老年慢性支气管哮喘患者血清白细胞介素-12、-18和-35的表达

安文静 冯喜英 关 巍 华 毛 久 太 杜发茂 崔金霞 拉周措毛 李玉红 刘洪千 马维秀 时莹庆张 娜

(青海大学附属医院呼吸科，青海 西宁 810001)

老年慢性支气管哮喘患者血清白细胞介素-12、-18和-35的表达

安文静 冯喜英 关 巍 华 毛 久 太 杜发茂 崔金霞 拉周措毛 李玉红 刘洪千 马维秀 时莹庆张 娜1

(青海大学附属医院呼吸科，青海 西宁 810001)

目的 检测老年慢性支气管哮喘患者血清中白细胞介素(IL)-12、-18和-35的水平，探讨其临床意义。方法 确诊为支气管哮喘的老年患者62例作为观察组，21例健康成人血清标本作为对照组，检测两组血清中IL-12、IL-18和IL-35的表达水平。结果 两组血清中IL-12、IL-18和IL-35的表达差异显著，观察组中IL-12、IL-18和IL-35的表达与病变的不同阶段相关，观察组中IL-12和IL-18具有正相关性，而其他指标间未见明显相关性。结论 老年慢性支气管哮喘患者血清中IL-12、IL-18高表达、IL-35低表达与病变的形成和发展阶段有关。

慢性支气管哮喘；白细胞介素-12；白细胞介素-18；白细胞介素-35

支气管哮喘是以嗜酸性粒细胞、肥大细胞反应为主形成的气道慢性炎症〔1，2〕。白细胞介素(ILs)家族是细胞产生的一类细胞因子，种类较多，其中IL-12、-18被认为是由激活的炎性细胞产生，具有调节细胞增生、分化的作用〔3，4〕。IL-35是IL-12家族的成员，是由IL-12α链P35和IL-27β链EBI 3通过共价结合的异源二聚体，近年研究显示IL-35具有一定的抑制炎症发展的作用〔5，6〕。本文观察慢性支气管哮喘患者血清中IL-12、IL-18和IL-35的表达水平，探讨其临床意义。

1 资料与方法

1.1 临床资料 2013年1月至2015年12月我院支气管哮喘老年患者62例作为观察组。其中男32例，女30例；年龄60～83岁，平均69.9岁；病程5～28年，平均16.3年。诊断符合2008年中华医学会呼吸病学会哮喘学组支气管哮喘防治指南的诊断标准。排除标准：①治疗依从性差；②4 w内使用过类固醇类药物、白三烯调节剂等拮抗剂的患者，③近1个月有上呼吸道感染；④伴有恶性肿瘤的患者。未控制患者26例，部分控制26例，已控制10例。21例健康成人血清标本21例作为对照组，其中男11例，女10例；年龄35～65岁，平均46.9岁。

1.2 IL-12、IL-18和IL-35的检测 两组均常规抽取清晨空腹静脉血3 ml，2 000 r/min离心后，分离血清于-20℃冰箱中冻存。IL-12、IL-18和IL-35的检测应用酶联免疫吸附(ELISA)法，样本均于1个月内集中检测，均由主管技师完成，做好质控工作。

1.3 统计学方法 采用SPSS17.0统计软件进行t检验或方差分析，线性相关分析。

2 结 果

2.1 两组血清中IL-12、IL-18和IL-35表达的比较 两组血清中IL-12、IL-18和IL-35表达差异有统计学意义(P<0.01)。见表1。

表1 两组血清中IL-12、IL-18和IL-35表达的比较

组别nIL-12IL-18IL-35观察组6236.60±12.79414.54±78.91234.61±78.59对照组2112.64±3.91269.55±93.01301.61±60.46t/P值8.27/0.00710.08/<0.0018.75/0.002

2.2 观察组不同病变阶段患者血清中IL-12、IL-18和IL-35表达的比较 观察组不同病变阶段患者血清中IL-12、IL-18和IL-35的表达差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

2.3 观察组IL-12、IL-18和IL-35表达水平的相关性 IL-12和IL-18呈正相关(r=0.48，P=0.047)，而其他指标间未见明显相关性(P>0.05)。

表2 不同病变阶段患者血清中IL-12、IL-18和 IL-35表达的比较

3 讨 论

哮喘是一种气道非特异性炎症性疾病，流行病学显示哮喘病人有家族史者甚多，现已筛查出多个与哮喘有关的候选基因，确定了其染色体定位区域〔7〕。还有观点认为哮喘的病因学研究多集中在过敏、感染和基因易感性三方面哮喘的发病机制中〔8〕。哮喘患者病变形成中会出现Th1、Th2淋巴细胞免疫的失衡，患者体内Th1型细胞应答水平较正常人显著降低，Th2型细胞免疫应答反应显著增高〔9〕。IL-12是重要的前炎性介质，经抗原刺激后的单核细胞和巨噬细胞可以分泌IL-12，对自然杀伤细胞有显著的刺激作用〔10〕，并能促使Th0细胞向Th1细胞分化，进而调节免疫功能和炎性反应〔11，12〕。IL-18是一种炎性相关因子，其生物学功能有多样性，如对机体的细胞免疫、炎症反应、造血的调控等，IL-18还与T细胞、B细胞、内皮细胞、成纤维细胞和骨髓基质细胞等的功能有关〔13，14〕。IL-35主要由Treg分泌，在正常机体中的表达稳定，主要发挥抑制炎性反应及免疫因子活性的负向调节作用〔15〕。有研究认为，IL-35可以抑制炎症反应，并防止过度的自身免疫反应的发生〔16〕。

本研究提示IL-12、IL-18和IL-35三者异常表达可以参与病变的发展过程，由于病变的程度与治疗有关，因此IL-12、IL-18和IL-35异常表达有可能对判断病变程度和病变的发展阶段提供客观指标。IL-12和IL-18二者在哮喘患者中的作用和表达特征均具有一定的协同作用。IL-12和IL-18的协同作用还表现为诱导干扰素的产生，此种作用在诱导炎症反应的同时，可以降低气道的高反应性，即二者在促进炎性级联反应时同时具有促进气道的变应性炎症的改变，即具有双向性的调节功能〔17〕。IL-35是抗炎因子，对于免疫系统和免疫反应有负向调控作用，也可以防止过度的自身免疫反应发生。也有研究显示经抗原递呈的细胞(如树突细胞)受到明显的刺激后，Treg细胞可以分泌大量的IL-35，同时能有效抑制外周血中CD4+和CD8+的T细胞，而Treg细胞主要是通过IL-35来发挥抑制Th17细胞的分化和IL-17等细胞因子的释放，进而发挥免疫抑制的功能〔18〕。Th17细胞作为促炎细胞可以诱导哮喘、自身免疫病的发生，对维持免疫内环境的稳定有重要作用。当IL-35的表达下调后，对Th17细胞的抑制作用减弱，使哮喘的发病呈高风险状态。

1 Freund V，Frossard N.Nerve growth factor (NGF) in inflammation and asthma〔J〕.Revue Des Maladies Respir，2004；21(2)：161-80.

2 王 燕，韩伟忠，范春辉，等.糖皮质激素对哮喘大鼠气道NGF和IGF-Ⅰ表达影响〔J〕.青岛大学医学院学报，2014；50(5)：404-7.

3 刘文东，鲁继荣.哮喘患儿血清IL-12 TGFβ1与IgE水平变化的研究〔J〕.中国当代儿科杂志，2008；10(2)：146-8.

4 Zhang C，Liu DY，Xue YW，etal.The changes of IL-8,IL-10,IL-12 and IgE in serum of patients with asthma〔J〕.J Isotopes，2002；15(4)：238-8.

5 Ma Y，Liu X，Wei Z，etal.The expression of a novel anti-inflammatory cytokine IL-35 and its possible significance in childhood asthma〔J〕.Immunol Lett，2014；162(1)：11-7.

6 Yan L，Pan X，Xiao P，etal.Adenovirus-mediated interleukin-35 gene transfer suppresses allergic airway inflammation in a murine model of asthma〔J〕.Agents Actions，2015；64(10)：767-74.

7 范春辉，程兆忠，韩伟忠，等.NGF对支气管哮喘大鼠气道重塑影响及其机制〔J〕.齐鲁医学杂志，2015；30(2)：173-5.

8 Frossard N，Freund V，Advenier C.Nerve growth factor and its receptors in asthma and inflammation〔J〕.Eur J Pharmacol，2004；500(1-3)：453-65.

9 Wang W，Li P，Chen YF，etal.A potential immunopathogenic role for reduced IL-35 expression in allergic asthma〔J〕.J Asthma，2015；52(8)：1-9.

10 Zhang YL，Luan B，Wang XF，etal.Peripheral blood MDSCs，IL-10 and IL-12 in children with asthma and their importance in asthma development〔J〕.PloS One，2013；8(5)：e63775.

11 Zedan MM，El-Chennawi FA，Fouda AE.Interleukin-12 and peripheral blood invariant natural killer T cells as an axis in childhood asthma pathogenesis〔J〕.Iranian J Allergy Asthma Immunol，2010；9(1)：43-8.

12 Wong CK，Ho CY，Ko FWS，etal.Proinflammatory cytokines (IL-17，IL-6，IL-18 and IL-12) and Th cytokines (IFN-γ，IL-4，IL-10 and IL-13) in patients with allergic asthma〔J〕.Clin Exper Immunol，2001；125(2)：177-83.

13 Xue YN，Zou XD.Correlation of serum IL-16，IL-18 levels and immunoglobulins in children with asthma〔J〕.Chin J Contemp Pediat，2006；8(8)：6-8.

14 Hossny EM，Elsayed SS，Elhadidi ES，etal.Serum interleukin-18 expression in children with bronchial asthma〔J〕.World Allergy Organiz J，2009；2(5)：63-8.

15 Wong CK，Leung TF，Chu IMT，etal.Aberrant expression of regulatory cytokine IL-35 and pattern recognition receptor NOD2 in patients with allergic asthma〔J〕.Inflammation，2015；38(1)：348-60.

16 陈 杰，彭 健，张卓然，等.支气管哮喘患者血清IL-33、IL-35水平及相关性分析〔J〕.国际医药卫生导报，2015；21(12)：1644-7.

17 张惠兰，张珍祥，徐永健.白介素-18与支气管哮喘〔J〕.国外医学·呼吸系统分册，2000；20(3)：113-5.

18 周月朋，李俊杰，李晓东，等.支气管哮喘患儿外周血IL-27、IL-35及EBI3的表达变化及意义〔J〕.解放军医药杂志，2014；26(7)：71-3.

〔2015-12-11修回〕

(编辑 苑云杰)

冯喜英(1962-)，女，主任医师，主要从事呼吸病学研究。

安文静(1981-)，女，硕士，主治医师，主要从事呼吸病学研究。

R562.2

A

1005-9202(2017)05-1184-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.05.068

1 青海省人民医院呼吸科