呼吸及消化系统疾病黄腻苔微生态学与舌苔脱落细胞凋亡指数的比较

吴 凡，董昌武，周雪梅

（安徽中医药大学中医临床学院，合肥 230038）

呼吸及消化系统疾病黄腻苔微生态学与舌苔脱落细胞凋亡指数的比较

吴 凡，董昌武*，周雪梅

（安徽中医药大学中医临床学院，合肥 230038）

目的 观察呼吸系统和消化系统疾病患者的黄腻苔，并比较这两种系统疾病的黄腻苔在微生态学和细胞凋亡指数上的异同。方法 根据中医舌诊诊断标准选择呼吸系统和消化系统疾病具有黄腻苔舌象的患者各20例为实验组，15例健康者正常舌象为对照组，均刮取舌苔，观察舌苔的微生态指标及舌上皮细胞凋亡指数。结果 实验组细菌总数高于对照组，细胞凋亡指数低于对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论黄腻苔是湿热证疾病在舌面上病位病机直观的病理反应，其与疾病的种类无必然性联系，黄腻苔的形成可能与舌的微生态和舌苔脱落细胞凋亡有关。

呼吸系统;消化系统;黄腻苔;微生态学;细胞凋亡

舌象的观察是中医诊断疾病的重要手段，其中黄腻苔是湿热证的主要表现，也是中医临床辨证的重要依据之一。有文献报道［1-2］湿热证患者存在舌上皮细胞凋亡和舌苔微生态的改变。笔者以呼吸系统与消化系统疾病患者所致的黄腻苔为研究对象，检测分析黄腻苔的微生态学和舌苔脱落细胞凋亡指数，并与正常人舌苔进行比较，分析其相关性和可能的机制。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择40例来自安徽中医药大学第一附属医院消化内科和呼吸内科舌苔为黄腻苔的患者，消化内科男8例，女12例，呼吸内科男11例，女9例，年龄25～62岁;15例正常健康人的舌苔为对照组，男8例，女7例，年龄20～55岁，3组在年龄、性别等方面比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。所有研究对象近期均无口腔疾患和吸烟史。

1.2 观察舌象 由3位有经验的老中医根据中医舌诊诊断标准观察舌象，黄腻苔为实验组，消化系统组和呼吸系统组各20例，淡红舌，薄白苔为正常组，共15例。

1.3 标本采集 标本采集在上午9:00—11:00时进行，让受检者使用凉开水漱口1～2次，后用生理盐水漱口2次，用消毒纱布固定好受检者舌尖，以中等力度用塑料小勺刮取舌中部舌苔2～3次，刮取物用消毒棉签蘸取部分，涂抹于玻片上行微生态检测，剩余部分用生理盐水冲洗收集成约30 mL的悬液进行细胞凋亡指数检测。

1.4 检测方法

1.4.1 舌苔微生态检测 玻片经革兰氏染色后，光学显微镜下观察，查找大于50个油镜视野，细菌总数按每视野 10，102，103，104，105，106记录，取平均值。

1.4.2 舌苔上皮细胞凋亡指数检测 舌苔悬液低温离心（4℃，3 000 r/min），取沉淀做细胞涂片，晾干后4%多聚甲醛固定1 h，1%曲拉通破膜（4℃，10 min）;加入TUNEL液（37℃，1 h），以上各步骤间均用PBS冲洗3次，然后POD 37℃作用30 min，显色（DAB），苏木精轻度复染，封片，镜检。光镜下（×200）观察正常及凋亡阳性细胞，4个视野下观察500个细胞，计算每100个细胞中的阳性细胞数，即为凋亡指数。

1.5 统计学方法 统计学分析应用SPSS 11.0软件，计量资料用均数±标准差（±s）表示，经方差齐性检验和正态性检验，组间比较用方差分析和t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组舌上皮细胞凋亡指数的变化比较 消化组、呼吸组与正常组比较，舌苔脱落细胞凋亡指数有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 各组舌上皮细胞凋亡指数的变化比较（±s）

表1 各组舌上皮细胞凋亡指数的变化比较（±s）

注:与正常组比较，#P＜0.05

组 别 例数 细胞凋亡指数消化组 20 6.936 5±5.339 7#呼吸组 20 6.038 2±5.276 6#正常组 15 12.668 9±11.334 3

2.2 各组舌苔细菌总数的变化比较 消化组、呼吸组与正常组比较，舌苔细菌总数有统计学意义（P＜0.05），见表2。3 讨论

表2 各组舌苔细菌总数的变化比较（±s）

表2 各组舌苔细菌总数的变化比较（±s）

注:与正常组比较，#P＜0.05

组 别 例数 细菌总数lg（10n±s）消化组 20 4.84±1.06#呼吸组 20 4.62±1.04#正常组 15 3.87±1.23

舌背黏膜表面上丝状乳头的角化树、外形、排列、增生或萎缩等决定了舌苔类型和变化［3］。实验研究表明，黄腻苔形成主要是由于发热、感染等原因致机体脱水，丝状乳头延长，舌自洁作用减弱，局部的炎症渗出等作用所导致。舌苔厚度与舌苔脱落细胞的增殖、分化及凋亡之间的平衡密切相关［4］。舌苔脱落细胞的理化指标也与舌苔的形成有一定联系，陈宇等［5］通过研究表明，舌苔脱落细胞中的乳酸脱氢酶（LDH）、酸性磷酸酶（ACP）、琥珀酸脱氢酶（SDH）的活性与不同舌象的形成存在一定的联系。舌表面菌群失调也是影响舌苔变化的重要因素，口腔内温暖潮湿而营养丰富的环境有利于微生物的定植和生长，微生物群的竞争和拮抗也影响舌苔的变化。梁文娜等［6］研究表明，舌表面微生态熵变是调控舌象变化的关键因素。朱莲娜等［7］通过微生态学涂片检查方法发现湿热证黄腻苔细菌总数及种类明显多于薄白苔正常组。舌苔脱落细胞与微生态在证候形成过程中也存在联系，李灿东等［8］通过研究表明，慢性胃炎脾胃虚实证候舌苔脱落细胞与胃幽门螺旋杆菌感染具有相关性。

中医学认为，舌苔为脾胃蒸腾水谷之气聚于舌面之上而形成。脾胃功能强健，水谷代谢正常，气血调和，病邪难以滋生，则口腔内的微生态环境稳定;脾胃功能正常，舌上皮不断更新代谢，丝状乳头角化层更新及时，即可形成薄白苔; 湿热之邪侵袭脾胃，脾胃功能降低，水谷不能运化，气血不能上荣于舌，舌上皮细胞营养汲取障碍，细胞异常凋亡，丝状乳头不能正常角化脱屑，附着于舌面形成黄腻苔。本研究发现:黄腻苔与薄白苔比较，凋亡程度明显降低，细菌数目明显增多，不同病种之间黄腻苔的细菌总数及凋亡指数比较无统计学意义。可以认为，黄腻苔是湿热证病理变化的重要体现，与舌上皮细胞的凋亡及细菌的滋生关系密切，与疾病的种类并无确切关系。而舌苔上皮细胞凋亡减少和舌苔上细菌增生可能是黄腻苔舌象形成的重要基础。

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［1］吕军影，黄李平，阙铁生，等.湿热证患者舌苔微生态的研究［J］.辽宁中医杂志，2008，35（4）:487-488.

［2］吕军影，黄李平，阙铁生，等.湿热证患者舌苔舌上皮细胞凋亡的研究［J］.辽宁中医杂志，2007，34（12）:1677-1678.

［3］陈群，徐志伟，武哲丽，等.舌苔脱落细胞学在中医辨证分型中的应用规律探讨［J］.中医杂志，2005，46（5）:377-379.

［4］吴正治，李明，张咏梅，等.常见舌苔舌上皮细胞凋亡及其相关基因表达研究［J］.中国医药学报，2004，19（2）:98-100.

［5］陈宇，任健，刘家义.120例慢性胃炎患者舌苔脱落细胞理化指标与中医辨证相关性研究［J］.长春中医药大学学报，2008，24（3）:273-274.

［6］梁文娜，李灿东，甘慧娟，等.舌表面微生态熵变影响舌苔变化的机制探讨［J］.中华中医药杂志，2013，28（2）:477-479.

［7］朱莲娜，黄李平，吕军影，等.微生态学方法在湿热证舌苔微生物群研究中的应用［J］.广西医学，2009，31（4）:480-482.

［8］李灿东，兰启防，赵永洲，等.慢性胃炎舌印片与证候及幽门螺杆菌的相关性研究［J］.福建中医学院学报，2002，12（4）:8-10.

Comparative study on micro-ecology and tongue epithelial cell apoptosis index of yellow greasy tongue fur induced by respiratory and digestive system diseases

WU Fan，DONG Changwu*，ZHOU Xuemei
（Clinical College，Anhui University of Chinese Medicine，Hefei 200038，China）

ObjectiveTo observe the yellow greasy tongue fur of patients with respiratory disease and digestive disease，and compare the micro-ecology and epithelial cell apoptosis index of yellow greasy tongue fur between patients with respiratory disease and those with digestive disease.MethodsAccording to the diagnostic criteria of TCM tongue inspection，40 patients with yellow greasy tongue fur induced by respiratory disease and digestive disease were divided equally into two experimental groups，with 15 healthy volunteers in the control group.Tongue furs of patients in these three groups were scraped and micro-ecology and tongue epithelial cell apoptosis index of tongue fur were observed and studied.ResultsThe total bacterial count of tongue fur in the experimental groups was higher than that in the control group，The tongue epithelial cellapoptosis index in the experimental groups was lower than that in the control group，with significant differences between the experimental groups and the control group（P ＜0.05）.Conclusions Yellow greasy tongue fur is an intuitive pathological reaction of the damp-heat syndrome on the surface of the tongue，but there is no necessary connection between yellow greasy tongue fur and the category of diseases.The formation of yellow greasy tongue fur may be related to micro-ecology of the tongue and apoptosis of tongue epithelial cell.

respiratory system;digestive system;yellow greasy tongue fur;micro-ecology;apoptosis

R241.25

A

2095－6258（2014）05－0874－02

10.13463/j.cnki.cczyy.2014.05.043

安徽中医药大学青年基金（2013qn001）。

吴 凡（1987－），硕士，实验员。研究方向:中医诊法研究。

董昌武，硕士研究生导师，电话:0551-65119271。

2014－04－09）