马齿苋提取物对湿疹大鼠皮肤炎症肿胀度影响的研究

葛一漫 胡一梅 吴心语 谢国丽 张灵玲

成都中医药大学临床医学院/附属医院，四川 成都 610075

湿疹是一种由各种内外因素引起的过敏性炎症性皮肤病，临床上皮肤损害以丘疹水疱、渗出、糜烂为主，呈多形性改变，易反复发病。其组织学特征为表皮细胞间水肿，伴有不同程度的棘层肥厚及浅表血管周围淋巴组织细胞浸润[1]。患者多自觉皮肤瘙痒，睡眠紊乱，严重影响了患者的生活质量。湿疹这类变态反应性疾病目前治疗的主要药物为糖皮质激素及抗组胺药，需长期用药，不良反应较大。近年来，大量研究表明中医外治法对湿疹具有相当重要的作用，其疗效确切，不良反应少，受到皮肤科医生的重视。

马齿苋含有大量维生素、多糖、脂肪酸、去甲肾上腺素、多巴胺、生物碱等多种活性成分[2-4]，具有降血脂、降血糖、抗衰老、消炎抑菌、增强免疫等多种保健功能和疾病治疗作用[5]，主要用于治疗湿疹、瘙痒症等风热、湿热之皮肤病等病症，具有较好的临床疗效。被国家卫生部认定为药食同源的保健功能食品之一，具有广阔的开发前景。本实验主要探讨马齿苋提取物对湿疹大鼠皮肤炎症的影响，并观察皮肤的肿胀度改变。

1 材料与方法

1.1 实验动物SD大鼠，SPF级，♂，体重180～220g，由成都达硕生物科技有限公司提供，实验动物合格证号:SCXK(111)2008-24。

1.2 受试药物

1.2.1 马齿苋提取液 将500g新鲜马齿苋放于榨汁机内榨取300～350ml新鲜马齿苋粗汁，用无菌纱布5层过滤，获得浅红色马齿苋提取液，再根据实验要求配置提取不同浓度溶液，盛放在消毒处理的玻璃瓶内，置于低温0～5℃保存。

1.2.2 阳性药 复方黄柏液，山东汉方制药有限公司生产，生产批号:Z10950097。

1.3 试剂 2，4-二硝基氯苯 (DNCB)，成都科龙化工试剂厂生产，批号:20090813。

1.4 仪器电子天平，BS-600L，上海友声衡器有限公司生产;6mm金属打孔器，广州正宏医疗器械设备有限公司生产。

1.5 统计方法 用SPSS17.0软件进行统计分析。检测数据用均数±标准差 (±s)表示。多组之间的比较采用方差分析，P＜0.05为差异具有统计学意义。

1.6 方法

1.6.1 实验分组及造模 SD大鼠50只，按体重随机分为5个组，每组10只，分别为模型对照组，阳性对照组，马齿苋提取物高、中、低剂量组。用电推剪及电剃须刀去除大鼠腹部毛发，面积约2 cm×3 cm，并涂5%的2，4-二硝基氯苯 (DNCB)30μl于皮肤首次致敏;第5d，在右背部2cm×2cm剃毛区涂0.2%DNCB50μl进行二次抗原攻击，左背部对称的剃毛区不用药物作为对照部位。以后每隔3d激发1次，连续3次。于第9d观察大鼠右背部较左背部明显出现红斑，水肿，丘疹，糜烂或渗出，表明造模成功。

1.6.2 实验给药 于实验第10d开始，模型对照组大鼠致敏皮肤涂布无菌蒸馏水;马齿苋提取物低、中、高剂量组分别按照0.008mg/kg、0.016mg/kg、0.032mg/kg给药。同时，阳性对照组给予复方黄柏液2ml。按组别、剂量给药，每隔1小时给药1次，6次/d，连续10d。

1.6.3 实验取材 造模后第21d，断颈处死动物，使用无菌手术剪将大鼠后背部右侧皮炎区皮肤及对称的左侧健康皮肤分别剪下，用直径6 mm圆形打孔器分别打下相同面积的皮肤，用分析天平称重。

1.6.4 观察指标 观察并按下式计算皮肤肿胀度及抑制率:

皮肤肿胀度=炎症皮肤重量-健康皮肤重量，

抑制率%=(模型对照组肿胀度-药物组肿胀度)/模型对照组肿胀度×100%。

2 结果

与模型对照组相比，马齿苋高、中剂量组小鼠皮肤肿胀度明显减轻，差异有统计学意义 (P＜0.05)，与阳性对照组比较，马齿苋高剂量组小鼠皮肤肿胀度明显减轻，差异有统计学意义 (P＜0.05)。结果见表1。

表1 马齿苋提取液对2，4-二硝基氯苯致小鼠皮肤肿胀度的影响 (±s)

表1 马齿苋提取液对2，4-二硝基氯苯致小鼠皮肤肿胀度的影响 (±s)

注:各组与模型对照组比较，*P＜0.05;＊＊P＜0.01。与阳性对照组比较，△P ＜0.05

组别 动物数 (N) 肿胀度 (mg) 平均抑制率 (%)12.79 -阳性对照组 10 21.1 士1.58* 36.64马齿苋高剂量组 10 15.60士5.47＊＊△ 53.15马齿苋中剂量组 10 19.80 土 6.74* 40.54马齿苋低剂量组 10 28.50士模型对照组 10 33.30 士700 14.41

3 讨论

湿疹的发病与IV型超敏反应有关。IV型超敏反应又称迟发型超敏反应 (DTH)，是效应T细胞与特异性抗原结合后，引起的炎症反应。肿胀的形成是通过肥大细胞释放组胺，导致细胞间形成裂隙，使皮肤、粘膜毛细血管扩张及毛细血管壁通透性增高，从而在患处产生红斑、水肿和风团等肿胀现象[6]。同时，患者感到剧烈瘙痒，局部进行搔抓后，还会导致局部毛细血管破裂以及细菌感染，加重皮损局部肿胀。

本实验中，与模型对照组相比，马齿苋高、中剂量组小鼠皮肤肿胀度明显减轻 (P＜0.05)。与阳性对照组比较，高剂量组大鼠皮肤肿胀度亦明显减轻 (P＜0.05)。结果提示，经马齿苋提取液治疗后，大鼠的肿胀度显著改善，大鼠的丘疹、水肿、风团等皮肤损坏也明显减轻，其疗效优于复方黄柏液。因此，认为马齿苋提取液对实验性湿疹模型有明显的改善作用，值得迸一步深入研究。

据研究文献表明，马齿苋水提取物对二甲苯及巴豆油所致小鼠耳廓肿胀有显著的缓解作用，主要是由于其全草对金黄色葡萄球菌、链球菌、白色念珠菌及真菌具有明显的抑制作用。陆霄鹤等[7]发现，20g/kg马齿苋水提取物可抑制巴豆油所致小鼠耳廓肿胀，提示马齿苋水提取物可有效抑制二甲苯及巴豆油所致小鼠耳廓肿胀。Teixeira等[8]的研究结果表明，马齿苋中的黄酮对于角叉菜胶诱发的大鼠足爪水肿有明显抑制作用。综上所述，进一步说明马齿苋可以改善机体的炎症反应，具抗炎作用，进而对湿疹具有一定的治疗作用。

[1]谢富军，何栋，蔡飞，等.湿疹的研究现状[J].按摩与康复医学，2011，2(11)

[2]谭丽霞，周求良，尹建国，等.马齿苋的营养成分分析及其开发利用[J].中国野生植物资源，2000，19(2):49-50.

[3]孙健.马齿苋的化学成分研究[D].长春:吉林大学，2003.

[4]牛广财，朱丹.马齿苋化学成分及其药理作用研究进展[J].安徽农业科学，2005，33(6):1090—1092.

[5]翟玮玮，顾立众.马齿苋功能因子及保健食品的开发[J].食品科技，2003，2:20.

[6]徐拯，周江睿，孙学军.氢生理盐水对小鼠足肿胀的抗炎效应.现代生物医学进展，2010，10(23):4421-4423.

[7]陆霄鹤，李曦.马齿苋及鱼腥草水提取液体外抑菌实验[J].抗感染药学，2010，7(1):33-34.

[8]Teixeira MC，Carvalho IS，Brodelius M.Omega-3 fatty acid desaturase genes isolated from purslane(Portulaca oleracea L.):expression in different tissues and response to cold and wound stress.J Agric Food Chem，2010，58(3):1870-1877.