白介素-1与β2防御素对胎膜早破合并羊膜腔感染预测的意义

杨丽娜，王　凡，于海燕，金海鸿，逯庆玲

(黑龙江省医院，黑龙江 哈尔滨150036)

白介素-1与β2防御素对胎膜早破合并羊膜腔感染预测的意义

杨丽娜，王凡，于海燕，金海鸿，逯庆玲

(黑龙江省医院，黑龙江 哈尔滨150036)

(ChinJLabDiagn,2015,19:0412)

胎膜早破(Premature Rupture of Membrane,PROM)指临产前胎膜发生破裂，其发生率国外5%-15%，国内2.7%-17%，并呈逐年上升趋势，常致早产、围生儿死亡、宫内及产后感染率升高，是威胁母儿健康的一个常见产科并发症。胎膜早破后是否及时发现羊膜腔感染，适时终止妊娠对于孕妇及新生儿的预后有重要的意义，本研究探讨白介素-1(IL-1)与β2防御素(HBD-2)对胎膜早破合并羊膜腔感染预测的意义，为临床预测PROM后的宫内感染提供新的理论依据和检测手段。

1材料与方法

1.1研究对象选择2012年6月-2013年6月在黑龙江省医院产科病房因胎膜早破住院分娩孕妇42例，其中足月胎膜早破22例，未足月胎膜早破20例，同时选择与胎膜早破组孕周相近的20例非胎膜早破孕妇作为对照组。两组在年龄，孕周，孕产次比较，差异无统计学意义(见表1)。根据胎膜的病理诊断报告，将胎膜早破组分为绒毛膜羊膜炎(Histological chorioamnionitis,HCA)组18例和非HCA组24例。孕妇纳入标准参照人民卫生出版社出版的《妇产科学》第七版。HCA诊断标准为镜下绒毛膜及羊膜被中性粒细胞浸润且胎盘绒毛膜板晦暗或不透明[2]。

1.2标本采集(1)血清：患者在妊娠结束前抽取肘静脉血5 ml，3 000转/分，离心15分钟，分离血清，置-20℃冰箱保存待检。(2)胎膜：患者妊娠结束后取破裂口周边胎膜组织2 cm×2 cm送检黑龙江省医院病理科以确定有无组织学绒毛膜羊膜炎。

1.3实验方法采用固相夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各研究组对象血清β2防御素、白介素-1。

2结果

2.1实验组与对照组各项基本资料的比较

各组在年龄、孕产次、孕周比较，差异无统计学意义(P>0.05)(见表1)。

表1　孕产妇基本资料比较

2.2实验组与对照组胎膜感染情况的比较

HCA组IL-1水平、HBD-2水平与非HCA组比较，差异显著，P<0.01；HCA组IL-1水平、HBD水平与对照组比较，差异显著，P<0.01；非HCA组的IL-1水平、HBD-2水平与对照组比较，无显著性差异，P>0.05，见表2。从均数直观图观察到，随着胎膜早破的出现、感染的发生，IL-1水平、HBD-2水平有升高的趋势，见图1、2。

表2　孕妇血清中IL-1、HBD-2水平的比较

与HCA组比较，*：P<0.05；**：P<0.01

2.3IL-1与HBD-2预测HCA 的ROC曲线

绘制IL-1和HBD-2水平的ROC曲线，以敏感性为Y轴，1-特异性为X轴，结果提示以这2个参数预测HCA均有统计学意义(PIL-1=0.01，PHBD-2=0.03)；所计算的曲线下面积分别为75%和71%；95%可信区间分别为(0.60，0.90)和(0.53,0.88)；当IL-1以80.22 pg/ml为分界点时，诊断HCA的敏感性为0.78，特异性为0.75；当HBD-2以474.79 ng/L为分界点时，诊断HCA的敏感性为0.67，特异性为0.79(见图3)。

图1IL-1水平变化趋势 图2HBD-2水平变化趋势图3IL-1与HBD-2诊断HCA 的ROC曲线

3讨论

近年来，国内外的学者对胎膜早破发生的原因从机械力学，胎膜结构变化，感染，免疫等方面的研究取得长足的进步。其中感染一直是众多研究者密切关注的相关因素之一。我们普遍观察到发生胎膜早破的孕妇，在发病后相当一段时间内无明显的临床表现，处于亚临床感染阶段，等到出现感染征象，可能已经对孕产妇及胎儿的预后造成影响，因此，胎膜早破合并感染的早期发现十分重要。本研究探讨IL-1与HBD-2在胎膜早破患者中对羊膜腔感染的预测，希望为临床胎膜早破合并绒毛膜炎的诊断提供新的思路。

有人认为，感染引起的IL-1升高 是人类分娩的机理[3]，国外有研究[4]发现，孕晚期羊水中IL-1β水平升高，有发生胎膜早破和早产的风险。Puchner等[5]研究结果显示羊水中 IL-1β 水平每增加一个单位，早产及胎膜早破的发生率增加7.2 倍。我们的研究表明，胎膜早破发生后IL-1较对照组有所升高，但与对照组无统计学意义，随着绒毛膜感染的发生，IL-1水平进一步升高，与对照组及非HCA组均有统计学意义，可作为胎膜早破发生后，羊膜腔出现感染的诊断指标。

人防御素是一组多肽，具有抗微生物和细胞毒活性,是构成机体天然防卫系统的重要组成部分,它能够对多种细菌、真菌、某些有包膜的病毒起到杀伤作用。防御素分为α和β防御素两大类。它们在人体呈现持续的非特异性表达，同时也可以被细胞因子等炎症反应的产物诱导表达。HBD-2对革兰氏阴性菌及革兰氏阳性菌都有一定的灭活性。还有研究者报道HBD-2对大肠杆菌,铜绿假单胞菌及白色念珠菌有较强的杀灭活性[6]。HBD-2存在于妊娠妇女的生殖道中，是抵抗微生物入侵生物屏障的重要组成部分,胎膜早破发生后,微生物侵入羊膜腔，HBD-2参予进行抗微生物的天然免疫反应,故其水平升高；当微生物的入侵受到抑制,就不会发生宫内感染，相反，如果羊膜腔内的天然免疫屏障未能控制微生物的入侵,病原微生物的产物就会刺激了HBD-2的表达。Soto E等人发现，羊水中HBD-2水平在HCA患者中出现升高[7]，也有研究者发现HBD-3水平在宫内感染患者中有所升高[8]。我们的研究表明，胎膜早破后HBD-2较对照组有所升高，但与对照组无统计学意义，随着绒毛膜感染的发生，HBD-2水平进一步升高，与对照组比较差异显著，与非HCA组比较有统计学意义，因此，HBD-2水平可作为胎膜早破羊膜腔出现感染的诊断指标。

在分组比较中可以看到，IL-1和HBD-2随着胎膜早破的发生和感染的发生都呈现出升高的趋势，可作为疾病的动态观察依据。我们考虑HBD-2通过自身特有的杀菌机制使菌体裂解，发挥生物活性并导致释放菌体内诸如内毒素等物质时，而菌体内容物又可诱发IL-1的产生或生成上调,进而又使机体局部各种细胞因子增多。这又能使HBD-2基因表达上调,至此形成一个循环，HBD-2和IL-1互为因果,相互促进，共同升高。通过ROC曲线的绘制，我们看到当IL-1以80.22 pg/ml为分界点时，诊断HCA的敏感性为0.78，特异性为0.75；当HBD以474.79 ng/L为分界点时，诊断HCA的敏感性为0.67，特异性为0.79(见图3)，提示可以此作为分界点进行HCA的预测。

参考文献：

[1]谢幸，苟文丽.妇产科学[M].北京：人民卫生出版社，2013:133.

[2]Shim S S,Romero R ,Hong J S et al .Clinical significance ofintra-an-miotic inflammation in patients with preterm premature rupture of membrane[J].Am J Obstet Gynecol,2004,191:1339.

[3]Romero R,Mazor M,Brandt F,et al.Interleukin-1 alpha and interleukin-1 beta in preterm and term human parturition[J].Am J Reprod Immunol,1992,27(3-4):117.

[4]Bitner A,Kalinka J.IL-1β,IL-6 promoter,TNF-α promoter and IL-1RA gene polymorphisms and the risk of preterm delivery due to preterm premature rupture of membranes in a population of Polish women[J].Arch Med Sci,2010,6(4):552.

[5]Puchner K,Iavazzo C,Gourgiotis D,et al.Mid-trimester amniotic fluid interleukins(IL-1β,IL-10 and IL-18) as possible predictors of preterm delivery[J].In Vivo,2011,25(1):141.

[6]Harder J,Bartels J,Christophers E,et al.A peptide antibiotic from human skin[J].Nature,1997,387:861.

[7]Soto E,Espinoza J,Nien JK,Kusanovic JP et al.Human beta-defensin-2:a natural antimicrobial peptide present in amniotic fluid participates in the host response to microbial invasion of the amniotic cavity[J].J Matern Fetal Med ,2007,20:15.

[8]Buhimschi IA,Jabr M,Buhimschi CS et al.The novel antimicrobial peptide beta3-defensin is produced by the amnion:a possible role of the fetal membranes in innate immunity of the amniotic cavity[J].Am J Obstet Gynecol ,2004,191:1678.

摘要：目的通过测定外周血白介素-1(IL-1)及β2防御素(HBD-2)水平，探讨他们在胎膜早破中的作用，分析其与羊膜腔感染的相关性，为临床的诊断与治疗提供新的思路。方法42例胎膜早破患者分别测定外周血IL-1及HBD-2水平，与20例对照组进行比较，根据胎膜病理诊断结果，实验组进一步分出组织学绒毛膜炎组(HCA)和非组织学绒毛膜炎组(非HCA组)，比较两组间HBD-2及IL-1水平。结果42名胎膜早破患者中，病理证实胎膜早破无感染者(非HCA)24例，感染者(HCA)18例。HCA组IL-1水平与非HCA组比较，差异显著，P<0.01；HCA组IL-1水平与对照组比较，差异显著， P<0.01；非HCA组的IL-1水平与对照组比较，无显著性差异，P>0.05。 HCA组HBD水平与非HCA组比较，差异显著，P<0.05；HCA组HBD水平与对照组比较，差异显著， P<0.01；非HCA组的HBD水平与对照组比较，无显著性差异，P>0.05。从均数直观图观察到，随着胎膜早破的出现，感染的发生，IL-1、HBD水平均有升高的趋势。通过ROC曲线观察，当IL-1以80.22 pg/ml为分界点时，诊断HCA的敏感性为0.78，特异性为0.75；当HBD以474.79 ng/L为分界点时，诊断HCA的敏感性为0.67，特异性为0.79。结论胎膜早破患者外周血IL-1、HBD-2水平有预测和诊断HCA的可能，其升高在HCA患者中有统计学意义，为临床HCA的诊断提供新的手段。

关键词：β2防御素；白介素-1；绒毛膜羊膜炎；胎膜早破

The Value of Serum IL-1 and HBD-2 in Diagnosis of Infection in Premature Rupture of MembranesYANGLi-na,WANGFan,YUHai-yan,etal.(HeilongjiangProvincialHospital，Harbin150036,China)

Abstract:ObjectiveTo analysis the relationship between the infection and the serum level of IL-1 and HBD-2 in premature rupture of membranes.Methods42 women with PROM were enrolled in the study.20 samples without PROM pregnancies matching the same gestational ages were recruited as control group.According to the results of pathological diagnosis of membranes,pregnant women with PROM were divided into histological chorioamnionitis(HCA) and non-HCA.We analyze the level of IL-1 and HBD-2 between the different groups.ResultsIn 42 patients with PROM,24 cases were non-infected and 18 cases were infected.The level of IL-1 in HCA group are significantly higher than non-HCA group and control group(P<0.01).The level of HBD-2 in HCA group are significantly higher than non-HCA group(P<0.05) and control group(P<0.01).There is no statistically significant different between non-HCA and control group(P>0.05).We observe from the mean plot show that the level of IL-1 and HBD-2 has a tendency to rise with the emergence of PROM and infection.According to the ROC curve,when IL-1 take 80.22 pg/mL,the sensitivity and specificity of diagnosis infection in PROM are 0.78 and 0.75 respectively.when HBD-2 take 474.79 ng/L,the sensitivity and specificity of diagnosis infection in PROM are 0.67 and 0.79 respectively.ConclusionThe clinical value of serum IL-1 and HBD-2 may be a specific index diagnosis of infection PROM in the future.

Key words:HBD-2;IL-1;chorioamnionitis;premature rupture of membranes

收稿日期：(2013-11-27)

作者简介：杨丽娜，硕士，副主任医师，黑龙江省医院妇产科医生。

文献标识码：A

中图分类号：R714.43+3

文章编号：1007-4287(2015)03-0412-03

基金项目：黑龙江省卫生厅科研课题(2013372)