GPC3和AFP联合检测对原发性肝癌的诊断价值

王延峰,李南阳,任雅玲,薛秀斌,李林臣,曹蕾春,贾儒渊,于小平

(张家口市第一医院,河北 张家口075000)

GPC3和AFP联合检测对原发性肝癌的诊断价值

王延峰*,李南阳,任雅玲,薛秀斌,李林臣,曹蕾春,贾儒渊,于小平

(张家口市第一医院,河北 张家口075000)

(ChinJLabDiagn,2015,19:0366)

原发性肝癌(primary hepatic carcinoma，PHC)的发病率位居全部恶性肿瘤的第5位，在每年新增的PHC病例中有超过一半是发生在中国[1]。外科切除仍然是目前针对PHC的首选治疗手段[2]，如果错过手术治疗时机，则患者的预后情况极差，五年生存率极低。因此，提高PHC的早期诊断率是决定其治疗效果的关键环节。AFP辅助诊断PHC的效率并不理想，其敏感度和特异度都难以达到临床要求[3]，本研究通过对磷脂酰肌醇蛋白多糖-3(glypican-3，GPC3)和AFP联合检测对PHC的诊断价值进行了观察和分析，现将研究的具体情况报告如下。

1材料和方法

1.1研究材料

选取2005年6月至2013年6月在我院接受手术治疗的PHC患者60例、肝硬化患者70例和其它原因致肝破裂患者50例作为研究对象，纳入患者均经B超、CT和术后病理检查予以确诊。纳入的PHC患者均为初发且均未经过化疗，其中，男性患者49例，女性患者11例，年龄跨度为35至68岁，平均年龄为(50.8±7.8)岁。病理检查显示，51例为肝细胞癌，9例为胆管细胞癌；单发肿瘤患者为40例，多发肿瘤患者为20例。TNM分期方面：3例患者为Ⅰ期，28例患者为Ⅱ期，16例患者为Ⅲ期，13例患者为Ⅳ期；Edmondson-Steiner分级方面：6例患者为Ⅰ级，35例患者为Ⅱ级，12例患者为Ⅲ级，7例患者为Ⅳ级。在纳入的肝硬化中，男性患者为58例，女性患者为12例，年龄跨度为39至58岁，平均年龄为(46.5±4.2)岁。在纳入的肝破裂患者中，男性患者为41例，女性患者为9例，年龄跨度为26至45岁，平均年龄为(37.2±4.6)岁，均经病理检查确认为非肝癌、非肝硬化患者。

1.2观察指标

应用ELISA法对以上各类患者的血清GPC3和AFP水平进行检测，应用免疫组织化学SP法对PHC患者切除肝组织标本中的GPC3表达情况进行检测(试剂盒均购自武汉博士德生物公司)，血清标本为各组患者的清晨空腹静脉血，以GPC3>120 ng/ml和AFP>8.5 ng/ml为阳性，切除肝组织标本均经中性甲醛固定并以常规石蜡包埋，以4 μm厚连续切片，检测操作步骤严格按照试剂盒使用说明书操作，以平均吸光度值(A值)代表染色强度和观察指标的相对浓度。

1.3统计学处理方法

所有数据均应用EXCEL建立数据库并应用SPSS13.0统计软件包进行统计学分析，计量资料应用方差分析或t检验进行处理，计数资料应用卡方检验进行处理，以P<0.05为差异有显著性。

2结果

2.1各类患者血清GPC3水平的比较

经检测，肝破裂患者的血清GPC3水平显著低于肝硬化患者(P<0.05)，肝硬化患者的血清GPC3水平显著低于PHC患者(P<0.05)，具体结果见表1。

2.2血清GPC3和AFP联合检测诊断PHC分析

应用血清GPC3和AFP联合检测诊断PHC的敏感度为90%，显著高于单独应用血清GPC3检测或血清AFP检测(P<0.05)，而应用血清GPC3和AFP联合检测与单独应用血清GPC3检测或血清AFP检测的特异度的差异无显著性(P>0.05)，具体结果见表2。

表1　各类患者血清GPC3水平的比较

注：与肝破裂比较，①P<0.05；与肝硬化比较，②P<0.05

表2　血清GPC3和AFP联合检测诊断PHC的价值分析

注：与GPC3比较，①P<0.05；与AFP比较，②P<0.05

2.3GPC3在PHC患者肝组织标本中的表达及相关因素分析

PHC患者的肿瘤组织、癌旁组织及正常组织中的GPC3表达水平(A值)分别为(0.162±0.037)、(0.126±0.025)和(0.063±0.012)，肿瘤组织的GPC3表达水平显著高于癌旁组织(P<0.05)，癌旁组织的GPC3表达水平显著高于正常组织(P<0.05)。PHC患者肝组织GPC3表达水平与PHC患者临床指标的相关性分析结果显示，具有不同Edmondson病理分级或TNM临床分期的PHC患者的肝组织GPC3表达水平的差异有显著性(P<0.05)，具体结果见表3。

3讨论

有研究显示，PHC是目前世界上死亡率最高的恶性肿瘤，患者在临床确诊后的五年生存率低于12%，出现这一现象的原因主要是因为大多数患者在就诊时已发病到中晚期，错过了最佳的手术治疗时机。所以，提高PHC的早期诊断率是提升PHC治疗效果、改善患者预后的重要保障[4]。研究发现AFP诊断PHC发病的敏感度仅为30%至60%，特异度一般不足80%，特别是对于早期PHC的检出率更低。GPC3是一种表达于细胞膜表面的硫酸乙酰肝素糖蛋白。GPC3不在正常人的肝组织中表达，而在PHC患者的肝组织中却呈现高表达状态，也被很多学者认为是在AFP阴性肝癌患者的肝组织中表达率最高的标志物[5]，随着学术界对GPC3研究的不断深入，很多研究者发现，GPC3不仅在肝细胞癌组织中呈现高表达，而且在患者血清中的水平也出现了大幅度的上升，故学者们认为GPC3在PHC的早期诊断中具有极高的临床应用价值[6]。很多研究证实，GPC3在小肝癌和AF阴性肝癌的早期诊断中具有较高的效率，而且当将其与其它肿瘤标志物进行联合检测时，诊断效能会得到大幅度的提升[7]。本研究结果显示，肝破裂患者的血清GPC3水平显著低于肝硬化患者(P<0.05)，肝硬化患者的血清GPC3水平显著低于PHC患者(P<0.05)，说明血清GPC3水平的显著上升可作为PHC发病的提示指标；应用血清GPC3和AFP联合检测诊断PHC的敏感度为90%，显著高于单独应用血清GPC3检测或血清AFP检测(P<0.05)，而应用血清GPC3和AFP联合检测与单独应用血清GPC3检测或血清AFP检测的特异度的差异无显著性(P>0.05)，说明应用血清GPC3和AFP水平联合检测可提高诊断PHC的敏感度，同时对诊断的特异度无显著影响；肿瘤组织的GPC3表达水平显著高于癌旁组织(P<0.05)，癌旁组织的GPC3表达水平显著高于正常组织(P<0.05)，具有不同Edmondson病理分级或TNM临床分期的PHC患者的肝组织GPC3表达水平的差异有显著性(P<0.05)，说明GPC3在PHC患者的肿瘤组织中呈现高表达状态，其表达水平可能与患者病情的进展具有相关性。

表3　GPC3在PHC患者肝组织标本中表达相关因素分析

综上所述，PHC患者的血清和肿瘤组织中的GPC3均呈现高表达状态，其在肝组织中的表达水平可能与患者病情的进展具有相关性，应用血清GPC3和AFP水平联合检测可提高诊断PHC的敏感度。

参考文献：

[1]刘红丹,梁健,邓鑫.三维适形放疗在治疗原发性肝癌中的研究进展[J].实用癌症杂志,2013,28(1):103.

[2]Poon D,Anderson BO,Chen LT,et al.Management of hepatocellular carcinoma in Asia:consensus statement from the Asian Oncology Summit 2009[J].Lancet Oncol,2009,10(11):1111.

[3]纪凤卿,徐振兴,滕菁.甲胎蛋白异质体L3在原发性肝癌诊断中的研究进展[J].国际检验医学杂志,2013,34(5):580.

[4]Marrero JA,Feng Z,Wang Y,et al.Alpha-fetoprotein,des-gamma carboxyprothrombin,and lectin-bound alpha-fetoprotein in early hepatocellular carcinoma[J].Gastroenterology,2009,137(1):110.

[5]杨龙,刘剑勇.GPC3与肝癌的研究进展[J].中国癌症防治杂志,2010,2(2):146.

[6]余娟平,张琼,徐伟文,等 Glypican-3的血清检测与原发性肝癌诊断的研究进展[J].分子诊断与治疗杂志,2013,5(3):189.

[7]杨康,王万祥.血清标记物GPC3与肝细胞癌的研究进展[J].疾病监测与控制,2013,7(8):480.

摘要：目的观察和分析磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(GPC3)和甲胎蛋白(AFP)联合检测对原发性肝癌(PHC)的诊断价值。方法选取60例PHC患者、70例肝硬化患者和50例其它原因致肝破裂患者作为研究对象，对各类患者的血清GPC3和AFP水平和PHC患者的肝组织标本中的GPC3表达水平进行检测。结果肝破裂患者的血清GPC3水平显著低于肝硬化患者(P<0.05)，肝硬化患者的血清GPC3水平显著低于PHC患者(P<0.05)；应用血清GPC3和AFP联合检测诊断PHC的敏感度为90%，显著高于单独应用血清GPC3检测或血清AFP检测(P<0.05)；肿瘤组织的GPC3表达水平显著高于癌旁组织(P<0.05)，癌旁组织的GPC3表达水平显著高于正常组织(P<0.05)，具有不同Edmondson病理分级或TMN临床分期的PHC患者的肝组织GPC3表达水平的差异有显著性(P<0.05)。结论PHC患者的血清和肿瘤组织中的GPC3均呈现高表达状态，其在肝组织中的表达水平可能与患者病情的进展具有相关性，应用血清GPC3和AFP水平联合检测可提高诊断PHC的敏感度。

关键词：原发性肝癌；磷脂酰肌醇蛋白聚糖；甲胎蛋白；免疫组化；肿瘤标志物；血清学检测

The diagnosis value of the combined GPC3 and AFP detection of primary hepatic carcinomaWANGYan-feng,LINan-yang,RENYa-ling,etal.(FirsrHospitalofZhangjiakou,Zhangjiakou075000,China)

Abstract:ObjectiveTo observe and analyze the diagnosis value of the combined glypican-3 (GPC3) and alpha-fetoprotein (AFP) detection of primary hepatic carcinoma.Methods60 patients with PHC,70 patients with liver cirrhosis and 50 patients with liver rupture caused by other reasons were selected as the research objects.The serum GPC3 and AFP levels of all kinds of patients and the GPC3 expression level of the liver tissues of the patients with PHC were detected.ResultsThe serum GPC3 level of the patients with liver rupture was significantly lower than that of the patients with liver cirrhosis (P<0.05),and the serum GPC3 level of the patients with liver cirrhosis was significantly lower than that of the patients with PHC(P<0.05);the sensitivity of the combined serum GPC3 and AFP detection in the diagnosis of PHC was 90%,which was significantly higher than that of single detection of serum GPC3 or serum AFP (P<0.05);the GPC3 expression level in the tumor tissues was significantly higher than that in the paracancerous tissues (P<0.05),and the GPC3 expression level in the paracancerous tissues was significantly higher than that in the normal liver tissue (P<0.05).There was significant difference of the GPC3 expression level in the liver tissue of the PHC patients with different Edmondson pathological grading or different TMN clinical stage (P<0.05).ConclusionThe GPC3 levels in serum and tumor tissue of the PHC patients show high expression,and the expression level in liver tissue may be associated with the progress of the diseases.The combined detection of serum GPC3 and AFP levels can improve the diagnostic sensitivity of PHC.

Key words:primary liver cancer;glypican;alpha fetoprotein;immunohistochemistry;tumor marker;serological detection

收稿日期：(2014-01-09)

文献标识码：A

中图分类号：R735.7

文章编号：1007-4287(2015)03-0366-03

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