几种杀菌剂对意大利蜜蜂的安全性评价

贾变桃邹亚飞董丰收张礼生何伟志*（山西农业大学农学院，太谷 03080；中国农业科学院植物保护研究所，北京 0093）

几种杀菌剂对意大利蜜蜂的安全性评价

贾变桃1邹亚飞2董丰收2张礼生2何伟志2*
（1山西农业大学农学院，太谷 030801；2中国农业科学院植物保护研究所，北京 100193）

为评价几种杀菌剂对意大利蜜蜂的急性毒性和安全性，测定了11种杀菌剂对蜜蜂的急性接触毒性和15种杀菌剂对蜜蜂急性经口毒性，结果表明：11种杀菌剂对蜜蜂的接触毒性，氟硅唑为高毒，丙环唑和咪鲜胺为中毒，丙森锌、苯醚1甲环唑、石硫合剂、甲基硫菌灵、烯酰吗啉、氟菌唑、武夷菌素和三环唑为低毒；15种杀菌剂对蜜蜂的经口毒性，丙环唑和抑霉唑为中毒，咪鲜胺、丙森锌、苯醚甲环唑、石硫合剂、甲基硫菌灵、烯酰吗啉、氟菌唑、三环唑、春雷霉素、代森锰锌、腐霉利、嘧霉胺和烯唑醇为低毒。因此，应禁止在蜜蜂活动区域使用高毒杀菌剂氟硅唑，慎重选择中等毒性杀菌剂丙环唑、咪鲜胺和抑霉唑，尽量选择对蜜蜂低毒杀菌剂，以保护蜜蜂的安全。

杀菌剂；意大利蜜蜂；安全性评价

蜜蜂作为一种传粉昆虫，对农业增产增收具有重要作用，同时还可提供大量蜂蜜、蜂蜡、蜂胶等产品[1]。农药在防治病虫草等有害生物的过程中，也会对非靶标有益生物如蜜蜂产生不良影响。自2006年冬以来，欧美等国相继出现蜂群大量减少的现象，科学家们称之为蜂群崩溃失调病（colony collapse disorder，简称CCD）[2-3]。引起蜂群衰退的因素有很多，其中农药的大量使用被认为是一个重要诱因[4]。据报道，许多杀虫剂对蜜蜂表现为高毒[5,6]，而杀菌剂和除草剂的毒性相对较低，但个别杀菌剂对蜜蜂也有较高毒性[6]。为了解不同种类杀菌剂对蜜蜂的毒性及安全性，我们测定了几种杀菌剂对蜜蜂的急性接触毒性和经口毒性，试验方法依据国家《化学农药环境安全评价试验准则-蜜蜂急性毒性试验》的要求进行，为保护蜜蜂和安全用药提供重要参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 供试蜜蜂及来源

意大利成年工蜂（Apis melliifera L）；来源于：北京密云东菜园养蜂场。

1.1.2 供试药剂

供试药剂及生产厂家见表1。装入10 mL小烧杯中，杯内浸渍0.4 g脱脂棉，杯口向下倒置于试验笼纱网上，通过网眼供蜜蜂摄食。试验条件同上。48 h后观察受试蜜蜂有无中毒症状及死亡数，记录死亡蜂数，用DPS软件计算LC50值及95%置信限。

1.2.3 农药对蜜蜂毒性分级标准

依据中华人民共和国国家标准《化学农药环境安全

表1 供试药剂

1.2 试验方法

1.2.1 蜜蜂急性接触试验方法

将贮蜂笼内的蜜蜂引入500 mL三角瓶内，用纱布封口，通入N2气体将蜜蜂麻醉，麻醉后将蜜蜂置于滤纸上，将配置好的系列浓度药液用EDP3电动移液器分别点滴于蜜蜂前胸背板处，点滴量为1 μL/蜂，待蜂身晾干后转入试验笼中，用脱脂棉浸泡适量蔗糖水供蜜蜂取食。试验在温度23～27℃，相对湿度50～70%，微光条件下进行。观察48 h受试蜜蜂有无中毒症状及死亡现象，记录死亡数，用DPS软件计算LD50值及95%置信限。

1.2.2 蜜蜂急性（经口）毒性试验

根据预试验结果，设置系列浓度，并设空白对照组，每处理10只蜜蜂，对照组及每一浓度组均设3个重复。将贮蜂笼内的蜜蜂引入试验笼中，每个笼中10只试验用蜂。不同浓度药液与50%蔗糖水以1:1混匀，评价试验准则》，按毒性测定结果，将农药对蜜蜂毒性等级划分标准分为4个等级（见表2）。

表2 农药对蜜蜂的毒性等级划分

2 结果与分析

2.1 供试杀菌剂对蜜蜂的接触毒性

由表3可以看出，11种杀菌剂中，氟硅唑对蜜蜂的接触毒性最高，其LD50值为1.55μg/只，根据毒性分级标准为高毒；其次为丙环唑和咪鲜胺，LD50值分别为3.80和8.80 μg/只，为中等毒性；丙森锌和苯醚甲环唑LD50值分别为25.64和27.36 μg/只，为低毒，其余杀菌剂石硫合剂、甲基硫菌灵、烯酰吗啉、氟菌唑、武夷菌素和三环唑，它们的LD50值均大于100μg/只，为低毒。

2.2 供试杀菌剂对蜜蜂的经口毒性

测定了15种杀菌剂对意大利蜜蜂的经口毒性，结果表明：丙环唑和抑霉唑对蜜蜂的经口毒性最高，LC50分别为64.16和91.44 mg/L，根据农药的蜜蜂的毒性划分标准，毒性为中毒；其余13种杀菌剂的经口LC50均大于200 mg/L，毒性为低毒（表4）。

表3 11种杀菌剂对蜜蜂急性接触毒性（48 h）

表4 15种杀菌剂对蜜蜂急性经口毒性(48 h)

3 结论与讨论

接触法是模拟田间施药时药液与蜜蜂接触或蜜蜂采蜜时触及受农药污染的植株的情况，摄入法则表示农田喷药后，蜜蜂觅食受污染花粉的情况，因此，其结果可以作为该农药对蜜蜂安全评价的依据[7]。

本研究测定的对蜜蜂中到高毒的杀菌剂中，氟硅唑和丙环唑为三唑类脱甲基抑制剂，咪鲜胺和抑霉唑为咪唑类脱甲基抑制剂，均属于甾醇生物合成抑制剂。这一类杀菌剂主要抑制麦角甾醇生物合成，破坏真菌细胞膜的结构和功能，干扰细胞正常的新陈代谢，导致菌体生长停滞，繁殖率下降，甚至细胞死亡[8]。祝小祥等[9]研究认为一些三唑类杀菌剂对赤眼蜂具有急性毒性潜力，在防治植物病害时应谨慎使用。迟艳艳等[10]报道氟硅唑、烯唑醇2种杀菌剂对家蚕2龄幼虫为中等毒性，具有高风险性；氟环唑、戊菌唑、丙环唑、己唑醇、苯醚甲环唑和戊唑醇6种杀菌剂对家蚕2龄幼虫为低毒，具有中等风险性。可见这一类杀菌剂对非靶标有益昆虫具有一定的毒性风险，应谨慎使用。

本试验结果表明，11种杀菌剂对蜜蜂的接触毒性，氟硅唑为高毒，丙环唑和咪鲜胺为中毒，其余药剂为低毒；15种杀菌剂对蜜蜂的经口毒性，丙环唑和抑霉唑为中毒，其余药剂为低毒。因此，应严格禁止高毒杀菌剂氟硅唑在蜜蜂活动区域使用，慎重选择中等毒性杀菌剂丙环唑、咪鲜胺和抑霉唑，尽量选择对蜜蜂低毒杀菌剂，以保护蜜蜂的安全。

[1]王成菊,邱立红,郑明奇,等.阿维菌素及其混配制剂对蜜蜂的安全性评价[J].农业环境科学学报，2006,25(1):229-231.

[2]Chauzat MP,Faucon J P,Martel A C,et al.A Survey of pesticide residues in pollen loads collected byhoneybees in France[J].Journal ofEconomic Entomology,2006,99(2):253-262.

[3]Underwood R M,Vanengelsdorp D.Colony collapse disorder:have we seen this before?[J].Bee Culture,2007,135(7):13-15.

[4]郑志阳,梁勤.蜂群崩溃失调病(CCD)的病因分析[J].中国蜂业, 2009,60(6):6-8.

[5]苍涛，苍涛，王彦华，等.蜜源植物常用农药对蜜蜂急性毒性及风险评价[J].浙江农业学报,2012,24(5):853-859.

[6]赵帅，袁善奎，才冰，等.300个农药制剂对蜜蜂的急性经口毒性[J].农药，2011,50(4)：278-280.

[7]赵学平，苍涛，陈超，等.几种农药对蜜蜂毒性与安全性评价研究[J].浙江农业科学，2008，(6)：748-750.

[8]徐汉虹.植物化学保护学（第四版）[M].北京：中国农业出版社，2007：149.

[9]祝小祥，苍涛，王彦华，等.三唑类杀菌剂对三种赤眼蜂成蜂的急性毒性及风险评估[J].昆虫学报，2014,57(6)：688-695.

[10]池艳艳,乔康,姜辉,等.三唑类杀菌剂对家蚕的急性毒性与安全性评价[J].蚕业科学,2014,40(2):0272-0276.

Acute toxicity and safety evaluation of several fungicides to Apis mellifera L.

Jia Biantao1Zou Yafei2Dong Fengshou2Zhang Lisheng2He Weizhi2
(1 College of Agriculture,Shanxi Agricultural University,Taigu Shanxi,030801; 2 The Institute of Plant Protection（IPP）,Chinese Academy of Agricultural Sciences（CAAS）,Beijing,100193)

∶Acute toxicities and safety evaluation of several fungicides to honeybee(Apis mellifera L.)were studied by contact method and oral method.The results showed that among 11 fungicides tested,flusilazole exhibited high contact toxicity,propiconazole and prochloraz exhibited moderate contact toxicities,and propineb and difenoconazole, lime sulphur,thiophanate-methyl,dimethomorph,triflumizole,wuyimycin and tricyclazole exhibited low toxicities. Among 15 fungicides tested,propiconazole and imazalil showed moderate oral toxicities,prochloraz,propineb, difenoconazole,lime sulphur,thiophanate-methyl,dimethomorph,triflumizole,tricyclazole,kasugamycin,mancozeb, procymidone,pyrimethanil and diniconazole exhibited low oral toxicities.Therefore,in order to protect honeybee,we should prohibit flusilazole,carefully use propiconazole,prochloraz and imazalil and try to choose fungicides of low toxicities to honeybee in activity area of honeybee.

∶Fungicides;Apis mellifera;Safety evaluation

S893.3

A

农业部2015年度财政项目“蜜蜂授粉和绿色防控增产技术示范”（B3798）

贾变桃（1971-），女，副教授E-mail：jiabtao@foxmail.com

*通讯作者：何伟志（1970-），男，副研究员E-mail：he3255@sina.com.