治疗。

2.2 血清TNF－α、TGF－β1及IL－12水平变化 见表2。治疗前患者TNF－α水平明显高于正常人组及治疗后，治疗前后及与正常对照比较，t值分别为2.16、2.78和3.42，均P＜0.05，治疗组同对照组相比有明显降低，t＝2.08，P＜0.05，差异有统计学意义；患者对照组及治疗组治疗前后TGF－β1水平与正常对照比较，t值分别为3.25、5.12和6.87，均P＜0.05，治疗组同对照组相比亦有明显降低，t＝2.68，P＜0.05，差异有统计学意义；患者对照组及治疗组治疗前后IL－12水平与正常对照比较，t值分别为2.08、2.34和4.43，均P＜0.05，但治疗组同对照组相比t＝1.38，P＞0.05，差异无统计学意义。

表2 两组治疗前后患者血清TNF－α、TGF－β1及IL－12水平

3 讨论

斑秃是一种常见多发的疾病，影响人的外观及社交生活，其发病机制目前尚不完全清楚。既往已经针对斑秃开展了较多研究，4目前认为该病是在遗传易感性的基础上，由T细胞介导的、在各种刺激因素作用下自身免疫功能失调所致的针对生长期毛囊以Th1型反应为特征的器官特异性自身免疫性疾病。大量临床和实验室的研究显示，细胞因子是造成斑秃的关键因素。在斑秃患者的皮损和血循环中发现有多种细胞因子的异常表达，并通过干涉毛发的生长周期使毛发提前抑制，从而导致脱发。TNF－α、TGF－β1及IL－12是Th1细胞因子中具有代表性的几种。TNF5是一种主要由单核巨噬细胞分泌的细胞因子，影响多种组织和细胞的生长、分化，在免疫应答和炎症反应的不同水平起着重要的调节作用。TNF－α能诱导内皮细胞表达ICAM－1，促进炎症细胞与血管内皮细胞的相互作用，可产生多种细胞因子，可抑制毛囊生长，使毛乳头凝聚和毛基质的前皮质细胞异常角化；TGF－β16是细胞生长和分化的多功能调节因子，在细胞生长负调节中起主要作用，具有可抑制上皮细胞生长和免疫系统的功能。TGF－β1作为一种角质形成细胞增殖的抑制剂和细胞凋亡的诱导剂，在毛发生长退化期调节中可能起重要作用。IL－127是已知的诱导Th1反应的主要因子，能增强细胞免疫应答，如促进细胞毒性T细胞的细胞毒性作用和增强自然杀伤细胞的杀伤作用，并诱导其分泌IFN－γ；还能诱导TNF－α、IL－3等细胞因子的表达，促进Th1细胞发育。我们的研究结果显示斑秃患者治疗前这几种细胞因子均高于正常人对照，治疗后均下降，证明这几种细胞因子在斑秃的发病中起到了一定的作用，与既往研究结果一致。

糖皮质激素可以通过抑制免疫、抗炎作用控制斑秃的发展，促进毛发的再生，但由于其不良反应，不宜系统及长期使用。局部注射治疗有一定的疗效，但增加患者痛苦及感染风险，且毛发再生具有不稳定性。复方甘草酸苷近年应用于治疗斑秃取得了良好的疗效。研究表明，8其在体内具有较强的抑制补体和抗体的作用，能抑制组胺、激肽、白三烯等炎性介质的释放，具有类激素的抗炎、抗过敏作用，还能调节免疫和抗病毒等，治疗以Th1型反应为特征的器官特异性自身免疫性疾病时与糖皮质激素的作用一致，但却减轻长期应用糖皮质激素的副作用因此运用复方甘草酸苷片治疗斑秃，能通过类激素的免疫调节作用，从而达到中止斑秃发展，促使毛发生长的目的。白芍总苷是从白芍干燥根中提取的有效成份，9主要成分包括芍药苷、羟基芍药苷、芍药花苷、芍药内酯苷以及苯甲酰芍药苷等，其中芍药苷占总苷量的90%。具有抗炎、镇痛、保肝、护肾、调节脂代谢及调节细胞增殖与凋亡等作用，能通过多种途径抑制自身免疫反应，对免疫细胞的增殖、免疫活性物质的产生具有低浓度促进和高浓度抑制的双向调节作用，还具有调节细胞因子如肿瘤坏死因子，白细胞介素等的作用。目前广泛用于治疗干燥综合征、扁平苔藓、湿疹、银屑病、系统性红斑狼疮等自身免疫性疾病且取得一定的疗效，但将其用于治疗斑秃尚报道不多。10在我们的观察中，治疗组痊愈率及有效率均明显高于对照组，结果具有统计学意义，证明这两种药物结合治疗斑秃具有良好的疗效，可以缩短病程，且在治疗过程中未发现明显不良反应。中医认为斑秃多属肝肾不足，阴血不足或肝气郁结，气机不畅所致。11治疗重在滋补肝肾，益精养血，这两种药物都具有相关的作用。在本研究中，通过这两种药物的治疗，患者升高的Th1细胞因子TNF－α、TGF－β1及IL－12均降低，且治疗组同对照组相比，TNF－α及TGF－β1的降低更为显著，其差异具有统计学意义，说明二者联合应用对这两种细胞因子的抑制作用更为明显，间接说明可能这两种细胞因子对于斑秃的发病起着更为重要的作用。综上所述，复方甘草酸苷与白芍总苷联用具有良好的临床效果，且不良反应少。通过治疗，这三种升高的细胞因子明显降低，提示这两种药物联用可能通过其抗炎及双向调节免疫作用，纠正外周血Th1/Th2平衡失调，可能具有协同作用，但其具体机理还需深入研究。

1 Lit LC，Wong CK，Li EK，et al.Elevated gene expressionof Th1/Th2 associated transcription factors is correlated with disease activity in patients with systemic lupus erythematosus.J Rheumatol，2007，34(1):89－96.

2朱学骏.现代皮肤病性病诊疗手册.北京:北京医科大学出版社，2001.241.

3邹德明.中西医结合治疗斑秃疗效观察.当代医学，2010，16 (12):148－149.

4 Katagiri K，Arakawa S，Hatano Y.In vivo levels of IL－4，IL－10，TGF－beta1 and IFN－gamma mRNA of the peripheralblood mononuclear cells in patients with alopecia areatain comparison to those in patients with atopic dermatitis.Arch Dermatol Res，2007，298(8):397－401.

5Ettehadi P，GreavesW，Wallach D，et al.Elevated tumor necrosis factor－alpha(TNF－alpha)biological activity in psoriasis skin lesions.Clin Exp Immnunol，1994，96:146－151.

6 LiMO，Wan YY，San JB，et al.Transforming growth factor－β regulation of immune responses.Annu Rev Immunol，2006，24: 99－146.

7 Gately MK，Renzetti LM，Magram J，et al.The interleukin－12/ interleukin－12－receptor system:role in normal and pathologic immune responses.Annu Rev Immunol，1998，16:495－521.

8黄卫宁，黄卓辉，卢肖霞，等.甘草酸苷对重型斑秃外周血Th1/Th2细胞因子的调控研究.皮肤性病诊疗学杂志，2011，18(5):321－323.

9彭友华，李建军.白芍总苷在皮肤科的应用及研究进展.皮肤性病诊疗学杂志，2010，17(3):250－252.

10冯志平，党林.白芍总苷胶囊联合地蒽酚软膏治疗斑秃50例疗效观察.中国美容医学，2012，21(12):390.

11谈煜俊，王小平.皮肤病实用方.南京:江苏科学技术出版社，1994.303.

(收稿:2013－12－10 修回:2013－12－25)

Assessm ent of therapeutic efficacy and effects of total paeony glucosides combined w ith com pound glycyrrhizin on TNF－α，TGF－β1 and IL－12 in patien tsw ith alopecia areata

ZHOU Min，WAN Hui-ying，LIU Yang-ying，etal.Sichuan Academy ofMedical Science.People's Hospital of Sichuan，Chengdu，610031

Objective:To assess the efficacy and determine the possiblemechanism of total paeony glucosides combined with compound glycyrrhizin in the treatmentof alopecia areata.Methods:Eighty－four patients were random ly divided into experimental group(43 patients)and control group(41 patients).In addition to the therapy of compound glycyrrhizin and betamethasone liquid in control group，the total paeony glucosides was given to the patients in experimental group.After 3－months treatment，the therapeutic effectswere evaluated and the levels of TNF－α，TGF－β1 and IL－12 weremeasured by ELISA immunosorbent assay.Results: The effective rate in experimental group and control group were 83.7%and 63.4%，with a significant difference(P＜0.05).The levels of TNF－α，TGF－β1and IL－12 were reduced in experimental group(P＜0.05).Conclusion:The treatmentmechanism of total paeony glucosides combined with compound glycyrrhizin in the treatmentof alopecia areatamay be by regulation of NF－α、TGF－β1 and IL－12.

alopecia areata；total paeony glucosides；compound glycyrrhizin

四川省医科院·四川省人民医院皮肤病性病研究所，四川成都，610031