视神经脊髓炎患者血清及脑脊液中B淋巴细胞活化因子表达及临床意义

武胜涛　张　羽　李富慧　张保朝　时新艳

(南阳市中心医院神经内科，河南　南阳　473009)



视神经脊髓炎患者血清及脑脊液中B淋巴细胞活化因子表达及临床意义

武胜涛张羽1李富慧张保朝时新艳

(南阳市中心医院神经内科，河南南阳473009)

目的探讨视神经脊髓炎(NMO)患者血清及脑脊液中B淋巴细胞活化因子(BAFF)的表达及临床意义。方法选择2014年1月至2015年6月在医院就诊的NMO患者45例为NMO组，选择同期就诊的多发性硬化(MS)患者43例为MS组，同期住院治疗的非炎性神经性疾病患者45例为对照组，对比三组血清及脑脊液中的BAFF表达，NMO组与MS组扩展残疾状况评分量表(EDSS)评分及水通道蛋白4(AQP4-Ab)阳性率，分析NMO组和MS组BAFF表达与EDSS评分及AQP4-Ab滴度的相关性。结果NMO组与MS组的脑脊液BAFF表达均显著高于对照组，且NMO组显著高于MS组(均P<0.05)。NMO组的EDSS评分及AQP4-Ab阳性率均显著高于MS组(均P<0.05)。NMO组及MS组的EDSS评分与脑脊液BAFF均呈正相关(r=0.768，0.717；均P<0.01)。NMO组的脑脊液BAFF与AQP4-Ab滴度无明显相关性(P>0.05)。结论NMO患者脑脊液BAFF的表达升高，并与EDSS评分呈正相关，而血清BAFF较MS患者无明显变化，因此，脑脊液BAFF的表达高低对NMO及MS具有较好的诊断和鉴别价值，临床可采用血脑屏障有关BAFF拮抗剂对NMO患者进行治疗。

视神经脊髓炎；脑脊液；B淋巴细胞活化因子

视神经脊髓炎(NMO)属于自身免疫性疾病，发病率在整个脱髓鞘病变中占1%～22%〔1〕。NMO患者发病时通常存在视神经及脊髓损伤等症状，部分患者还会合并脑干损害。临床研究发现〔2〕，部分类风湿关节炎等自身免疫性疾病患者的血清B淋巴细胞活化因子(BAFF)表达存在明显上升的现象，但在胆汁性肝硬化等其他器官特异性免疫疾病中，患者的血清BAFF表达又无明显异常。多发性硬化(MS)与NMO患者发病累及范围较为相近，研究BAFF的表达与二者的关系有利于掌握NMO发病机制〔3〕。本文拟分析NMO与MS患者血清及脑脊液中BAFF的表达及临床意义。

1　资料与方法

1.1资料选择2014年1月至2015年6月在医院就诊的NMO患者45例为NMO组，均满足Wingerchuk在2006年制定的NMO诊断标准〔4〕，且患者均处于急性复发期，复发类型是复发-缓解型；其中男12例，女33例；年龄21～62〔平均(35.24±2.59)〕岁；病程2～22年，平均(12.43±3.04)年；复发次数1～6次，平均(4.02±1.14)次。选择同期就诊的MS患者43例为MS组，男10例，女33例；年龄24～65〔平均(35.19±1.98)〕岁；病程3～21年，平均(12.55±2.17)年；平均复发次数(3.89±1.23)次。所有患者均符合2010年版的McDonald诊断标准〔5〕，且患者均处于急性复发期，复发类型是复发-缓解型。再选择同期住院治疗的非炎性神经性疾病45例为对照组，男13例，女32例；年龄25～65〔平均(34.99±2.06)〕岁；包括运动神经元病20例，偏头痛18例，低颅压综合征7例。全部受试者在6个月内未服用可影响机体免疫功能的相关药物，且NMO组与MS组在急性复发期7 d内。

1.2研究方法为所有受试者抽取其晨间空腹静脉血8 ml，分置于2管内，再置入乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝管内。将1份静脉血置于室温下3 000 r/min离心15 min，得到上清后放置EP管内存放-80℃的冰箱中待测。将另1份静脉血样本送检测定水通道蛋白4(AQP4)抗体(AQP4-Ab)的滴度。在受试者对腰椎穿刺的知情同意书给予签署后，抽取脑脊液4 ml，放置在EP管内置于-80℃的冰箱中待测。对所有标本给予统一检测。采用RT-6000酶标分析仪(深圳雷杜公司)及人BAFF/BLyS/TNFSF13B/ELISA试剂盒(美国R&D Systems公司)检测血清与脑脊液中BAFF的表达水平，操作方法严格按照酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒的说明书步骤实施。选择细胞间接性免疫荧光法测定血清AQP4-Ab的滴度〔4〕，阳性标本滴度以1∶64界值进行判定，其中阳性最大值为1∶1 000。

1.3观察指标对比三组血清及脑脊液BAFF表达情况，采用扩展残疾状况评分量表(EDSS)评价NMO组与MS组视神经情况，分值0～6分，分值越低，表示患者的视神经情况越好〔6〕。比较NMO组与MS组的AQP4-Ab阳性率，分析NMO组和MS组BAFF表达与EDSS评分及AQP4-Ab滴度的相关性。

1.4统计学方法应用SPSS20.0软件进行χ2检验、t检验、方差分析和Pearson相关分析。

2　结　果

2.1三组血清及脑脊液中BAFF的表达三组血清BAFF表达无统计学差异(P>0.05)，脑脊液BAFF表达差异显著(P<0.05)，NMO组与MS组的脑脊液BAFF表达显著高于对照组，且NMO组显著高于MS组(均P<0.05)。见表1。

2.2NMO组与MS组EDSS评分及AQP4-Ab阳性率对比NMO组的EDSS评分〔(4.13±2.08)分〕及AQP4-Ab阳性率〔35例(77.78%)〕均显著高于MS组〔(2.65±1.52)分，0例；t=3.796，χ2=55.530，均P<0.05〕。

2.3NMO组与MS组脑脊液BAFF表达与EDSS评分及AQP4-Ab滴度的相关性NMO组及MS组的EDSS评分与脑脊液BAFF均呈正相关(r=0.768，0.717；均P<0.01)。而NMO组的脑脊液BAFF与AQP4-Ab滴度无明显相关性(P>0.05)。

表1　三组血清及脑脊液中BAFF表达对比±s)

与MS组相比:1)P<0.05；与对照组相比:2)P<0.05

3　讨　论

临床研究显示〔7〕，BAFF表达异常能够影响形成抗体B细胞的相关存活信号通路，进而诱发疾病的产生。换言之，BAFF在机体中的表达高低与自身免疫性疾病具有紧密联系。BAFF表达对MS患者的病情产生及进展发挥着重要作用。有报道称〔8〕，对于未治疗的MS患者，其血清BAFF与健康体检者并无明显差异，但接受干扰素-β等药物的治疗后，MS患者血清BAFF表达显著上升，表明BAFF可能经过受体通路参与到MS发病过程。BAFF在NMO患者发病过程中的相关作用并未完全阐明，明确BAFF的表达是否能作为生物标志物对NMO与MS进行鉴别，已成为临床需攻克的课题之一。本研究结果与Pellkofer等〔9〕的报道结果一致，提示在常规检查时，血清BAFF无法明显地鉴别出NMO与MS等疾病。而脑脊液BAFF在NMO患者中的表达更高，能够较为明显地区分NMO与MS疾病。究其原因，可能与NMO患者机体炎性反应和抗炎性反应的过程较MS患者更加剧烈有关。NMO是星形胶质细胞性疾病，患者的星形胶质细胞产生的损伤较髓鞘脱失明显更严重，且星形胶质细胞是抗原呈递细胞，其在被激活或者损伤之后可分泌出多类细胞因子，进而诱导免疫反应。NMO患者脑脊液BAFF表达上升，影响了B细胞的存活和分化，进而导致B细胞形成的AQP4-Ab上调，最终促发NMO疾病的病理和生理过程。提示脑脊液BAFF能够被作为一种生物标志物，并用于推测NMO及MS患者病情严重程度。原因可能是患者的脑脊液BAFF通过参与疾病的发病与进展机制中，进而对EDSS等评价疾病严重程度的评分作出相应的反馈与呈现。有报道称〔10〕，AQP4-Ab的滴度与NMO的发病有一定联系，但本文未发现二者之间的相关性，原因可能与本次研究的样本量较少或检测方法的差异有关，也有可能是因为本研究中AQP4-Ab的滴度上升，且NMO患者病情进展程度不一，对检测结果产生了一定影响。

1邱怀雨，张卯年，魏世辉，等.视神经脊髓炎临床特点分析〔J〕.眼科研究，2010；28(2)：175-7.

2Quan C，Yu H，Qiao J，etal.Impaired regulatory function and enhanced intrathecal activation of B cells in neuromyelitis optica：distinct from multiple sclerosis〔J〕.Mult Scler，2013；19(3)：289-98.

3张星虎.视神经脊髓炎的免疫治进展〔J〕.中华医学信息导报，2015；30(10)：20-2.

4邱伟，常艳宇，李蕊，等.AQP4基因多态性与NMO临床表型的相关性分析及功能研究〔J〕.中华医学杂志，2015；95(7)：501-6.

5Nakashima I，Takahashi T，Cree BA，etal.Transient increases in anti-aquaporin-4 antibody titers following rituximab treatment in neuromyelitis optica，in association with elevated serum BAFF levels〔J〕.J Clin Neurosci，2011；18(7)：997-8.

6贾红娟，叶静，赵筱玲，等.视神经脊髓炎首发高危脱髓鞘事件的临床分析〔J〕.中华内科杂志，2015；54(4)：322-5.

7方羚，邱伟.视神经脊髓炎动物模型及研究进展〔J〕.中华神经科杂志，2015；48(10)：916-8.

8Zhang H.B-cell activating factor in the cerebrospinal fluid of neuromyelitis optica and multiple sclerosis〔J〕.Mult Scler，2011；17(5)：639-40.

9Pellkofer HL，Krumbholz M，Berthele A，etal.Long-term follow-up of patients with neuromyelitis optica after repeated therapy with rituximab〔J〕.Neurology，2011；76(15)：1310-5.

10Wang KC，Lee CL，Chen SY，etal.Glatiramer acetate could be a hypothetical therapeutic agent for neuromyelitis optica〔J〕.Med Hypotheses，2011；76(6)：820-2.

〔2015-12-24修回〕

(编辑袁左鸣/滕欣航)

10.3969/j.issn.1005-9202.2016.14.089

武胜涛(1982-)，男，硕士，主治医师，主要从事脑血管病与肌萎缩侧索硬化研究。

R74

A

1005-9202(2016)14-3543-02；

1南阳市中心医院感染办