壮族鼻咽癌患者EB病毒抗体与年龄的关系

李晓华 蒙以良 赵丽娟 漆光紫 黄承乐 黄钜略

(右江民族医学院微生物学与免疫学教研室，广西 百色 533000)

鼻咽癌(NPC)具有地区聚集性，在我国南方，比如广西、广东、湖南等省份是NPC的高发区。广西属壮族自治区，而位于西南部的百色地区居住大量的壮族同胞，很少有学者研究壮族NPC患者EB病毒(EBV)抗体水平与NPC之间的关系。EBV是NPCⅠ类致癌原，参与NPC的发生与发展，检测EBV相关抗体EBNA1/IgA，EA/IgG，EA/IgA是筛查和辅助诊断常用的方法。有学者认为〔1〕正常人群中EBNA1/IgA抗体的血清水平存在年龄上的差异，但波动在一定范围内。在NPC的临床诊断和高危人群筛查中有必要根据具体的人群界定不同的阳性临界值。为了解本地区壮族NPC患者BNA1/IgA、EA/IgG及EA/IgA抗体水平，观察它们在不同年龄段的分布及其阳性率，并与正常人进行比较，本文就广西地区壮族患者3种抗体水平和阳性率与不同年龄之间的关系进行探索研究。

1 材料与方法

1.1 一般资料 收集2009年6月至2012年6月在广西百色市人民医院肿瘤科住院的未经治疗但已经病理检查确诊的NPC患者140例，女44例，男96例，年龄20～73岁，中位年龄为(47.5±12.8)岁。对照组为同期的健康体检者280例(包括80例患有鼻出血、耳鸣等NPC疑似症状，经确诊为非NPC患者)，男188例，女92例，年龄20～70岁，中位年龄(43±5.6)岁。抽取待检者5 ml肘静脉血，离心收集血清置于-70℃冰箱冷冻保存待检。

1.2 抗体检测方法 EBNA1/IgA抗体检测试剂盒购自中山生物工程有限公司;EA/IgG、EA/IgA抗体检测试剂盒购自德国欧蒙医学实验诊断股份公司;均采用ELISA法检测，具体操作过程按产品说明书进行。血清稀释度分别为1∶10和1∶20，结果参照Cheng等〔2〕以相对A值(rA值)表示。

1.3 结果判断 EA/IgA、EA/IgG抗体的诊断界值参照说明书。按以下的公式计算对照血清或患者抗原吸光度值的比值，通过比例判断结果:比值=对照血清或患者抗原吸光度值/标准品的吸光度值。当比值＜0.8为阴性;≥0.8且＜1.1为可疑;≥1.1为阳性。EBNA1/IgA抗体的诊断界值参照说明书:临界值≥(0.5+正常对照均值)为阳性;临界值＜(0.5+正常对照均值)为阴性。

1.4 统计学处理 应用SPSS17.0软件。计量资料经正态性检验，如果资料呈正态分布且方差齐，采用s进行描述性统计，样本均数比较采用t检验，多样本均数比较采用方差分析，两两比较采用q检验。如果资料呈偏态分布，采用M(Q)进行描述性统计，两组中位数比较采用Mann-Whitney检验，多组中位数比较采用Kruskal-Wallis检验，两两比较采用扩展t检验。计数资料采用χ2检验或确切概率法，其中两两比较采用调整检验水准法。

2 结果

2.1 NPC患者与对照组3种抗体水平及阳性率比较 各组数据经正态性检验，均属非正态分布(P＜0.05)。NPC患者3种EBV抗体水平和阳性率与健康人对比的关系见表1，表2。NPC患者的EA/IgG、EA/IgA、EBNA1/IgA抗体rA值均高于健康人(P＜0.05)。2.2 不同年龄段NPC患者与对照组3种抗体水平比较 20～29岁年龄段的病人与健康人EA/IgG、EA/IgA、EBNA1/IgA抗体rA值的比较，差异均有统计学意义(Z=3.586;P＜0.001;Z=3.588;P＜0.001;Z=2.576;P＜0.001)，病人的 EA/IgG、EA/IgA、EBNA1/IgA抗体rA值均高于健康人。30～39岁年龄段的病人与健康人EA/IgG、EA/IgA、EBNA1/IgA抗体rA值的比较，差异均有统计学意义(Z=5.157;P＜0.001;Z=5.005;P＜0.001;Z=3.783;P＜0.001)，病人的 EA/IgG、EA/IgA、EBNA1/IgA抗体rA值均高于健康人。40～49岁年龄段的病人与健康人EA/IgG、EA/IgA、EBNA1/IgA抗体rA值的比较，差异均有统计学意义(Z=4.163;P＜0.001;Z=4.521;P＜0.001;Z=3.308;P=0.001)，病人的 EA/IgG、EA/IgA、EBNA1/IgA 抗体 rA 值均高于健康人。50～73岁年龄段的病人与健康人EA/IgG、EA/IgA、EBNA1/IgA抗体rA值的比较，差异均有统计学意义(Z=3.916;P＜0.001;Z=2.737;P=0.001;Z=2.079;P=0.038)，病人的EA/IgG、EA/IgA、EBNA1/IgA抗体rA值均高于健康人。见表3。

表1 NPC患者与对照组3种抗体水平比较〔M(Q)〕

表2 NPC患者与对照组3种抗体阳性率的比较〔n(%)〕

表3 不同年龄段血清3种抗体水平NPC患者与健康人的比较〔M(Q)〕

2.3 不同年龄段NPC患者与对照组3种抗体阳性率比较20～29岁年龄段的病人与健康人EA/IgA抗体阳性率的比较，差异有统计学意义(P=0.001)，病人的EA/IgA抗体阳性率高于健康人。30～39岁年龄段的病人与健康人EA/IgG、EA/IgA抗体阳性率的比较，差异均有统计学意义(P＜0.001)，病人的EA/IgG、EA/IgA抗体阳性率均高于健康人。40～49岁年龄段的病人与健康人EA/IgG、EA/IgA抗体阳性率的比较，差异均有统计学意义(P＜0.001)，病人的EA/IgG、EA/IgA抗体阳性率均高于健康人。

50～73岁年龄段的病人与健康人各抗体阳性率的比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。见表4。

表4 不同年龄段血清中3种抗体阳性率NPC患者与健康人的比较〔n(%)〕

3 讨论

EBV与NPC的发生和发展密切相关，EBV血清学检测通常用于NPC的诊断以及高危人群的筛查〔3〕。EBV核抗原EBNA为DNA结合蛋白，在感染的细胞核内，出现于感染的晚期。EBNA-1具有抑制细胞处理和提呈抗原的功能，维持EBV基因存在感染细胞中。EBV早期蛋白(EA)提示EBV活跃增殖，是细胞进入溶解周期的信号，出现于感染的早期。

本研究中，NPC患者 EA/IgG、EA/IgA、EBNA1/IgA抗体rA值及EA/IgG、EA/IgA、EBNA1/IgA抗体阳性率均高于健康人，在50岁以后的年龄段病人与健康人EA/IgG、EA/IgA、EBNA1/IgA抗体阳性率无显著差异。刘岩等〔4〕对罗城3 060例患者(仫佬族1 497例、毛南族963例、汉族仅600例)研究发现不同年龄段的EBNA1-IgA的阳性率差异有统计学意义，介于50～59岁之间的年龄段EBNA1-IgA的阳性率较其他年龄段的阳性率明显升高，中老年人EBV感染率较高。3个民族之间各年龄段的EBNA1-IgA抗体的校正相对吸光度(ArA)差异无统计学意义。刘岩采用的是不同年龄段之间的两两比较，而本研究采用的是病人与健康人之间的比较，统计的方法不同，而且少数民族占的比例较大。而本研究结果是50岁以后的年龄段病人与健康人EA/IgG、EA/IgA、EBNA1/IgA抗体rA值比较有显著差异，但阳性率均无显著差异，说明50岁以后的中老年人可能由于机体免疫力下降，即使同样感染EBV但抗体的水平会有所不同，提示对于不同年龄段的人群可能应选择不同的诊断界值，才能提高患者的诊断率。提高老年鼻咽癌治疗效果的关键是早期诊断、早期治疗〔5〕。本研究结果提示EBNA1/IgA抗体的诊断界值可能并不适合用于桂西地区壮族患者NPC的诊断。各年龄段健康人与病人EA/IgG、EA/IgA抗体水平和阳性率的比较之前未见相关的报道。

1 程敏婷，程伟民，季明芳.ELISA法检测中国中山市正常人及鼻咽癌患者血清EB病毒抗体水平〔J〕.第一军医大学学报，2002;22(9):817-22.

2 Cheng WM，Chan KH，Chen HL，et al.Assessing the risk of nasopharyngeal carcinoma on the basis of EBV antibody spectrum〔J〕.Int J Cancer，2002;97(4):489-92.

3 吴文翰，陈国雄，吴子柏，等.早期发现和筛选鼻咽癌的EB病毒血清学检测〔J〕.癌症，2006;25(2):250-6.

4 刘 岩，胡春卉，尹瑞兴，等.广西罗城县少数民族和汉族人群血清EB病毒感染情况分析〔J〕.重庆医学，2012;41(14):1404-6.

5 谢文佳，杨智宁，林志雄.老年鼻咽癌患者临床特征及预后因素〔J〕.中国老年学杂志，2012;32(17):3642-4.