鄂温克常用药苏都黄连抑菌作用的研究Δ

钢巴特尔 刘 佳 扎 娜 刘志军 王雯雯 天 河 菊 梅 康琪呼

(内蒙古自治区呼伦贝尔职业技术学院，内蒙古 海拉尔 021000)

鄂温克常用药苏都黄连抑菌作用的研究Δ

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(内蒙古自治区呼伦贝尔职业技术学院，内蒙古 海拉尔 021000)

目的：检测苏都黄连的抑菌作用、抑菌浓度及时间，为临床用药及开发奠定基础。方法：采用肉汤稀释法。结果：结果表明苏都黄连对临床常见病原菌有不同程度的抑菌作用。

苏都黄连；药敏试验；抑菌作用

苏都黄连Sudu Coptis chinensis Franch是一种野生植物，是鄂温克族民间治疗感染性疾病的常用植物之一。全草入药，味苦性寒，具有清热解毒、消肿、镇静、止咳、燥脓、祛湿、利尿等功效。目前，苏都黄连的应用局限在呼伦贝尔市鄂温克族民间。主要用于伤风感冒、腹泻、慢性胃炎、胃溃疡等常见病、多发病的治疗。外用可治疗外伤感染、疥疮等皮肤病[1-2]。本研究通过肉汤稀释法(体外抑菌实验)，研究苏都黄连的抑菌范围、抑菌时间及浓度，为开发苏都黄连蒙药价值奠定基础。

1 实验材料

1.1 菌株：化脓性链球菌CICC110464、肺炎链球菌CMCC(B)31001、金黄色葡萄球菌CICC21600、铜绿假单胞菌GDMCC1.2、普通变形杆菌GDMCC1.205、福氏志贺氏菌GDMCC1.238、大肠埃希氏菌GDMCC1.176，以上均属标准株

1.2 药物：苏都黄连，采于7和9月份呼伦贝尔市鄂温克自治区辉苏木及陈巴尔虎旗鄂温克乡地区，全草，制成干品。分别称取100g苏都黄连干品，放入刻度烧杯内，加水煎煮，过滤，并将过滤液加热浓缩至100mL,即成1g/mL的药液。高压灭菌后冷藏备用。

1.3 培养基：双倍肉汤、血清肉汤培养基、肉汤琼脂培养基、血琼脂培养基。

1.4 超净工作台(苏州安泰空气技术有限公司，产品编号：20010406)，立式自动电热压力蒸汽灭菌器(LDZX-40BI型，上海申安医疗器械厂)及其他无菌器材。

2 实验方法

2.1 取84支无菌试管，每42支为1组，分2组，分别观察7月和9月份两个时间段的苏都黄连抑菌作用。

2.2 每6支试管为1排，共分7排，分别观察化脓链球菌、肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌、福氏志贺菌、大肠杆菌的抑菌作用。

2.3 每排每个管加入双倍肉汤0.9mL。

2.4 吸取1g/mL苏都黄连液0.9mL，分别加入每组每排第1管内与0.9mL双倍肉汤打吹均匀，然后吸取0.9mL，向第2管移入与管内0.9mL双倍肉汤打吹均匀。如此连续稀释至第5管，从第5管内吸出0.9mL弃去。第6管作对照。观察化脓链球菌及肺炎链球菌抑菌作用的管内，每管加血清0.1mL。

2.5 每排管内各加1：1000倍稀释的上述菌液0.1mL(使用前将细菌接种在肉汤培养基内培养12～18h),置37℃培养。

2.6 培养6h、12h、24h后，从各管内分别取一接种环培养物，接种在肉汤琼脂培养基及血琼脂培养基上，置37℃培养18～24h后判断结果。

3 实验结果

见表1、表2、表3。

4 讨论

目前，中蒙药体外检测抑菌作用的方法有稀释法、纸片法、管碟法及打孔法等。纸片法、管碟法及打孔法，具有方法简单，易掌握的优点，但精确度不高。稀释法可定量测定中药对细菌、真菌的MIC、最小杀菌浓度(MBC)，测出抗菌中药的最基本的药效学数据[3]。为了排除苏都黄连提取物中的杂质成分、不同酸碱度等影响实验结果的准确性及检测最低抑菌浓度(MIC，)，本次实验采用了操作较繁琐的肉汤稀释法。从实验结果上分析，苏都黄连对乙型溶血性链球菌、肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌、福氏痢疾杆菌及大肠杆菌等临床常见病菌，具有不同程度的抑菌作用和作用特点。苏都黄连对乙型溶血性链球菌和肺炎链球菌的抑菌作用较强，体外作用6h就开始抑菌，12h后达到高峰，一直持续24h。最低抑菌浓度分别为125mg/mL和62.5mg/mL。实验观察的每个时间段，250mg/mL浓度的苏都黄连提取液对金黄色葡萄球菌有较好的抑菌作用。对变形杆菌6h内抑菌作用较强。对大肠杆菌的抑菌作用12h时最强，随着时间的延长抑菌作用逐渐减弱。对于铜绿假单胞菌和福氏志贺菌的抑菌作用较弱。与临床应用的角度分析，苏都黄连较适合于乙型链球菌及肺炎链球菌感染引起的上呼吸道感染、气管炎、肺炎等呼吸系统疾病及其他部位感染的治疗。对于金黄色葡萄球菌化脓性感染、外伤感染及大肠杆菌、变形杆菌感染引起胃肠炎、泌尿系感染等有一定的治疗作用。

表1 苏都黄连6h的抑菌作用结果

表2 苏都黄连12h的抑菌作用结果

表3 苏都黄连24h的抑菌作用结果

注：“-”代表不长菌落；“+”代表生长1～10个菌落；“++”代表生长10～50个菌落；“+++”代表生长50～100个菌落；“++++”代表生长100个以上菌落

实验结果表明，7月和9月份2个不同时间段采集的苏都黄连的抑菌作用基本相同。可以认为7～9月采集的苏都黄连，均有抑菌作用。苏都黄连除上述抑菌作用外，可能还有其他生理方面的作用以及毒副作用，需进一步研究。

[1]扎娜，娜仁高娃.在鄂温克用的苏都黄连[J].中国蒙医药，2006,(2):46.

[2]贾敏如.李星炜.中国民族药志[M].北京:中国医药科技出版社,2005.

[3]张学沛，朱盛山，等.评价中药体外抑菌法的研究进展[J].药物评价研究，2014，37(2):189-190.

2017年1月4日收稿

R292.3

B

1006-6810(2017)04-0037-02

Δ内蒙古自治区高等学校科学研究项目《鄂温克用的苏都黄连抑菌作用的研究》课题。项目编号NJZC376