CYP17基因多态性和环境暴露因素交互作用与前列腺癌易感性的关系

韦高猛 宾晓芸 黄勇平

(右江民族医学院附属医院泌尿外科，广西 百色 533000)

CYP17基因多态性和环境暴露因素交互作用与前列腺癌易感性的关系

韦高猛 宾晓芸 黄勇平

(右江民族医学院附属医院泌尿外科，广西 百色 533000)

目的 探讨CYP17基因多态性和环境因素暴露交互作用与前列腺易感性的关系。方法 采用病例对照设计，采集128例病例和128例对照的血样，应用聚合酶链-限制性片段长度多态性(PCR-RELP)技术检测外周血细胞色素P450家族17(CYP17)基因型。采用Logistic回归模型进行多因素分析。结果 与对照组相比，饮酒30年以上、吸烟30年以上、饮食中猪肉摄入较多、遗精年龄早于16岁、首次性生活年龄早、35岁以前每周性生活次数多、肿瘤家族史是前列腺癌的危险因素，而经常吃水果、喝绿茶、卷心菜摄入较多是保护因素。基因CYP17的A2/A2多态突变型能够增加前列腺癌发生风险(OR=2.63，95%CI值：1.37～3.58)，且有剂量效应梯度。CYP17基因多态性与首次遗精年龄和家族史因素间存在交互作用。结论 CYP基因多态性、环境相关因素暴露及其交互作用与前列腺癌有相关性。

CYP17基因多态性；前列腺肿瘤；环境因素

细胞色素P450家族17(CYP17)基因与性激素合成密切相关，其5′启动子区的翻译起始点上游的第34个碱基处存在着一个T-C的多态位点，当等位基因A2存在时可导致性激素水平改变，增加前列腺癌易感性〔1〕。目前国内前列腺癌的病因学研究较少，特别是CYP17基因多态性与环境暴露因素的交互作用鲜有报道。本文旨在探讨CYP17基因多态性和环境暴露因素与前列腺癌的关系。

1 对象与方法

1.1 对象 选择2012年3月至2015年4月在我院就诊的前列腺癌住院患者128例，均经组织病理学检查确诊。采用以医院为基础的1∶1病例-对照设计，对照组选择同期入院且与病理组无任何血缘关系的非肿瘤住院男性患者，排除泌尿系统疾病、内分泌系统疾病、严重心脏疾病。两组平均年龄、文化程度、经济收入水平分布无统计学差异(P>0.05)。

1.2 资料收集 通过查阅文献，咨询流行病学专家和临床专业人员，制定统一的个案调查表。根据预调查结果修正问卷条目，培训统一的调查员，采用面对面直接询问的方式进行调查，调查内容包括患者的基本情况、家族史、生育史及饮食习惯等环境相关暴露因素。

1.3 试剂与仪器 基因组DNA提取试剂盒、dNTP、100 bp Marker为华美生物公司产品，Taq DNA聚合酶、限制性内切酶MspA1为Promega公司产品，引物合成由北京赛百盛公司完成，梯度PCR仪购自美国BIORAD公司。

1.4 外周血DNA提取 经知情同意，抽取所有研究对象外周静脉血3 ml，分离白细胞，采用基因组提取试剂盒获得DNA样本，-20℃冻存。

1.5 PCR反应 所有DNA样本混合编号进行实验。CYP17上游引物：5′-CAT TCG CAC TCT GGA GTC-3′；下游引物：5′-AGG CTC TTG GGG TAC TTG-3′。CYP17的反应条件为：94℃预变性10 min，94℃变性30 s；55 ℃退火30 s，72℃ 延伸；共38个循环；72℃延伸5 min。

1.6 酶切反应及基因多态性 CYP17 PCR反应产物纯化后，采用MspA1内切酶消化，2%的琼脂糖凝胶电泳，鉴定酶切产物。酶切产物呈现3种状态，即未切开、部分切开和完全切开，提示存在3种基因型，即A1/A1、A1/A2和A2/A2。

1.7 测序 随机选取3种基因类型PCR产物各2份，进行序列测定，结果用Omiga2.0软件与GenBank中CYP17基因序列比较。

1.8 统计学方法 使用SPSS19.0软件进行χ2检验、Logistic回归分析。

2 结 果

2.1 饮食行为习惯暴露与前列腺癌的关系 饮酒30年以上、吸烟30年以上者前列腺癌发病风险增加，而经常吃水果，喝绿茶能够降低前列腺癌发病风险；饮食中猪肉摄入较多的男性，前列腺癌发病风险增加，而卷心菜摄入较多的男性则发病风险降低。见表1。

表1 饮食行为习惯与前列腺癌的单因素分析(n=128)

2.2 生育史暴露与前列腺癌的关系 首次遗精年龄早于16岁、首次性生活年龄早、35岁以前每周性生活次数多、有肿瘤家族史是前列腺癌的危险因素。见表2。

表2 生育史暴露与前列腺癌的单因素分析(n=128)

2.3 CYP17基因多态性与前列腺癌的关系 CYP17基因频率分布符合Hardy-Weinberg平衡(P=0.18)。病例组CYP17的A1/A1 22例，A1/A2 66例，A2 /A2 66例，A2/A2 40例；对照组A1/A1 23例，A1/A2 70例，A2/A2 25例。基因CYP17的A2/A2多态突变型能够增加前列腺癌发生风险(OR值=2.63，95%CI：1.37～3.58，P=0.014)，且有剂量效应梯度。

2.4 CYP17基因型与环境暴露相关因素的交互作用分析 CYP17基因多态性与首次遗精年龄和家族史因素间存在交互作用，交互作用系数均>1，为放大作用。见表3。

表3 CYP17基因型与环境暴露相关因素的交互作用 分析对前列腺癌发病的影响

3 讨 论

研究发现，饮食中脂肪(特别是饱和脂肪酸)的摄入量与前列腺癌发生的危险性存在相关性，高脂肪、高蛋白饮食的男性，其体内的睾酮水平明显高于低脂肪、高纤维饮食者〔2〕，而睾酮水平的高低在前列腺的生长发育中及前列腺增生及前列腺癌的发生中起着决定性的作用。研究发现〔3〕，脂肪的摄入量与前列腺癌的发病率呈明显正相关，而与碳水化合物、蛋白及食物总热量无关。国内研究发现〔4〕，猪肉、蛋类、牛奶等富含脂肪类食物是中国男性居民发生前列腺癌的重要危险因素。本研究中猪肉的高摄入量是前列腺癌的独立危险因素。Jain等〔5〕研究发现，绿色食物是前列腺癌的保护因素，并且存在一定的剂量-反应关系。本次调查研究发现，水果和卷心菜是前列腺癌的重要保护因素，与仇成轩等〔4〕研究结果相似。

流行病学调查显示前列腺癌具有遗传易感性。梁彩花等〔6〕对广东地区前列腺癌与家族史和婚育史的病因学关联研究显示，有一个一级亲属患恶性肿瘤患前列腺癌的危险是无恶性肿瘤家族的2.25倍。本研究结果也显示，有恶性肿瘤家族史的患者前列腺癌发生风险增加2.34倍。首次遗精是男性进入青春期的标志，本研究结果显示首次遗精年龄和首次性生活年龄较早均为前列腺癌的危险因素。

CYP17基因编码17a-羟化酶，存在三种基因型：A1/A1、A1/A2、A2/A2。由于在CYP17基因5′启动子去碱基序列中存在一个重要的多肽位点，当该点碱基出现T→C改变时，即出现A2等位基因时，则可以增加基因的转录、翻译功能，提高酶的活性，增加性激素的合成，特别是雄性激素水平的升高较为明显。Lunn等〔7〕研究报道，携带A2等位基因的白人中，发生前列腺癌的危险性增加，以平均年龄64岁为界的分组研究的结果也表明，A1/A2和A2/A2基因型均显著增加了前列腺癌的发生。本研究结果显示，CYP17的A2等位基因突变增加前列腺癌的发病危险，并存在一定的量效关系。同时结果表明与雄性相关的遗传特征暴露在前列腺癌的发生发展中起重要作用。

综上所述，CYP17基因多态性与男性前列腺癌发病风险相关，性生活史、饮食行为习惯和遗传因素与前列腺癌存在关联，CYP17基因与肿瘤家族史和首次遗精年龄交互作用增大前列腺癌的发病风险。

1 罗松涛，王应洪，李绪鲲，等.细胞色素P450酶17基因T-34C多态性与前列腺癌易感性关系的Meta分析〔J〕.中国全科医学，2012；15(35)：4097-100.

2 梁彩花，柳 青，周芳坚，等.前列腺癌与生活行为方式病例对照研究〔J〕.中国公共卫生，2007；23(8)：929-31.

3 Whittemore AS，Kolonel LN，Wu AH，etal.Prostate cancer in relation to diet，physical activity，and body size in blacks，whites，and Asians in the United States and Canada〔J〕.J Natl Cancer Inst，1995；87(9)：652-61.

4 仇成轩，施侣元，张惠娟，等.饮食与前列腺癌危险性关系的病例对照研究〔J〕.中国慢性病预防与控制，2001；9(2)：75-7.

5 Jain MG，Hislop GT，Howe GR，etal.Plant foods，antioxidants，and prostate cancer risk：findings from case-control studies in Canada〔J〕.Nutr Cancer，1999；34(2)：173-84.

6 梁彩花，柳 青，周芳坚，等.广东地区前列腺癌发病与家族史和婚育史关系的病例对照研究〔J〕.癌症，2007；26(5)：484-8.

7 Lunn RM，Bell DA，Mohler JL，etal.Prostate cancer risk an polymorphism in 17 hydroxylase(CYP17) and steroid reductase (SRD5A2)〔J〕.Carcinogenesis，1999；20(9)：1727-31.

〔2016-10-21修回〕

(编辑 袁左鸣)

2014年广西自然科学基金项目(2014GXNSFBA118154)

黄勇平(1968-)，男，主任医师，主要从事泌尿外科学研究。

韦高猛(1980-)，男，主治医师，主要从事泌尿外科学研究。

R73

A

1005-9202(2017)05-1156-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.05.053