细胞DNA倍体分析及CYFRA21-1、CEA、CA125水平检测在老年良恶性胸腔积液诊断中的价值

王彩霞 刘崇梅 阳 娟 毛 敏 黄柳炎 毛 霞 陈 萍

(岳阳市一人民医院，湖南 岳阳 414000)

细胞DNA倍体分析及CYFRA21-1、CEA、CA125水平检测在老年良恶性胸腔积液诊断中的价值

王彩霞 刘崇梅1阳 娟1毛 敏1黄柳炎1毛 霞2陈 萍2

(岳阳市一人民医院，湖南 岳阳 414000)

目的 探讨胸腔积液中细胞DNA倍体分析与联合检测CYFRA21-1、CEA、CA125在其良恶性鉴别诊断方面的应用价值。方法 选取80例恶性及70例良性胸腔积液患者，平均年龄(64±3)岁，分别行CYFRA21-1、CEA、CA125检测及细胞DNA倍体分析。结果 恶性胸腔积液组CYFRA21-1、CEA、CA125的含量明显高于良性胸腔积液组(P<0.05)；细胞DNA倍体分析法联合CYFRA21-1、CEA、CA125检测的灵敏性及特异性均高于CYFRA21-1、CEA、CA125的测定(P<0.05)。结论 在胸腔积液良恶性的鉴别诊断方面，细胞DNA倍体分析联合CYFRA21-1、CEA、CA125检测法具有更好的诊断价值。

胸腔积液；细胞DNA倍体分析；CYFRA21-1；CEA；CA125

胸腔积液是临床常见的症状，单凭某一种诊断方法很难对其明确诊断。传统的诊断胸腔积液良恶性的方法是肿瘤标志物的测定或常规细胞学涂片，无论采取哪种方法，都不能对其及时做出明确诊断，而及时诊断胸腔积液的良恶性对临床治疗是至关重要的。本课题拟测定胸腔积液中肿瘤标志物细胞角蛋白19(CYFRA21-1)、癌胚抗原(CEA)及糖类抗原(CA)125的含量，同时对其细胞沉渣进行DNA倍体分析，比较其在诊断良恶性胸腔积液的价值。

1 资料与方法

1.1 一般材料 我院2013年9月至2014年8月胸腔积液患者150例，男79例，女71例，平均年龄(64±3)岁。良性胸腔积液70例，恶性胸腔积液80例，恶性胸腔积液患者均经病理活检或手术明确诊断为肺癌患者，良性胸腔积液为肾衰竭、结核等病人。

1.2 方法 取胸腔积液50 ml，3 000 r/min离心20 min，取上清液联合检测其中CYFRA21-1、CEA及CA125的含量，取细胞沉渣制片，对其进行细胞DNA倍体分析。

1.2.1 胸腔积液CYFRA21-1、CEA、CA125的测定 采用化学发光分析仪及配套试剂盒(均由美国雅培制药有限公司提供)，严格按照仪器及试剂盒的说明书严格操作。

1.2.2 胸腔积液细胞沉渣细胞DNA倍体分析 采用麦克奥迪医疗诊断系统有限公司提供的试剂盒，严格按照说明书操作对细胞沉渣进行特殊染色，并用该公司提供的Motictometer全自动细胞图像分析系统对所有Feulgen染色片进行扫描处理。标本染色质量控制采用标准片作对照。

1.2.3 结果判读 肿瘤标志物CEA≥10 ng/ml，CA125≥35 U/ml，CYFRA21-1≥3.39 ng/ml视为阳性。细胞DNA倍体分析判定标准〔1〕：采用细胞DNA指数(即DI值)判定，在直方图中，DI值有 3 个或更多的异倍体细胞(DI值>2.5)出现为阳性；无DI值>2.5的异倍体细胞出现为阴性。

1.2.4 统计学方法 采用SPSS17.0统计软件进行χ2检验。

2 结 果

2.1 80例恶性胸腔积液及70例良性胸腔积液中CYFRA21-1、CEA、CA125的含量测定结果及细胞DNA倍体分析 恶性胸腔积液中三种肿瘤标志物的含量明显高于良性胸腔积液(P<0.05)。恶性胸腔积液细胞DNA倍体分析阳性率高于良性胸腔积液(P<0.05)。见表1。

表1 两组标本细胞DNA倍体分析及CYFRA21-1、CEA、 CA125的含量比较

与良性胸腔积液比较：1)P<0.05

2.2 单用及联用细胞DNA倍体分析法、CYFRA21-1、CEA、CA125的含量鉴定恶性胸腔积液 细胞DNA倍体分析法分别联合CYFRA21-1、CEA、CA125含量测定法的灵敏性及特异性明显高于单纯CYFRA21-1、CEA、CA125的含量测定法(P<0.05)，细胞DNA倍体分析法联合CYFRA21-1、CEA、CA125含量测定法能提高恶性胸腔积液的灵敏性及特异性，尤其是特异性，可以高达100%。见表2。

表2 单用及联用细胞DNA倍体分析和肿瘤标志物检测对 恶性胸腔积液诊断的灵敏性及特异性〔n(%)〕

1)与单用CYFRA21-1比较；2)与单用CEA比较；3)与单用CA125比较；4)与其他方法比较：P<0.05

3 讨 论

在中国，恶性疾病累及胸膜导致胸腔积液是继肺结核之后的第二大主要原因，明确恶性胸腔积液的原因对治疗恶性胸腔积液是至关重要的，影响恶性胸腔积液患者生存率的最重要的因素是肿瘤的来源〔2〕。胸腔积液在临床是常见的症状，它的出现不仅仅是由恶性肿瘤引起，有些良性疾病，比如肾衰竭、心衰竭，肺结核、胸膜炎等也可以导致胸腔积液。在老年人，主要表现为肺部恶性肿瘤或结核性胸膜炎，及时对胸腔积液做出良恶性的诊断，就可以为临床提供治疗指导。CYFRA21-1是上皮细胞支架蛋白，主要分布在上皮细胞，尤其是单层上皮细胞，在该类上皮来源的恶性肿瘤组织中的含量明显升高〔3〕。CEA升高常见于大肠癌、胰腺癌、胃癌、乳腺癌、甲状腺髓样癌等。但吸烟、妊娠期和心血管疾病、糖尿病、非特异性结肠炎等疾病，15%～53%的病人血清CEA也会升高。CA125最常见于上皮性卵巢肿瘤患者的血清中，其诊断的敏感性较高，但特异性较差。肿瘤标志物多种多样，单一的肿瘤标志物更是没有很好的灵敏性及特异性，临床应用价值有限〔4〕。所以多数学者主张多种肿瘤标志物联合使用，以提高诊断价值〔4～8〕。有学者测定了恶性血清及胸腔积液中CEA的含量明显高于良性组〔3〕，在本课题中，恶性胸腔积液中CYFRA21-1、CEA、CA125的含量明显高于良性胸腔积液，与上述报道一致。细胞DNA倍体分析是近几年迅速发展起来的一种新型技术，在细胞学良恶性诊断方面有着不可替代的优越性，它从DNA水平对细胞进行分析，以直方图和点阵分布图的形式描绘出细胞中非整倍体细胞的个数。但是也有其不足之处，比如扫描结果直接受制片质量的影响，易将玻片上的污点或重叠的细胞核误认为是异型细胞核，所以当出现该情况时，技术员应该重新制片，在显微镜下辨别可疑细胞核。在用该方法检测80例恶性胸腔积液时，出现了61例阳性，19例阴性，19例阴性标本中有17例标本的细胞DNA扫描时发现1-2个细胞DNA异倍体，说明这17例标本中存在异型细胞，只是没有达到该测量方法的阳性判读标准，随着病情的继续发展，或许不久就会成为阳性标本。另外2例标本为阴性，分析原因估计是病人出现了癌栓堵塞淋巴管导致胸腔积液，而积液中的细胞未出现异型。70例良性胸腔积液中有1例出现了阳性，查阅其临床资料，该患者为肺结核患者，可能是该患者的结核杆菌感染导致了间皮细胞的增生活跃，在细胞DNA扫描时误将增生的间皮细胞判读为异型癌细胞。

由此可见，单纯地依靠肿瘤标志物的测定，很难对胸腔积液进行精确诊断。某一种或两种标志物升高时不能武断的诊断为恶性胸腔积液，其浓度没有出现升高也不能武断的诊断为良性胸腔积液。将多种肿瘤标志物联合起来检测，能提高胸腔积液诊断的灵敏性及特异性。细胞DNA倍体分析法也会有个别病例误诊或漏诊，将细胞DNA倍体分析与多种肿瘤标记物联合检测，能最大程度上减少胸腔积液的误诊率及漏诊率。

综上，肿瘤标志物联合细胞DNA倍体分析法检测胸腔积液，能最大程度上提高癌性胸腔积液诊断灵敏性及特异性。

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3 Mizuguchi S，Nishiyama N，Iwata T，etal.Clinical value of serum cytokeratin 19 fragment and Sialyl-Lewis X in non-small cell lung cancer〔J〕.Ann Thorac Surg，2007；83(1)：216-21.

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5 刑桂芝，周秀艳.应用ROC曲线评价血清CA125、CA199和CEA对卵巢癌的诊断价值〔J〕.现代预防医学，2006；36(18)：3592-4.

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7 刘 叙.ADA，CEA，CA153及CA125在胸腔积液诊断中的价值〔J〕.海南医学院学报，2013；19(9)：1270-2.

8 杨桐树，李文辉，孙喜文，等.胸腔积液5种肿瘤标志物联合检测在肺癌诊断中的价值〔J〕.中国卫生检验杂志，2010；30(7)：1602-5.

〔2015-12-29修回〕

(编辑 苑云杰/曹梦园)

湖南省科技厅科技资助项目(2014SK3144)

刘崇梅(1972-)，男，副主任医师，主要从事肿瘤病理学研究。

王彩霞(1980-)，女，主治医师，硕士，主要从事病理诊断技术研究。

R734.2

A

1005-9202(2017)05-1158-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.05.054

1 岳阳市二人民医院 2 岳阳职业技术学院