利心丸质量标准的研究

王喜民 孙 文 吴 晶

（吉林省食品药品认证和培训中心，吉林 长春 130021）

利心丸质量标准的研究

王喜民 孙 文 吴 晶

（吉林省食品药品认证和培训中心，吉林 长春 130021）

目的 建立利心丸的质量控制方法。方法 用薄层色谱法对利心丸中的防己、牡丹皮进行了定性鉴别；用HPLC法对该药品中的丹皮酚含量进行了测定。结果 薄层色谱鉴别斑点清晰，分离效果好，易于观察识别；HPLC法测定牡丹皮中丹皮酚的含量的精密度与重现性良好，丹皮酚的进样量在0.102～0.510 μg范围内线性关系良好（r=0.99999），平均加样回收率为99.1%，RSD=0.8%。结论 该方法可有效控制利心丸的产品质量。

利心丸；丹皮酚；高效液相色谱法

1 薄层色谱鉴别

1.1 仪器与试药

利心丸（批号：060301、060302、060303）；对照品与对照药材均来源于中国药品生物制品检定所。

1.2 方法与结果

1.2.1 防己的鉴别

称取本品20 g，加硅藻土适量，研细，加浓氨试液1～2mL湿润，加三氯甲烷50 mL，超声处理（功率300 W，频率50 kHz）15 min，滤过，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取粉防己碱与防己诺林碱对照品，加三氯甲烷制成每1 mL各含1 mg的混合溶液，作为对照品溶液。再取除防己的全部样品成分，同法制成阴性对照溶液。用定量毛细管吸取对照品混合溶液5 μL、供试品溶液与阴性对照溶液各10 μL，分别点于同一硅胶G薄层板（规格10 cm× 10 cm，厚度0.3 mm）上，以三氯甲烷-丙酮-甲醇（6∶1∶1）为展开剂，上行展开，取出，晾干喷以稀碘化铋钾试液。结果显示：在混合对照品色谱所显斑点的位置上，供试品色谱均显相同颜色的斑点，阴性则无。见图1。

图1 防己的薄层色谱图（a、粉防己碱，b、防己诺林碱；1、2、3批号：060301、060302、060303；4、粉防己碱与防己诺林碱混合对照品；5、阴性对照）

1.2.2 牡丹皮的鉴别

称取本品20 g，加硅藻土适量，研细，加乙醚80 mL，超声处理（功率300 W，频率50 kHz）20 min，滤过，滤液蒸干，残渣加丙酮1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取丹皮酚对照品，加丙酮制成每1 mL含1 mg的溶液，作为对照品溶液。再取除牡丹皮的全部样品成分，同法制成阴性对照溶液。用定量毛细管吸取上述两种溶液各10 μL，分别点于同一硅胶G薄层板（规格10 cm×10 cm，厚度0.3 mm）上，以正己烷-乙酸乙酯（3∶1）为展开剂，上行展开，取出，晾干，喷以盐酸酸性的5%三氯化铁乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰。在对照品色谱所显斑点的位置上，供试品色谱显相同颜色的斑点，阴性则无。见图2。

图2 牡丹皮的薄层色谱鉴别（1、2、3批号：060301、060302、060303；4：丹皮酚对照品；5：阴性对照）

2 含量测定

2.1 仪器与试药

Agilent-1200型高效液相系统。丹皮酚对照品由中国药品生物制品检定所提供，批号0708-9704，供含量测定用。甲醇为优级纯，水为纯化水，其他试剂均为分析纯。

2.2 方法与结果

2.2.1 色谱条件

色谱柱：迪马C18色谱柱（DiamnosilTMC18，250 mm×4.6 mm，5 μm）；甲醇-水（70∶30）为流动相；检测波长为274 nm。理论板数按丹皮酚峰计算应不低于3000。

2.2.2 对照品溶液的制备

精密称取丹皮酚对照品适量，加甲醇制成每1 mL含20 μg的溶液，即得。

2.2.3 供试品溶液的制备

取本品水蜜丸，研细，或取重量差异项下的大蜜丸，剪碎，取约1.5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50 mL，称定重量，室温放置30 min，超声处理（功率300 W，频率50 kHz）30 min，取出，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.2.4 阴性对照溶液的制备

取按处方比例制成的除去牡丹皮的阴性样品，按供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。

2.2.5 系统适用性试验

分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液与阴性对照溶液各10 µL，注入高效液相色谱仪，记录色谱图。结果阴性对照溶液在丹皮酚峰保留时间处无色谱峰，即处方中其他组分对测定无干扰。丹皮酚峰与其他组分峰基线分离，符合要求；对照品溶液与供试品溶液主峰的保留时间一致，理论板数板数按丹皮酚峰计算不低于3000。

2.2.6 线性关系考察

精密称取丹皮酚对照品20.38 mg，置50 mL量瓶中，加甲醇溶解并加该溶剂稀释至刻度，摇匀，精密量取5 mL，置100 mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，精密量取5 μL、10 μL、15 μL、20 μL、25 μL，分别注入液相色谱仪，以进样量（μg）为横坐标（X），峰面积积分值为纵坐标（Y）绘制标准曲线，得回归方程为Y=5103.6948X+0.3757（r=0.99999），表明进样量在0.102～0.510 μg范围内，与峰面积呈良好的线性关系。

2.2.7 精密度试验

取本品（批号060301），照正文方法，连续进样5次，每次10 μL，计算5个峰面积的RSD为0.8%，表明该方法的精密度较好。结果表明精密度良好。

2.2.8 重复性试验

取本品（批号060301），照供试品溶液的制备方法，独立测定6份，丹皮酚含量的RSD为0.9%，表明该方法重复性较好。

2.2.9 稳定性试验

取同一供试品（批号：060301）溶液，在制备后的0 h、30 h、48 h、72 h，分别测得峰面积，4个时间点测得峰面积的RSD为0.2%，表明在72 h内稳定。

2.2.10 回收率试验

精密称取已知含量的本品（批号：060303，含丹皮酚0.63 mg/g）细粉约0.75 g，6份做基底，再分别精密加入丹皮酚对照品溶液（0.02166 mg/mL）10 mL、11 mL、12 mL各2份，制成供试品溶液，测定丹皮酚的含量，计算回收率，得平均回收率为99.1%，RSD为0.8%，该方法的准确度较好。

2.2.11 样品测定结果及限度

三批样品中丹皮酚含量测定结果分别为0.64、0.63、0.63 mg/g。综合考虑牡丹皮药材质量标准[1]中含量的限度，药材产地等的质量不确定性及生产工艺的波动性因素，将本品的含量限度定为每1 g含牡丹皮以丹皮酚（C9H10O3）计，不得少于0.40 mg。

[1] 国家药典委员会.中国药典(一部)[S].2005年版.北京:北京化学工业出版社,2005:119.

R9

B

1671-8194（2014）18-0088-02