多指标正交设计优选健脾消积口服液提取工艺

王俊杰，刘 弘

(解放军第152中心医院药械科，河南 平顶山 467000)

多指标正交设计优选健脾消积口服液提取工艺

王俊杰*，刘 弘#

(解放军第152中心医院药械科，河南 平顶山 467000)

目的：优选健脾消积口服液的提取工艺。方法：采用正交试验方法，以挥发油含量为指标，优选陈皮挥发油的最佳提取工艺；以加水量、提取时间、提取次数为考察因素，以橙皮苷转移率、干膏得率为评价指标优选最佳水提工艺。结果：挥发油的最佳提取工艺为8倍量水浸泡10 min，提取7.0 h；最优水提取工艺为8倍水提取3次，1次1.5 h。结论：该工艺实用、可靠，稳定性好，可用于健脾消积口服液的制剂。

提取工艺； 正交设计； 多指标； 健脾消积

健脾消积口服液是由焦山楂、炒六神曲、炒麦芽、陈皮、炒鸡内金、炒莱菔子6味中药组成的复方制剂，是解放军第152中心医院老中医在保和丸基础上加减所得。该方诸药合用，具有健脾和胃、消食化积作用，临床用于停食积乳、胃脘胀满、消化不良等症，多年来的临床疗效显著。为更好地服务于临床、制定科学合理制剂工艺，本研究查阅文献，结合处方中药物药效及有效成分理化性质、中医配伍原则及临床用药特点，采用正交试验设计，以挥发油提取量、橙皮苷转移率与干膏得率为考察指标，优选最佳提取工艺，为质量控制提供依据。

1 材料

1.1 仪器

LC-20AT型高效液相色谱仪，SPD-M20A型二极管阵列检测器，LC solution型色谱工作站(日本岛津公司)，AS3120A型超声波清洗器(天津奥特赛恩斯仪器有限公司)，98-1-B型电子调温电热套(天津泰斯特仪器有限公司)，HH-4型数显恒温水浴锅(常州赛普实验仪器厂)。

1.2 药品与试剂

橙皮苷对照品(中国食品药品检定研究院，批号：110721-201014)；山楂、六神曲、麦芽、陈皮、鸡内金、莱菔子等药材由解放军第152中心医院药房提供，经赵国景副主任中药师鉴定，均符合《中华人民共和国药典》(2015年版)；甲醇、乙腈、磷酸均为色谱纯，水为纯化水，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 挥发油的含量测定

按照《中华人民共和国药典·四部》(2015年版)[1]中挥发油测定法，读取挥发油量。供试品中挥发油含量(%)=挥发油量(ml)/供试品质量(g)×100%。

2.2 橙皮苷的含量测定

2.2.1 色谱条件：查阅相关文献[2-7]，确定色谱条件。色谱柱为WondasilTMC18柱(150 mm×4.6 mm，5 μm)，流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(V∶V=22 ∶78)；流速为1.0 ml/min；柱温为30 ℃；检测波长为283 nm；进样量为10 μl。

2.2.2 对照品溶液的制备：取橙皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇制得质量浓度为380 μg/ml橙皮苷对照品贮备液，精密量取贮备液2.5 ml置10 ml量瓶中，甲醇定容，摇匀，即得对照品溶液。

2.2.3 供试品溶液的制备：取山楂、六神曲、麦芽、陈皮、鸡内金、莱菔子等药材制备健脾消积提取液，精密吸取5 ml，置25 ml量瓶中，加甲醇适量，超声处理5 min，放冷，甲醇定容，摇匀，过滤，滤液用0.45 μm微孔滤膜滤过，即得。

2.2.3 线性关系考察：精密量取橙皮苷对照品溶液2、6、10、14、18、22 μl，按“2.2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积。以对照品进样量为横坐标(x)，峰面积为纵坐标(y)，进行线性回归，得橙皮苷回归方程为y=1 392 668x-8 972(r=0.999 9)，表明橙皮苷进样量在0.19～2.09 μg范围内线性关系良好。

2.3 挥发油提取工艺的正交试验设计

根据查阅相关文献及预试验[8-11]，取陈皮药材30 g，以浸泡时间(A)、加水量(B)、提取时间(C)为考察因素，每个因素拟定为3个水平，选用L9(34)正交表安排试验，见表1。以挥发油含量为考察指标优选最佳工艺，正交试验结果及直观分析见表2，方差分析结果见表3。

表1 挥发油提取工艺因素水平表

表2 挥发油提取工艺正交试验结果

表3 挥发油提取工艺方差分析

注：F0.05(2,2)=19.0

Note：F0.05(2,2)=19.0

结果表明，直观分析各因素影响程度依次是C>B>A，进一步方差分析结果表明，加水量(B)和提取时间(C)对提取工艺有显著影响，而浸泡时间(A)对提取工艺无显著影响。因此，确定A1B2C3为挥发油最佳提取工艺，即以8倍量水浸泡10 min，提取7.0 h。

2.4 挥发油提取工艺验证

取陈皮药材30 g，共3份，按照优选的提取工艺进行重复性验证，挥发油含量分别为2.90%、2.95%、2.93%，结果表明优选的挥发油提取工艺科学、合理、重复性好。

2.5 水提工艺正交试验设计

根据实际生产及相关文献[12-15]，取处方量剩余药材与陈皮药渣，以加水量(A)、提取时间(B)、提取次数(C)为考察因素，每个因素拟定为3个水平，选择用L9(34)表进行试验，见表4。计算提取液中橙皮苷提取量和干膏得率(干膏得率=干膏质量/干膏中所含药材质量×100%)，并对指标进行综合评分。评分时以各指标的最大值为参照将数据进行归一化，再给出不同权重。橙皮苷转移率权重为0.8，干膏得率权重为-0.2。以综合评分值进行统计分析，结果见表5、表6，综合评分Y=0.8X1×100/X1max-0.2X2×100/X2max。

表4 水提工艺因素水平表

表5 水提工艺正交试验结果

表6 水提工艺方差分析

注：F0.05(2,2)=19.0

Note：F0.05(2,2)=19.0

结果表明，由直观分析各因素影响程度依次是C>B>A，方差分析结果表明提取次数(C)对提取工艺有显著影响，而加水量和提取时间对提取工艺无显著性影响，且加水量影响极小可忽略不计。本着节约时间和资源原则，确定A1B2C3为水提最佳工艺，即以8倍水提取3次，每次1.5 h。

2.6 水提工艺验证

取处方量剩余药材与陈皮药渣，按照优选的提取工艺进行重复性验证，平行操作3次，见表7。结果表明，优选的水提取工艺科学、合理、重复性好。

表7 水提工艺验证结果

3 讨论

中药复方制剂成分复杂，在工艺筛选时尽量选择能代表制剂疗效的指标成分反映工艺水平，陈皮性味辛、苦、温，归脾肺经，具有理气健脾、燥湿化痰的功效，可用于脾胃不调等症。结合剂型因素，本研究选取挥发油提取量、橙皮苷转移率及干膏得率为指标，既考察了易挥发成分的提取工艺，又考察了水提工艺，保证口服液的制剂质量。

选用正交试验设计优化提取工艺过程中，在明确药效成分基础上，采用了多指标归一化综合评分法，以橙皮苷转移率和干膏得率为依据，根据对工艺和剂型预期影响大小赋予不同权重，浸膏得率越高则提取杂质越多，后续工艺处理更复杂麻烦，故设定橙皮苷权重为0.8，浸膏得率权重为-0.2，进行加权求和而转化为单一指标进行评价。这种分析方法既保证了数据指标的全面性，又可根据各指标的贡献大小进行权重分配，使分析结果更为科学和客观，优选的提取工艺路线科学、合理，可为健脾消积口服液的大规模生产提供一定参考。

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Optimization of Extraction Technology of Jianpixiaoji Orals by Multi-index Orthogonal Test

WANG Junjie, LIU Hong

(Dept.of Drug and Equipment, No.152 Hospital of PLA, Henan Pingdingshan 467000, China)

OBJECTIVE：To optimize the extraction technology of Jianpixiaoji orals. METHODS: Orthogonal test was adopted, the content of volatile oil was used as the indicator, the opitical extraction technological conditions of volatile oil were optimized. To set the amount of water, extraction time, extraction times as factors, and hesperidin transfer rate and dry extract yield as evaluation indicators, the optimum water extraction process was optimized. RESULTS: The opitical extraction technological conditions of volatile oil were 8-fold water with soaking for 10 min and extracting for 7 h. The optimum water extraction process was 8-fold water with extracting for 3 times, each time for 1.5 h. CONCLUSIONS: The extraction technology is practical and reliable with good stability, and can be used for preparation process of Jianpixiaoji orals.

Extraction technology; Orthogonal test; Multi-index; Jianpixiaoji

R932

A

1672-2124(2017)01-0090-03

2016-08-24)

*主管药师。研究方向：中药剂型及质量标准。E-mail：wangjj152@126.com

#通信作者：副主任药师。研究方向：医院药学研究。E-mail:liuhong152@126.com

DOI 10.14009/j.issn.1672-2124.2017.01.033