乳腺浸润性导管癌中Survivin和Caspase3的表达与细胞增殖的关系

郭 通 葛 斌 高睿心 刘 军 陈文静 闫卫刚 王婧欣 史蓬亮 王晓燕

(齐齐哈尔市第一医院乳腺科，黑龙江 齐齐哈尔 161005)

乳腺浸润性导管癌中Survivin和Caspase3的表达与细胞增殖的关系

郭 通 葛 斌 高睿心 刘 军 陈文静 闫卫刚 王婧欣 史蓬亮 王晓燕

(齐齐哈尔市第一医院乳腺科，黑龙江 齐齐哈尔 161005)

目的 检测乳腺浸润性导管癌中生存素(Survivin)和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白(Caspase)3的表达，关注二者在不同临床病理特征中的表达差异及与Ki67标记的增殖指数的关系。方法 84例乳腺浸润性导管癌患者的临床资料及术后蜡块组织作为观察组，16例乳腺增生术后切除的组织作为对照组。应用免疫组化SP法检测两组中Survivin、Caspase3和Ki67的表达。结果 Survivin、Caspase3和Ki67在两组中的表达差异显著。观察组中Survivin、Caspase3和Ki67的阳性率与肿瘤的最大径、组织学分级密切相关，Survivin和Caspase3的阳性率与脉管累犯密切相关。线性相关分析显示观察组中Survivin和Ki67增殖指数呈正相关性，Caspase3和Ki67增殖指数呈负相关。结论 乳腺浸润性导管癌中Survivin和Caspase3异常表达参与病变的形成和进展，二者可以调节Ki67标记的肿瘤细胞增殖。

乳腺浸润性导管癌；Survivin；Caspase3；增殖指数

乳腺浸润性导管癌肿瘤形成和进展过程中呈细胞高增殖状态〔1〕。生存素(Survivin)是凋亡抑制因子(IAPs)的成员，不但抑制凋亡，还参与细胞增殖调控，与肿瘤的进展密切相关〔2,3〕。天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白(Caspase)3是Caspase家族中重要的凋亡执行者之一，其介导的信号传导途径在细胞凋亡过程中发挥作用，Caspase3还具有调控细胞增殖等生物学作用〔4,5〕。本文针对乳腺浸润性导管癌术后组织中Survivin和Caspase3表达进行检测，关注二者在不同临床病理特征中的表达差别及与Ki67标记的增殖指数的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2012年1月至2015年10月我院确诊乳腺浸润性导管癌女性患者84例为观察组，留取临床资料及术后的蜡块组织，并经病理医师确诊。纳入均符合WHO中的诊断标准。年龄37～78岁，平均56.7岁。16例乳腺增生术后切除的组织作为对照组，均为女性，年龄35～68岁，平均52.3岁。

1.2 Survivin、Caspase3和Ki67表达的检测 两组术后均行甲醛溶液固定，常规脱水后石蜡包埋，切取4 μm胶片，Survivin、Caspase3和Ki67的检测应用免疫组化SP法，二氨基联苯胺(DAB)显色，严格按说明书操作，减少误差。

1.3 Survivin、Caspase3和Ki67结果的判断方法 Survivin和Caspase3的阳性部位是细胞质，Ki67的阳性部位是细胞核，以染成棕黄色为阳性细胞，在200倍镜下先选择上皮细胞集中且染色较为明显的区域进行观察，在400倍镜下选择3个视野进行计数，计算阳性率，取平均值，Survivin和Caspase3阳性率以<10%定为阴性，≥10%阳性，Ki67增殖指数以<25%定为阴性，≥25%阳性。

1.4 统计学方法 采用SPSS17.0统计软件进行χ2检验、线性相关分析。

2 结 果

2.1 两组中Survivin、Caspase3和Ki67阳性率的比较 Survivin、Caspase3和Ki67在两组中表达差异有统计学意义(P<0.01)。见表1。

2.2 观察组Survivin、Caspase3和Ki67阳性率在不同临床特征中的比较 观察组中Survivin、Caspase3和Ki67的阳性率与肿瘤的最大径、组织学分级密切相关，Survivin和Caspase3的阳性率与脉管累犯密切相关。见表2。

表1 两组Survivin、Caspase3和Ki67阳性率比较〔n(%)〕

表2 观察组Survivin、Caspase3和Ki67阳性率在 不同临床特征中的比较〔n(%)〕

2.3 观察组中Survivin、Caspase3和Ki67的相关性 观察组中Survivin和Ki67增殖指数呈正相关性(r=0.53,P<0.05)，Caspase3和Ki67增殖指数呈负相关性(r=-0.48,P<0.05)。

3 讨 论

乳腺肿瘤中浸润性导管癌是最常见的一类，肿瘤形成异型腺管，浸润性生长，其分级依靠肿瘤细胞异型性、腺管形成趋势和细胞的核分裂象，因此分级高的肿瘤异型性明显、腺管成分少、核分裂象多，呈现高增殖及较低的分化状态。与凋亡和增殖相关的基因和蛋白参与病变的整个过程〔6,7〕。Survivin是凋亡抑制蛋白家族中最小的成员，包含两个特定的结构：N端杆状病毒IAP重复区域(BIR)单拷贝、C端疏水α螺旋。Survivin 蛋白与中心粒微管蛋白形成有效结合后，Survivin 蛋白能发挥促进细胞增殖的作用〔8,9〕。有研究认为当细胞需要快速增殖时,生长因子大量分泌，激活Survivin的表达，而Survivin蛋白具有C端疏水α螺旋和 N 端 BIR 结构，当 C端螺旋与中心粒结合时，N 端BIR与Caspase3相互作用，使细胞凋亡受阻〔10,11〕。Caspase是一组特异性切割天冬氨酸的半胱氨酸蛋白酶，根据其成员在细胞凋亡过程中扮演的角色分为二类，一类被称为起始者，主要在细胞凋亡早期发挥作用，另一类被称为执行者，在细胞凋亡的晚期发挥作用〔12,13〕。Caspase3是凋亡的执行者，是家族级联反应中最下游的基因。近年研究显示Caspase3除了参与凋亡，还在细胞的分化、肿瘤细胞增殖及放疗的抵抗中发挥作用〔14〕。也有观点认为Survivin可能是Caspase的一种内源性抑制剂〔15〕。

本实验提示Caspase3低表达、Survivin和Ki67高表达是肿瘤形成的促进因素。Survivin和Caspase3异常表达可能对肿瘤的脉管侵犯有一定的促进作用。Survivin在发挥生物学作用时对肿瘤细胞的凋亡进行有效抑制，细胞凋亡程度和数量减少〔16,17〕，此时与凋亡相对应的细胞增殖活跃，肿瘤呈进展状态〔18〕。王亚利等〔19〕研究认为Survivin抗细胞凋亡作用的机制可能是抑制蛋白重复序列分子中的氨基酸残基Trp67、Pro33和Cys84与Caspase3、Caspase7结合，进而抑制Caspase的活性，抑制细胞凋亡，此时对细胞的异常增殖和细胞的恶性转化提供了空间。

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〔2015-12-17修回〕

(编辑 苑云杰)

齐齐哈尔科学技术计划项目(No.SFZD2012103)；齐齐哈尔科学技术计划项目(No.SFZD-2012038)

郭 通(1980-)，男，硕士，副主任医师，主要从事乳腺肿瘤研究。

R737

A

1005-9202(2017)05-1160-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.05.055