肠易激综合征患者肠道目标菌群分析

黄金龙 刘思敏 罗贤宇 梁文豪 邢德刚

(广东药科大学，广东 广州 510006)

肠易激综合征患者肠道目标菌群分析

黄金龙 刘思敏1罗贤宇2梁文豪2邢德刚2

(广东药科大学，广东 广州 510006)

目的 探讨肠易激综合征(IBS)患者与健康者肠道菌群的差异。方法 对46例病患的肠道菌群进行细菌培养，与20例正常健康者肠道菌群进行对比。结果 IBS组和对照组均未找到已知的特异致病菌。IBS组肠道菌群中乳酸杆菌、双歧杆菌的菌落数与对照组相比显著减少，肠球菌的菌落数显著增加(P<0.05)；大肠杆菌、真菌与对照组相比无显著差异(P>0.05)。结论 IBS与肠道菌群失调有相关性，来该院治疗的IBS患者存在肠道菌群失调。

肠易激综合征；肠道菌群

肠易激综合征(IBS)是一种常见的功能性肠道疾病。研究报道，IBS是一种世界范围内的多发病，影响了世界 20%的人口〔1〕。广州的流行病学调查表明用罗马标准判断的有IBS症状者约占人群的5.6%。不但显著降低了这些患者的生活质量，还给社会带来了沉重的经济压力〔2〕。本研究通过传统细菌培养法分析IBS 患者的肠道菌群。

1 资料与方法

1.1 对象 2015年3月至2016年8月在广东药学院第二附属医院消化科门诊就诊的IBS患者46例，采用罗马Ⅱ诊断标准，排除肠道器质性病变。其中男19例，女27例，年龄18～61岁。全部无发热腹泻史、胃肠手术史，未使用过抗生素，无慢性肝病、糖尿病、甲亢病史及小肠或结肠慢性炎症史。对照组为广东药学院第二附属医院体检健康者。

1.2 方法 称取标本，加入生理盐水稀释，标本稀释呈梯度系列10-1、10-2、10-3、10-4、10-5，连同原液共6个稀释度。取上述标本系列稀释液分别接种至大肠杆菌(EMB)、肠球菌(肠球菌琼脂)、真菌(玫瑰红钠琼脂)、双歧杆菌(BBL琼脂培养基)、乳酸杆菌(LBS琼脂)选择性培养基平板上。将BBL、LBS培养基放在35℃、CO2浓度是5%的孵育箱中培养48 h；将EMB、肠球菌、玫瑰红培养基直接放在孵育箱中培养24 h，一般肠杆菌培养18 h。菌落经涂片、革兰染色鉴定，细菌确定后，根据平板上的活菌计数以及稀释度，按照活菌计数公式计算。活菌集落计算公式(CFU/ml)=(标本质量+稀释量)/标本质量×稀释度×菌落个数(或×10)。

1.3 统计学方法 应用SPSS18.0软件进行t检验。

2 结 果

2.1 菌落培养 双歧杆菌和乳酸杆菌属革兰阳性杆菌，中等大肠杆菌，两端圆、无芽孢、着色不均匀，形态呈多样性；肠球菌属革兰阳性球菌，菌体圆形或卵圆形、单个或排列成双；大肠杆菌属革兰阴性，无芽孢、粗短杆状、端呈圆形；真菌菌体圆形或卵圆形，较细菌大、着色不均匀。

2.2 两组肠道菌群比较 两组均是未找到已知的特异致病菌。IBS组乳酸杆菌、双歧杆菌的菌落数显著低于对照组(P<0.05)；肠球菌的菌落数显著高于对照组(P<0.05)；两组大肠杆菌、真菌无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 两组肠道菌群的比较±s)

与对照组比较:1)P<0.05

3 讨 论

IBS潜在的病理生理机制至今尚未完全清楚，但胃肠道动力异常、内脏感觉过敏、脑-肠轴功能改变、轻度炎性反应、精神社会因素和肠道菌群都可能单独或联合发挥作用，加重IBS症状。近年来肠道菌群被认为是影响IBS病理生理的重要因素之一〔3〕。研究表明，IBS患者黏膜菌群和粪便菌群不同于正常人〔4〕。IBS患者不但粪便菌群明显改变，而且不同类型的IBS患者粪便菌群组成也不同〔5～7〕。以往关于IBS患者类便菌群和黏膜菌群的研究中，由于釆取的研究方法、研究对象存在差异，导致研究结果也出现不一致性，甚至有的研究结果相互矛盾〔8〕。地域性差异可能是导致IBS患者肠道菌群出现特异性变化的原因之一，只有明确就诊IBS患者具体的肠道菌群情况，在临床诊治过程中才能采取针对性治疗方案。

本研究中大肠杆菌的变化与Madden〔9〕研究结果一致，与Si等〔10〕研究结果不同。通过分析IBS患者具体的肠道菌群变化，深入探讨肠道菌群与IBS相关性，可以为深入了解IBS发病机制和治疗提供新的思路，也为临床制定治疗IBS具体方案提供实验依据。

1 李 莉，熊理守.肠易激综合征流行病学调查〔J〕.中华消化杂志，2015；35(7)：446-50.

2 尉秀清，陈旻湖，王锦辉，等.广州市居民肠易激综合症及功能性便秘的流行病学调查〔J〕.中华内科杂志，2001；40(8)：517-20.

3 高 峻，李兆中，等.肠易激综合症的病因研究进展〔J〕.国外医学消化系疾病分册，2002；22(2)：87-9.

4 Rajilic-Stojanovic M，Smidt H，de Vos WM.Diversity of the human gastrointestinal tract microbiota revisited〔J〕.Environ Microbiol，2007；9(9)：2125-36.

5 Maxion-Bergemann S，Thielecke F，Abel F，etal.Costs of irritable bowel syndrome in the UK and US〔J〕.Pharmacoeconomics，2006；24(1)：21-37.

6 Kassinen A，Krogius-Kurikka L，Makivuokko H，etal.The fecal microbiota of rritable bowel syndrome patients differs significantly from that of healthy ubjects〔J〕.Gastroenterology，2007；133(1)：24-33.

7 Durban A，Abellan JJ，Jimenez-Hernandez N，etal.Structural alterations of faecal nd mucosa-associated bacterial communities in irritable bowel syndrome〔J〕.Environ Microbiol Rep，2012；4(2)：242-7.

8 Carroll IM，Rjngel-Kulka T，Keku TO，etal.Molecular analysis of the luminal-and mucosal-associated intestinal microbiota in diarrhea-predominant irritable bowel syndrome〔J〕.Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol，2011；301(5)：G799-807.

9 Madden J.The intestinal microbiota and probiotics in irritablebowel syndrome.Scandinavian〔J〕.Food Nutri Res，2004；48(1)：32-6.

10 Si JM，Yu YC，Fan YJ.Intestinal microecology and quality of life in irritable bowel syndrome patients〔J〕.World J Gastroenterol，2004；10(12)：1802-5.

〔2016-11-09修回〕

(编辑 袁左鸣)

广东省科技计划项目资助 (No.2013B021800270)

邢德刚(1969-)，男，教授，主要从事胃肠动力学研究。

黄金龙(1975-)，男，副主任医师，主要从事消化内科研究。

R694.13

A

1005-9202(2017)05-1173-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.05.062

1 广东药科大学临床医学院 2 广东药科大学基础学院