自拟祛疣方联合二氧化碳激光治疗尖锐湿疣临床观察及外周血IL-2、IL-10及IFN-γ 的监测

樊磊强，张艳峰，刘智君

（河北省承德市中心医院，承德067000）

尖锐湿疣（Condyloma acuminatum, CA）是人类乳头瘤病毒（Human papilloma virus，HPV）感染所引起的一种常见的性传播疾病，复发率较高。细胞免疫功能参与CA 的发生、消退及复发，Th1/Th2 细胞平衡及其各自分泌的细胞因子对细胞免疫功能具有重要的调控作用。笔者于2012 年6 月—2013 年6 月采用自拟祛疣方联合CO2激光治疗尖锐湿疣获得理想疗效，并检测CA 患者治疗前后外周血白细胞介素（IL）-2、IL-10 及干扰素（IFN）-γ 水平变化，结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床诊断标准 根据中国卫生部疾病控制司指定的《尖锐湿疣诊断标准及处理原则》[1]，纳入标准如下：（1）年龄≥18 岁；（2）符合上述诊断标准，具有典型的临床表现，疣体主要呈乳头状、菜花状；（3）近1 个月内未接受过系统治疗或近2 周内局部未使用过抗病毒药物、免疫调节剂或其他外用药物；（4）治疗和随访期间无再感染史；（5）能提供详细个人信息且按要求用药及复诊或随访者。

1.2 排除标准 （1）既往对已知治疗药物成分过敏者；（2）合并有心脑血管、肝、肾、造血系统疾病及先天性疾病者；（3）合并有自身免疫性疾病，长期服用糖皮质激素及免疫抑制剂史；（4）治疗期间合并应用其他药物者；（5）孕妇、哺乳期妇女；（6）入选前4周内接受过系统治疗，2 周内行局部抗病毒治疗者；（7）不能按要求用药、复诊或随访者，记录不全或患者自动终止治疗者。

1.3 一般资料 100 例CA 病人，其中男62 例，女38 例。均选自2012 年6 月—2013 年6 月我院皮肤性病科门诊患者，入选年龄18～52 岁，平均（32.0±2.8）岁；病程7 d～22 个月，平均（4.2±1.3）个月。所有CA患者按照随机数字表法随机分为2 组，其中祛疣方组60 例，CO2激光组40 例。并选取我院同期健康体检者，且无免疫性疾病、严重系统疾病及其他感染性疾病者为正常对照组，共50 例。各组之间性别、年龄差异均无统计学意义（P＞0．05），具有可比性。

1.4 方法

1.4.1 血清标本制备 祛疣方组及CO2激光组入选病例分别于治疗前及治疗后3 个月于空腹抽取静脉血5.0 mL，离心（2 000 r/min），收集血清，分装后置-80 ℃冰箱内待测。正常对照组仅于体检时抽一次血备用。

1.4.2 细胞因子浓度检测 对CA 患者外周血清中的IFN-γ，IL-2、IL-10 水平进行检测。按照ELISA检测试剂盒说明书操作，采用双抗体夹心ELISA 方法，ELISA 试剂盒为上海西唐生物工程有限公司产品。

1.4.3 治疗方法 祛疣方组常规消毒疣体及疣体周围皮肤黏膜，利多卡因注射液局部浸润麻醉后，用CO2激光治疗仪去除疣体。再用自拟祛疣方坐浴。祛疣方由土茯苓、板蓝根、木贼、紫草、香附、苦参、萆薢组成。每药各30 g，加水(共约600 mL)，文火煎20 min，倒出药汁，再如法煎20 min 取汁，两汁合一。药汁温度以感温热舒适为宜，变冷可再加热，坐浴，每次30～40 min，2 次/d，1 付/d，14 d 为1 个疗程；治疗至创面完全愈合后再用4 个疗程即停药，停药3 个月后评价疗效。CO2激光组仅用CO2激光祛除疣体，3 个月后评价疗效。

1.5 疗效判定 肉眼可见疣体完全被清除，且治疗后3 个月内原病损处未再出现新生疣体，醋酸白试验阴性即为临床治愈；治疗后3 个月内又在原病变区及周围出现新的疣体者为复发。

1.6 安全性观察指标 所有患者详细登记个人信息及联系方式，均能按要求随访，用药后每次随访或就诊时，询问并记录患者可能出现的不良反应，主要是局部不良反应，如局部刺激症状及过敏反应等。1.7 统计学方法 应用SPSS 17.0 统计软件进行数据处理，计量资料采用t 检验，计数资料采用χ2检验，以P<0.05 有统计学意义。

2 结果

2.1 3 组IL-2、IL-10、IFN-γ 含量检测结果 见表1。祛疣方组与CO2激光组治疗前、后血清中IL-2、IL-10、IFN-γ 含量与健康组比较，差异有统计学意义（t 值见表2，P<0.05），祛疣方组与CO2激光组治疗前后3 项指标无显著变化（P>0.05）。

表1 3 组IL-2、IL-10、IFN-γ 含量检测结果 （x±s,pg/mL）

表2 健康对照组与祛疣方组及CO2 激光组IL-2、IL-10、IFN-γ 含量比较t 值

2.2 祛疣方组与CO2激光组复发率比较 2 组患者复发率比较，祛疣方组复发率明显低于CO2激光组，差异有统计学意义（χ2=7.143，P=0.008）。见表3。治疗组患者未出现局部刺激症状及过敏反应等不良反应。

表3 祛疣方组与CO2 激光组复发情况 例

3 讨论

尖锐湿疣是由乳头瘤病毒引起的一种性传播疾病，呈逐年上升的趋势，其发病率及复发率居高不下。国内外学者研究结果表明，CA 的复发与Th1/Th2 细胞因子失衡有关，CA 患者外周血Th1 细胞因子分泌减少，而Th2 细胞因子分泌增多[2]。

中医学认为，尖锐湿疣是由于房事不洁或接触污秽之物品，使湿热淫毒侵入外阴皮肤黏膜，导致肝经郁热，气血不和，湿热毒邪搏结而成。由于湿毒为阴邪，其性黏滞，故缠绵难愈，且易耗伤正气。一般分湿热下注、湿浊互结、阴虚浊结、气虚邪复等证进行治疗。故本方以“清热除湿，凉血解毒”为治则。祛疣方由土茯苓、板蓝根、木贼、紫草、香附、苦参、萆薢组成。板蓝根能清热解毒利湿，促进尖锐湿疣赘生物消散；木贼草有疏散风热之功，香附具有理气散结、疏肝解郁、行气止痛作用。由于尖锐湿疣易在温暖潮湿环境中发生，针对此特点在原方基础上加入清热利湿力较强的苦参、土茯苓、萆薢，共奏清热解毒、燥湿泻火、软坚散结之功。现代医学研究显示，板蓝根、木贼、香附、紫草、苦参具有较强的抗病毒作用，能抑制尖锐湿疣病毒复制[3]。土茯苓兼具调节细胞免疫作用，且对细菌感染有一定抑制作用[4]。本治疗方法是运用CO2激光去除疣体后进行坐浴，发挥了局部抗病毒作用，防止继发感染，促进创口愈合，同时有效清除原病灶及周围组织正常皮肤的潜伏病毒[5]，兼顾“治已病”及“治未病”，提高治愈率，减少复发。

IFN-γ 又称免疫干扰素，主要由激活的Th1 细胞分泌，主要作用是通过激活单核细胞、淋巴细胞和自然杀伤细胞而调节免疫应答，参与对细胞内寄生微生物的抗感染免疫，在拮抗细胞内病毒感染中起重要作用[6]。IL-2 主要由Th1 细胞分泌，能够刺激T 细胞增殖，提高机体细胞免疫功能[7]。IL-10 主要是由Th2 细胞分泌，通过抑制Th1 细胞分泌IL-2而抑制Th1 细胞增殖，进而抑制Th1 合成IL-2、IL-3、IFN-γ 和TNF 等细胞因子，抑制细胞免疫反应[8]。IL-10 水平高于正常对照水平，说明机体Th2 型细胞功能处于亢进状态。

笔者发现，CA 患者外周血IFN-γ 水平低于正常对照组水平，说明机体Th1 型细胞功能受到抑制。同时发现患者血清中IL-2 水平下降，且与IFNγ 水平下降有一致性，进一步反映出Th1 细胞受到抑制，其分泌细胞因子的能力减弱，Th1 亚群处于低表达状态。提示可能HPV 抑制机体的细胞免疫应答，Th1 型炎性因子IL-2、IFN-γ 水平下降，导致诱导并激活T 细胞、自然杀伤细胞等进行细胞免疫应答的能力下降。

本研究结果显示，祛疣方组患者其复发率明显低于CO2激光治疗组，2 组患者外周血清IFN-γ、IL-2 和IL-10 水平较治疗前有所变化，但变化差异无统计学意义（P>0.05），反映出随着病毒的逐渐清除，病毒诱导的细胞因子水平有所改善，Th1/Th2 逐渐趋于正常，但该变化可能是机体自身发生的免疫调节改变所致。本方剂对患者IFN-γ、IL-2 和IL-10水平无显著影响，患者复发率降低可能是由于本方剂可以促进皮肤愈合，改善皮肤局部的免疫变化所致，但需要大样本研究进一步证实。

[1] 韩国柱.尖锐湿疣诊断标准及处理原则.WS235-2003:1.

[2] Pinto LA, Castle PE, Roden RB, et al. HPV-16 L1 VLP vaccine clicits a broad-spectrum of cytokine responses in whole blood[J].Vccine,2005,23:3 555-3 564.

[3] 刘青云.中药药理学[M].2 版.北京：人民卫生出版社,2002:73-75.[4] 刘广省.土茯苓的药理研究进展[J].中药材,2001,24（8）:615.

[5] 焦霞.苦参临床及药理研究进展[J].中药新药与临床药理,2002,13（3）:192.

[6] Doorbar J, Giffin H.Intrabody strategies for the treatment of human papilloma varus-associated disease[J].Expert Opin Biol Ther,2007,7:677-689.

[7] 梁宁.尖锐湿疣患者治疗前后血清IL-2、IL-6 和TNF-α 水平检测的临床意义[J].标记免疫分析与临床,2006,13（3）:155-156.

[8] 李春霞,尉莉,毕健平, 等.尖锐湿疣患者血清IL-18、干扰素γ和IL-10 水平检测[J].中国皮肤性病学杂志,2011,25（4）:284-285.