胃癌患者血浆microRNA-155的表达及其临床意义

王　竞　杨川杰

(河北医科大学第一医院消化内科，河北　石家庄　050000)



胃癌患者血浆microRNA-155的表达及其临床意义

王竞杨川杰1

(河北医科大学第一医院消化内科，河北石家庄050000)

胃癌；微小RNA；miR-155；血浆；肿瘤标记物

早期发现、早期诊断、早期治疗是提高胃癌生存率的重要措施。探索经济有效、安全简便的筛查方法和特异性及敏感性均较好的肿瘤标记物对提高胃癌的检出率具有重要意义。microRNA-155(miR-155)为癌基因B细胞整合集簇(BIC)的表达产物，有研究发现其在结直肠癌、胰腺癌、肝癌等肿瘤中表达增加，其可能参与了肿瘤的发生与发展。本文拟通过检测胃癌及胃炎患者血浆miR-155水平，研究胃癌患者血浆miR-155表达与患者临床病理学特征间的关系，初步探讨miR-155在胃癌发生、发展中的作用。

1　材料与方法

1.1研究对象2011年1～12月在我院住院治疗的胃癌及胃炎患者及期间的健康体检者，分为胃癌组71例，男43例，女28例，平均年龄(63.30±5.62)岁；胃炎组69例，男44例，女25例，平均年龄(62.35±4.64)岁；健康对照组68例，男42例，女26例，平均年龄(62.12±3.53)岁。见表 1。所有病例纳入者均符合世界卫生组织(WHO)在2008年出版的肿瘤病理学与遗传学分类中的诊断标准，并由病理医师再次应用HE切片确诊。

1.2试剂与方法Trizol试剂购自深圳晶美生物工程有限公司，逆转录(RT)试剂盒、qRT-PCR试剂盒、RT引物、内参U6均购自广州锐博公司，SYBY Green 试剂，购自康为世纪公司。确定研究对象后，用依地酸二钠(EDTA)抗凝管收取受试者外周静脉血约2 ml，让血液与管壁的抗凝剂充分接触，4℃条件下，1 600 r/min离心10 min，离心2次获得血浆，将上层血浆分装至无酶EP管中，置入-80℃冰箱储存待用。实验过程严格按照试剂盒说明书进行操作。

1.3血浆miR-155表达量的计算在目的基因与内参照基因扩增效率相同的情况下，以U6为内参照，测定循环阈值(Ct值)，计算△Ct值，△Ct=miR-155的平均Ct值-U6平均Ct值，以2-△△Ct表示miR-155的表达量水平。

1.4统计学处理采用SPSS13.0软件行方差分析。

2　结　果

2.1各组血浆miR-155表达量比较胃癌组、胃炎组及健康对照组血浆miR-155表达量分别为2.06±1.03、1.36±0.08、1.32±1.03，胃癌患者血浆miR-155表达量明显高于其他两组(P<0.05)。胃炎患者与健康成年人无明显差异(P>0.05)。

2.2胃癌患者血浆miR-155表达量与临床特征的关系胃癌患者血浆miR-155的表达量与患者性别、年龄、不同临床分期关系、是否存在淋巴结转移、是否有远处脏器的转移、病理分型间的表达量无明显相关性(P>0.05)，见表1。

表1　血浆miR-155表达量在不同临床病理特征间的比较±s)

3　讨　论

胃癌多无特异性的临床表现，发现时往往已进展到中晚期。因此提高胃癌的早期检出率，是减少病死率、改善患者预后的关键。微小RNA(miRNA)广泛存在于真核生物细胞中，是非编码的单链小分子RNA，长19～24 nt，是一类基因表达转录后调控因子〔1〕，其通过与靶mRNA的3′UTR的碱基互补结合，促进靶mRNA的降解或抑制翻译，参与了细胞的增殖、分化、凋亡以及干细胞自我更新等多种生理过程〔1，2〕。目前研究认为，一些microRNA与肿瘤关系密切，在多种肿瘤的发生、发展及转移过程中发挥着一定作用〔1～4〕，研究表明miRNA在肿瘤中与在正常组织中有不同的表达谱，因此其不但可以作为肿瘤的诊断指标，还可以帮助判断预后〔5〕，发挥着原癌基因或抑癌基因的作用〔6〕。

miR-155是新近发现的与肿瘤密切相关的miRNA，是癌基因BIC的表达产物在多种人类实体恶性肿瘤组织中表达升高。本研究中发现，血浆miR-155在胃癌患者中表达量较高，而在慢性非萎缩性胃炎、健康成人中表达量较低，说明血浆miR-155可能参与胃癌的发生。正如Lee等〔7〕应用miRNA基因芯片技术研究胰腺导管癌、配对的胰腺良性组织、正常胰腺组织及胰腺癌细胞株，结果发现miR-155在胰腺癌、增生组织中表达明显异常，Ryu等〔8〕应用RT-PCR检测了31例胰腺上皮内瘤变组织，miR-155的表达水平较正常组织明显增加的结论一样，miR-155从转录后水平上广泛参与基因表达的调控，其表达的改变可以导致遗传信息表达的改变，从而导致一定的病理状态，导致肿瘤的发生。本研究结果说明miR-155可能与胃癌的进展情况无关。

1Dirks PB.microRNA and parallel stem cell lives〔J〕.Cell，2009；138(2)：424-5.

2Yohei S，Maider Z，Robert WC，etal.Down regulation of miRNA-200c links breast cancer stem cells with normal stem cell〔J〕.Cell，2009；138(2)：592-603.

3Zhang X，Ladd A，Dragoescu E，etal.MicriRNA-17-3p is a prostate tumor suppressor in vitro and in vivo，and is decreased in high grade prostate tumors analyzed by laser capture micro-dissection〔J〕.Clin Exp Metastasis，2009；26(8)：965-79.

4Bhatti I，Lee A，Lund J，etal.Small RNA：a large contributor to carcinogenesis〔J〕?2009；13(7)：1379-88.

5黄伟，孙岩，韩瑞发.MicroRNA与癌症的研究进展〔J〕.天津医药，2009；37(3)：238-40.

6Esquela-Kerscher A，Slack FJ.Nokomis-microRNAs with a role in cancer〔J〕.Nat Rev Cancer，2006；6(4)：259-69.

7Lee EJ,Gusev Y,Jiang J,etal.Expression profiling identifies microRNA signature in pancreatic cancer〔J〕.Int J Cancer,2007;120:1046-54.

8Ryu JK，Hong SM，Karikarri CA，etal.Aberrant miR-155 expression is an early event in the multistep progression of pancreatic adenocarcinoma〔J〕.Pancreatology，2010；10(1)：66-73.

〔2014-12-03修回〕

(编辑赵慧玲/曹梦园)

10.3969/j.issn.1005-9202.2016.14.113

杨川杰(1972-)，女，博士，副主任医师，硕士生导师，主要从事消化道肺瘤研究。

王竞(1978-)，女，主治医师，主要从事消化道肺瘤研究。

R73

A

1005-9202(2016)14-3590-02；

1河北医科大学第二医院消化内科