人附睾蛋白4对慢性肾脏疾病的诊断价值研究

吴　萍，　叶伟民，　李　晨，　夏晓红，　张振成，　赵文静，　崔艳芳，　张彩英，　仲人前，　杨再兴

人附睾蛋白4对慢性肾脏疾病的诊断价值研究

吴萍，叶伟民，李晨，夏晓红，张振成，赵文静，崔艳芳，张彩英，仲人前，杨再兴

(第二军医大学附属长征医院实验诊断科，上海 200003)

摘要：目的检测人附睾蛋白4(HE4)在慢性肾脏疾病(CKD)中的表达水平，评价HE4对CKD的诊断价值。 方法用电化学发光法测定81例CKD患者和73名健康对照者(正常对照组)血清HE4、糖类抗原(CA)125、甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、CA199、CA15-3等指标，采用受试者工作特征(ROC)曲线分析各指标对CKD各分期的诊断价值。 结果CKD组血清HE4、CA125、CEA、CA15-3、尿素、肌酐和尿酸水平均明显高于正常对照组(P<0.05)，而血清AFP、CA199水平2组之间差异无统计学意义(P>0.05)。ROC曲线分析显示HE4对CKD的诊断性能最佳，其曲线下面积均大于血清肌酐、尿素和尿酸。CKD不同分期患者之间血清HE4、CEA、尿素、肌酐和尿酸水平差异均有统计学意义(P均<0.005)，且随病情严重程度的增加而增高。ROC曲线分析显示血清HE4、尿素、肌酐和尿酸水平对4～5期CKD均具有明显的诊断意义，曲线下面积均>0.9。结论HE4 对CKD具有极好的辅助诊断价值，且HE4值还与CKD的严重程度有关，对判断CKD的分期有重要的临床意义。

关键词：人附睾蛋白4；糖类抗原125；肾小球滤过率；肌酐；尿素；肿瘤标志物；慢性肾脏疾病

Research on the diagnosis significance of human epididymis protein 4 for chronic kidney diseaseWUPing，YEWeimin，LIChen，XIAXiaohong，ZHANGZhencheng，ZHAOWenjing，CUIYanfang，ZHANGCaiying,ZHONGRenqian，YANGZaixing

.(DepartmentofMedicalDiagnosisLaboratory，ChangzhengHospital，theSecondMilitaryMedicalUniversity,Shanghai200003，China)

Abstract:ObjectiveTo determine the level of human epididymis protein 4(HE4)， and to evaluate its diagnosis significance for chronic kidney disease(CKD). MethodsA total of 81 CKD patients and 73 healthy controls were enrolled. The determinations of serum HE4， carbohydrate antigen(CA)125， alpha fetoprotein(AFP)， carcinoembryonic antigen(CEA)， CA199， CA15-3 and so on were performed by electrochemiluminescence. The results were analyzed by receiver operating characteristic(ROC) curve for the diagnosis of CKD with different stages. ResultsThe levels of serum HE4， CA125， CEA， CA15-3， urea， creatinine and uric acid were significantly higher in CKD patients than those in healthy controls(P<0.05)， while there was no statistical significance for AFP and CA199 between the 2 groups (P>0.05). ROC curve analysis indicated that compared with other parameters， HE4 had a better diagnosis significance for CKD. The area under the curve of HE4 was larger than those of urea， creatinine and uric acid. Additionally， there were statistical significances for serum levels of HE4， CEA， urea， creatinine and uric acid among various stages of CKD(P<0.005). Moreover， the serum levels of these parameters increased with severity of CKD. ROC curve analysis showed that serum HE4, urea, creatinine and uric acid had significant diagnosis significance for staging CKD(CKD4-5)， with the area under the curve>0.9. ConclusionsSerum HE4 shows an excellent diagnosis significance for CKD. Furthermore， it is closely associated with the severity of CKD. It is significant for judging the stages of CKD.

Key words:Human epididymis protein 4； Carbohydrate antigen 125； Glomerular filtration rate； Creatinine； Urea； Tumor marker； Chronic kidney disease

人附睾蛋白4(human epididymis protein 4，HE4)是近年发现的一种肿瘤标志物，该标志物对卵巢癌具有重要的辅助诊断价值，其对于卵巢癌诊断的敏感性可以达到90%以上，特异性达到70%以上，均明显优于糖类抗原(carbohydrate antigen，CA)125，特别是与后者联合应用，还可以大大提高对卵巢癌的诊断准确性[1]。正是由于这种优越性，HE4已被越来越广泛地应用于临床实验室，辅助卵巢癌的诊断和鉴别诊断。随着研究的不断深入，越来越多的证据表明，HE4除了在卵巢癌中表达增加外，在肺癌、子宫内膜癌等多种肿瘤中的表达均有明显增高[2-5]。其实，HE4除了表达于正常女性生殖道、呼吸道上皮、乳腺腺上皮、唾液腺和结肠黏膜中以外，在人的肾脏远曲小管中亦检测到了HE4的表达[6]，但对于各种肾脏疾病患者血清HE4的表达水平有何变化，国内外却鲜有研究，特别是国内尚未见此方面的文献报道。因此，我们深入探讨了各种慢性肾脏疾病(chronic kidney disease，CKD)患者血清中HE4的表达水平和其对CKD及其临床分期的诊断价值，并与其它各种临床常用指标进行了比较，旨在为HE4在临床上得到更广泛、更恰当的应用提供依据。

材料和方法

一、研究对象

81例各种CKD(包括高血压肾病、糖尿病肾病、慢性肾小球肾炎等)患者均为长征医院肾内科住院患者，男66例，女15例，年龄(55±19)岁，诊断符合最新国际CKD定义[7]，排除各种肿瘤，女性并同时排除妇科疾病；所有病例按肾小球滤过率(glomerular filtration rate，GFR)分期，CKD1～5期各期病例数分别为28、22、5、8和18例[GFR>90 mL/(min·1.73 m2)为CKD1期，60～89 mL/(min·1.73 m2)为CKD2期，30～59 mL/(min·1.73 m2)为CKD3期，15～29 mL/(min·1.73 m2)为CKD4期，15 mL/(min·1.73 m2)以下为CKD5期，其中CKD4～5期表示严重肾功能衰竭、尿毒症]。73名健康对照者(正常对照组)为体检人员，男58名，女15名，年龄(52±13)岁，排除肝脏疾病、肾脏疾病、各种肿瘤，女性并同时排除妇科疾病。

二、仪器和试剂

罗氏e601免疫分析仪及原装配套试剂、BECKMAN-COULTER AU5400生化分析仪及原装配套试剂。

三、方法

血清HE4、CA125、甲胎蛋白(alpha fetoprotein，AFP)、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen，CEA)、CA199、CA15-3等肿瘤标志物均用电化学发光法测定，尿素、肌酐和尿酸分别用脲激酶法、苦味酸法和尿酸酶-过氧化物酶偶联法测定，室内质控检测结果均符合要求。其中HE4检测最大上限为904 pmol/L，对于超过904 pmol/L的样本经磷酸盐缓冲液倍比稀释得出结果。

四、 统计学方法

采用SPSS 17.0软件进行统计分析。因各定量指标均为非正态分布，所以均采用中位数和总体范围表示，组间比较采用非参数秩和检验，诊断价值预测采用受试者工作特征(receiver operating characteristic，ROC)曲线分析。以P<0.05为差异有统计学意义。

结果

一、CKD组和正常对照组血清各种肿瘤标志物和尿素、肌酐、尿酸水平比较

CKD患者血清HE4、CA125、CEA、CA15-3、尿素、肌酐和尿酸水平均明显高于正常对照(P<0.05)，而血清AFP、CA199水平2组之间差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1　CKD组和正常对照组血清HE4、CA125、CEA、CA15-3、AFP、CA199、尿素、肌酐尿酸水平的比较

二、血清HE4、尿素、肌酐和尿酸对CKD的诊断价值分析

ROC曲线分析显示HE4对CKD的诊断价值最为明显，其曲线下面积达到0.978，明显高于尿素、肌酐和尿酸。见表2、图1。

表2　各指标诊断CKD的ROC曲线分析

三、CKD各分期患者血清各种肿瘤标志物、尿素、肌酐和尿酸水平的比较

CKD各分期患者之间血清HE4、CEA、尿素、肌酐和尿酸水平差异均有统计学意义(P均<0.005)，且随着病情严重程度的增加而增高。见表3。

图1　各指标诊断CKD的ROC曲线分析

分期例数HE4(pmol/L)CA125(U/mL)CEA(μg/L)CA15-3(U/mL)尿素(mmol/L)肌酐(μmol/L)尿酸(μmol/L)CKD12887.6(52.1～252.0)19.00(9.00～549.00)1.98(0.20～5.91)13.09(6.93～23.88)3.9(3.0～6.4)76(46～153)361(141～413)CKD22294.9(46.5～633.0)16.78(6.62～398.20)1.87(0.67～5.17)9.64(3.92～56.16)6.4(3.9～30.6)92(45～124)431(167～587)CKD35252.3(119.0～417.2)15.24(4.13～220.70)2.72(0.69～4.17)11.08(5.96～33.51)9.1(2.9～16.1)135(119～401)413(137～671)CKD48781.3(199.6～976.0)21.35(8.15～93.28)3.41(0.49～7.58)8.49(6.01～36.16)17.2(12.5～44.2)439(153～1892)545(321～671)CKD518899.2(553.8～1231.0)12.60(4.98～98.24)5.29(1.13～20.10)12.96(11.92～35.71)28.9(6.2～52.0)701(330～1315)631(237～932)P值<0.0010.3360.0010.871<0.001<0.0010.001

四、血清HE4、CEA、尿素、肌酐和尿酸对严重肾功能衰竭、尿毒症的诊断价值分析

采用ROC曲线分析血清HE4、尿素、肌酐和尿酸水平对严重肾功能衰竭、尿毒症的4～5期CKD的诊断价值。结果显示，上述各种指标对4～5期CKD均具有明显的诊断价值，特别是HE4、尿素和肌酐，其曲线下面积均>0.9。见表4、图2。

表4　各指标对4～5期CKD诊断的ROC曲线分析

图2　各指标诊断4～5期CKD的ROC曲线分析

讨论

HE4最早是由KIRCHHOF等[7]从人附睾远端上皮细胞中发现的，是一种与精子成熟密切相关的蛋白酶抑制剂。血清研究显示，HE4是一个重要的卵巢癌辅助诊断指标，其对卵巢癌的诊断价值要优于CA125，因此HE4在各临床实验室得到越来越广泛的应用。但随着研究的深入，大量证据表明，血清HE4在肺癌、子宫内膜癌等其他肿瘤中的表达也明显增高，甚至国外最新研究发现，在CKD和肾纤维化疾病患者中，血清HE4的表达水平也有明显增高[8-9]，但这些研究并未深入探讨HE4对CKD及其分期的诊断价值。此外，这方面的研究在国内尚未见报道。因此，本研究深入探讨了血清HE4对CKD及其分期的诊断价值，并与其它多种常用实验室指标进行了比较。

本研究纳入的CKD患者主要为男性(男66例，女15例)，结果发现血清HE4在CKD患者中的表达明显升高，与国外报道[8-9]一致。此外，CKD患者其它肿瘤标志物(CA125、CEA和CA15-3)的血清水平也明显高于健康对照者，这些结果与以往文献报道[10-11]的结果相似。提示上述几种肿瘤标志物的血清水平在CKD中均有改变，临床上在分析这些肿瘤标志物的意义时首先应该排除CKD的影响。ROC曲线分析显示血清HE4、CA125、CEA和CA15-3对CKD均有明显的诊断意义，其中HE4的诊断价值最为明显，其ROC曲线下面积甚至高于尿素、肌酐和尿酸，提示对于临床上怀疑CKD的患者，也可采用血清HE4进行辅助诊断。

本研究还发现，HE4的血清水平随着CKD临床分期的增加而逐渐增高，血清CA125和CA15-3水平则与CKD的严重程度无关，血清CEA水平虽然有随着CKD严重程度的加重而增高的趋势，但由于很少有CKD患者的血清CEA水平高于参考区间，因此其临床意义并不明显。进一步通过ROC曲线分析发现，HE4对晚期肾功能衰竭和尿毒症(4～5期CKD)具有重要的辅助诊断价值，其曲线下面积甚至超过尿酸，与尿素和肌酐相似。这些结果提示，CKD患者肾功能的变化会明显影响血清HE4水平，通过检测血清HE4的水平可以判断CKD的临床分期，特别对于晚期肾功能衰竭和尿毒症患者，其预测价值尤为明显。

总之，本研究发现CKD可以明显影响血清HE4水平，因此临床上CKD以外疾病应用HE4时须排除CKD。此外，血清HE4对于诊断CKD及其临床分期具有重要意义，因此临床上可能转为CKD的患者可以通过检测血清HE4进行辅助诊断和分期判断。

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(本文编辑：姜敏)

收稿日期：(2000-00-00)

中图分类号：

文章编号：1673-8640(2015)05-0461-04R446.62

文献标志码：ADOI：10.3969/j.issn.1673-8640.2015.05.013

通讯作者：杨再兴，联系电话：021-81886077。

作者简介：吴萍，女，1976年生，学士，主管技师，主要从事肿瘤免疫检验研究。