补肾法治疗缺血性脑卒中实验研究概述

李霁敏，王 键

（1.安徽中医药大学2011级硕士研究生，安徽 合肥230038；2.安徽中医药大学，安徽 合肥230038）

近年来，用补肾法治疗缺血性脑卒中的实验研究取得较大发展，现综述如下。

1 肾与脑

肾生髓，脑为聚髓之海，先天之精是脑髓生成的原始物质。胡聪等［1］提出“肾充于脑”，肾的精微物质充养于脑，是脑的形成、发育及功能发挥的物质基础。冯新玲等［2］指出脑髓的生成一是先天之精化生脑髓，二是水谷之精充养脑髓，三是肾精化生脑髓。脑与肾在体表通过督脉和足太阳膀胱经相互沟通。张俊龙［3］据身形应九野，指出脑与肾恰好构成了人体的子午线，脑与肾是脑与脏腑间关系最为密切的一对。经络结构上所形成的“脑—督脉—肾”子午线，是人体生命活动的根本，故又称之为“生命线”。人体的精气转输、阴阳升降及生理活动的调控皆由此生命线所主宰。

在生理状态下，肾中精气旺盛，肾精化生为髓，上充于脑，则髓海充盈，濡养脑神，神识清明，而发挥主元神、主运动等作用。同时，肾中阴水亦上滋于脑窍，使水火相济。另一方面，肾中水液的气化与代谢也靠脑的升提和固摄作用，脑髓充足，神明意识轻灵，则升提作用强，水液代谢正常。

在病理状态下，肾精不足以上奉于脑，脑髓不能生成，则“髓海不足”或“上气不足”，致脑神失用，神明不清，如《灵枢·海论》所言：“髓海不足由脑转耳鸣，胫酸眩冒目无所见，懈怠安卧。”若脑的认识、神志障碍，则升提、固摄作用减弱，肾的气化功能下降，膀胱失司，大小肠失固。另外，如因外伤或邪气上扰，致脑气散乱，脑阳被郁而不能下达，则会出现高热及神志失常病症，或有因肾气不能正常激发而出现的病症。

头为人体之至高点，为“诸阳之会”，肾阴不足，风阳上亢，则为眩晕、中风、痉厥，若肾阳不足，阳虚不能制水，则水液上犯，脑窍失空，脑转耳鸣［4］。

2 肾精与神经干细胞

Mckay于1997年在《Science》杂志上将神经干细胞的概念总结为具有分化为神经元、星形胶质细胞及少突胶质细胞的能力，能自我更新并足以提供大量脑组织细胞的细胞。神经干细胞的主要生物学特性有［5］：①具有自我更新或复制的能力。神经干细胞在一定条件下能够进行有丝分裂。有丝分裂分为两类即对称分裂和不对称分裂。在分裂增殖过程中，子代细胞仍然保持干细胞的属性。②多分化潜能。神经干细胞能够分化成为神经元细胞、少突胶质细胞及星形胶质细胞。③迁徙能力。在神经系统的发育过程中，神经干细胞不断的进行迁徙，并且受到病变部位神经源性信号的影响，参与神经结构和功能的修复。④良好的组织相容性。研究中发现移植的神经干细胞能够通过血脑屏障，在脑组织中与宿主细胞在结构功能上形成良好的整合。⑤可以被转染并稳定的表达外源性基因。⑥可以分离出单个细胞克隆。

张进等［6］指出先天之精即禀受于父母的生殖之精。而来自父母的精子与卵子结合而成的受精卵，此即全能干细胞，故先天之精内涵包括全能干细胞内的全部遗传物质及其蕴藏的种属特异的发育信息。生髓功能与骨髓腔内骨髓干细胞及脑髓中神经干细胞相关。蔡光先等［7］认为在分布和功能等方面胚胎干细胞与先天之精十分相近。并指出肾精是中医脑形成的物质基础，而胚胎干细胞可以诱导出神经板、分化为所有神经细胞，因此“肾—脑”与“胚胎干细胞—神经细胞”存在某种平行关系。王康锋［8］把神经干细胞和肾精的关系总结为五个方面。①二者对细胞生命过程的调控非常相似。②肾精藏精生血的功能与神经干细胞可跨胚层分化为造血系统的各系细胞有一定联系。③神经干细胞的自我复制或更新可以看作是肾主生殖功能在细胞水平上的体现，而肾主生殖是通过肾精实现的。④肾精是脑髓形成的物质基础，神经干细胞可以分化为中枢神经系统内神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞三种主要神经细胞，而这些细胞是脑髓的主要组成部分。⑤肾精是生命的原动力，与胚胎干细胞关系密切，而胚胎干细胞是神经干细胞的来源之一。另外，神经干细胞一般处于休眠状态，只有出现损伤或刺激时才会被激活，目前已知激活内源性NSCs的因素有脑缺血、脑外伤、癫痫及某些神经系统退行性病变等。而“肾者主蛰，封藏之本，精之处也”，“阴者藏精而起亟也”，说明肾所藏之精平时是藏而不露的，处于沉默状态，应变而起发挥生理效应。黄建华等［9］指出人的形体（髓、骨、脉、筋、肉、皮、毛）无不是由“肾精”发育而来。“肾精”也担负成年组织修复的功能。成年后“肾精”仍具有生成性，有再生的功能。

3 主要病机

《素问·脉解篇》谓：“内夺而厥，则为暗扉，此肾虚也。”张介宾强调“内伤积损”是导致本病的根本原因，认为“人于中年之后，多有此证，其衰可知……根本衰则人必病，根本败则人必危矣。所谓根本者，即真阴也”。而“治此之法，只当以培补元气为主”（《景岳全书·十一卷·非风》）。叶天士也认为，中风的病机是“肾阴弱，收纳无权，肝阳炽，虚风蒙窍，乃上实下虚之象”（《临证指南医案·卷一中风》）。近代张山雷更明确的指出：“肾水之虚，耗于平时，为是病之本。”

现代医家潘相安［10］提出中风不论是标证还是里证，不论是虚证还是实证，不论是阳虚还是阴虚，不论是出血性还是缺血性，不论是“心火暴甚”还是“肝火自旺”，都是因肾的精气血衰竭所致。冯学功等［11］认为中风病的本虚为肾虚气弱。肾虚，精气不足，无力生髓充脑，造成脑髓失充，脑的生理功能得不到很好的发挥，临床上出现中风病的症状。因此，肾虚是缺血性脑卒中的主要病机。

4 实验研究

4.1 补肾生髓

髓与脑，皆精之类，精汁之清者，化而为髓，脑髓之源滥觞于肾精。《王仲奇医案》记述新安医学名家王仲奇对脑卒中的认识为人身精血充足，则脑为之满，于是耳目聪明;如果肝肾精血有亏，则脑髓宗脉弗能宁静，于是目为之眩，耳为之鸣，头为之倾，坐卧行动如坐舟车中……有上实下虚之状，而语言亦滞涩欠利，脉濡稍弦，经旨内夺而厥则为喑痱，此精气内夺尚未至于厥，然喑痱宜预防也。精髓内亏，脑力不安，作强弗强，虚阳浮动，为头脑眩晕、举步浮荡、记忆善忘、语言滞涩［12］。说明肾精化生脑髓，髓海得养，脑的生理功能才能发挥正常，精虚则髓海空虚，脑络失养，脑络中血液凝涩不畅，脑中虚火上扰，发为中风。

江爱娟等［13-15］通过一系列动物实验研究证实补肾生髓法对缺血性脑卒中的治疗作用，采用线栓法制作局灶性脑缺血再灌注动物模型，免疫荧光法检测蛋白表达的阳性总面积和平均吸收光度，结果发现补肾生髓方能通过增加缺血侧侧脑室下区Nestin、缺血半暗带区NSE数量、增强GFAP的表达，促进局灶性脑缺血后神经干细胞的增殖分化。补肾生髓方能通过促进缺血半暗带BDNF和bFGF的表达，抗脑缺血后损伤，有利于脑缺血后神经功能的恢复。补肾生髓方能通过促进皮质脑缺血半暗带GAP-43和SYP表达，有利于脑缺血后突触重塑和神经细胞轴突的再生，促进脑卒中后神经功能恢复。孟庆萍等［16］通过实验研究发现补肾生髓方能通过增强缺血侧脑组织额顶叶皮质Hes-1和Hes-5的表达，促进局灶性脑缺血后内源性神经干细胞的增殖分化。张道芹等［17］发现补肾生髓方可显著增加缺血侧脑组织额顶叶皮质Math-1和Mash-1的表达，促进局灶性脑缺血后内源性神经干细胞的增殖分化。胡建鹏等［18］通过实验研究发现补肾生髓方能通过降低缺血半暗带Notch-1、Jagged1蛋白的表达，抑制Notch信号转导通路。吕磊等［19］采用苏木精-伊红、Spoerrl染色法观察缺血半暗带形态学变化，发现补肾生髓方组缺血半暗带神经细胞变性坏死减轻，胶质细胞增生不明显，可见少量核浓缩现象，神经细胞突触阳性染色总面积较模型组显著增多，得出补肾生髓方通过减轻缺血半暗带区神经细胞突触损伤或促进神经细胞突触再生，提高中枢神经系统可塑性，抗脑缺血损伤。

4.2 补肾活血

肾虚则易瘀，肾虚多有瘀。肾为元阴、元阳之根，若肾虚阴亏，津液不足，脉络空虚，脉内有效血容量减少而血黏度增高，血流速减慢而血滞脉络。血液流速不仅与脉内血容量有关，而且与阳气的推动密切相关。若肾虚阳气不足，则温煦、推动血行的力量减弱而血流减缓，瘀滞脉络;若肾中真阳衰蝎，阳虚生内寒，寒则血凝，也将导致瘀阻脉络。可见无论是肾阴虚还是肾阳虚，都将发生因虚致瘀的病理改变。

田国庆等［20］通过实验研究发现补肾活血方具有改善缺血再灌注脑损伤小鼠学习记忆功能及减轻缺血再灌注后海马神经细胞凋亡的作用。王至婉等［21］通过实验研究发现青年和老龄大鼠脑缺血损伤与自由基损伤有关，老龄大鼠较青年大鼠严重，其机制与增龄有一定的关系。补肾活血方药可以拮抗自由基损伤，提高脑电图幅值以及血清SOD活性，降低脑含水量和脑组织MDA含量，改善NO代谢，从而对老龄大鼠脑缺血损伤有一定的保护作用。张树泉等［22］发现补肾活血化痰方组与缺血再灌注组比较，神经功能评分、脑梗死面积、缺血边缘区神经细胞的凋亡百分率及凋亡细胞数均明显减少。周清安等［23］通过实验发现益元活血方对急性脑缺血防护作用机制可能为抑制IL-6介导的脑组织损害作用，提高TGF水平，保护脑组织。赵凤玲等［24］通过实验研究得出补肾益气活血中药可以通过改善血脑屏障的功能减轻血管源性脑水肿。

4.3 补肾醒脑

缺血性脑卒中时脑组织会因缺氧产生大量的有毒物质，阻碍气机升降，清阳不升，浊阴不降，脑之清窍被蒙蔽，故会出现昏迷、不省人事等神机受损的症状，此时应在补肾的基础上加以开窍醒神的药物，以求标本兼顾。

赵清超等［25］采用线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞局灶性脑缺血再灌注模型，用免疫组化法检测脑组织IL-1β和ICAM-1的表达，发现补肾醒脑方有效部位能明显改善因缺血所致神经行为功能缺失，生物碱和苷可分别显著抑制髓质部位IL-1β蛋白表达及皮质区ICAM-1蛋白表达，提示生物碱和苷可能是补肾醒脑方抗脑缺血后炎症反应的物质基础之一。

［1］胡聪，曾祥国，王米渠.试论“肾充于脑”的物质基础［J］.长春中医学院学报，1997，13（1）：2-4.

［2］冯新玲，周安方.肾脑相关理论初探［J］.湖北中医学院学报，2006，8（3）：36-37.

［3］张俊龙.脑与五脏关系论［J］.山西中医学院学报，2002，3（2）：7-10.

［4］郭汝宝，苏云放.试论中医肾脑的升降互济关系［J］.光明中医，2008，23（7）：924-925.

［5］方庆，陈新生.神经干细胞相关研究进展［J］.中国医药指南，2011，9（8）：44-46.

［6］张进，徐志伟，史亚飞，等.基于干细胞的“脏腑之精”理论内涵研究［J］.中医杂志，2012，53（5）：364-367.

［7］蔡光先，刘柏炎.从干细胞分化研究“肾通于脑”的策略［J］.湖南中医学院学报，2004，24（1）：30-31.

［8］王康锋，张洪斌，张立娟.中医肾精理论与神经干细胞关系探讨［J］.新中医，2005，37（12）：76-77.

［9］黄建华，卞琴，沈自尹.“肾精”涵义的再分析及其意义［J］.中华中医药杂志，2012，27（3）：522-524.

［10］潘相安.中风病病因病机的探析及治疗［J］.中华中医药学刊，2007，25（1）：138-141.

［11］冯学功，刘茂才.缺血性中风恢复期补肾培元、化痰祛瘀、散风通络治法初探［J］.中医药学报，2001，29（3）：4-5.

［12］菅威，胡建鹏，王键，等.从肾精与脑髓关系谈补肾生髓法在缺血性中风恢复期治疗中作用［J］.安徽中医学院学报，2011，30（4）：3-5.

［13］江爱娟，胡建鹏，王键，等.两种中药复方对局灶性脑缺血再灌注大鼠Nestin、NSE和GFAP表达的影响［J］.北京中医药大学学报，2009，32（10）：679-682.

［14］江爱娟，胡建鹏，申国明，等.两种中药复方对脑缺血大鼠脑组织BDNF和bFGF表达的影响［J］.辽宁中医药大学学报，2009，11（7）：188-190.

［15］江爱娟，胡建鹏，王键，等.益气活血方和补肾生髓方对大鼠脑缺血恢复期GAP-43和SYP表达的影响［J］.中国中医药科技，2008，15（6）：418-419.

［16］孟庆萍，胡建鹏，王键，等.两种中药复方对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织Hes-1、Hes-5表达的动态影响［J］.安徽中医学院学报，2009，28（5）：52-55.

［17］张道芹，胡建鹏，孟庆萍，等.两种中药复方对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织Math-1、Mash-1蛋白表达的影响［J］.中国中医药科技，2010，17（4）：289-294.

［18］胡建鹏，周会，王键，等.益气活血方和补肾生髓方对局灶性脑缺血再灌注大鼠缺血半暗带Notch-1和Jagged1表达的影响［J］.中国病理生理杂志，2010，26（3）：483-486.

［19］吕磊，胡建鹏，王键，等.益气活血方与补肾生髓方对局灶性脑缺血再灌注大鼠缺血半暗带形态学影响［J］.安徽中医学院学报，2010，29（3）：39-42.

［20］田国庆，郭赛珊，卢贺起.补肾活血方对缺血再灌注脑损伤小鼠学习记忆功能及海马神经细胞凋亡的影响［J］.中国中西医结合杂志，2003，23（2）：123-127.

［21］王至婉，李建生，周清安，等.补肾活血和泻下方药及其配伍对老龄大鼠脑缺血自由基损伤的影响［J］.中国中西医结合急救杂志，2003，10（1）：22-25.

［22］张树泉，徐西元.补肾活血化痰方对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用［J］.中西医结合心脑血管病杂志，2005，3（6）：515-517.

［23］周清安，李建生，王至婉，等.补肾活血与益气活血方药对脑缺血老龄大鼠白介素-6和转化生长因子的影响［J］.中国中医急症，2005，14（6）：562-563.

［24］赵凤玲，孙佳红，张宝兰，等.补肾益气活血中药对大鼠缺血再灌注脑组织血管内皮生长因子表达和血脑屏障通透性的影响［J］.中国医药导报，2013，10（2）：20-22.

［25］赵清超，胡久略，黄显章.补肾醒脑方有效部位对脑缺血再灌注大鼠白细胞介素-1β和细胞间黏附分子-1表达的影响［J］.中国实验方剂学杂志，2010，16（15）：136-139.