噻嗪酮在稻米中残留分析方法研究

黄兰淇，陈 秀，张正炜，占绣萍，马 琳



噻嗪酮在稻米中残留分析方法研究

黄兰淇，陈 秀，张正炜，占绣萍，马 琳

(上海市农业技术推广服务中心，上海 201103)

建立了稻米中噻嗪酮残留量高效液相色谱-串联质谱检测方法。在样品中加入乙腈，匀浆提取，经改进的QuEChERS方法净化后过膜上机。以甲醇和水(含0.1%甲酸)为流动相梯度洗脱，电喷雾正离子(ESI+)模式电离，多反应监测(MRM)模式检测，外标法定量。噻嗪酮在0.01~1.0 mg/L范围内线性关系良好，相关系数()≥0.999；糙米中噻嗪酮回收率为89.02%~94.85%，变异系数为4.43%~5.92%；谷壳中噻嗪酮回收率为87.02%~94.35%，变异系数为0.37%~4.16%。最小检出量为2×10－11g，最小检出浓度为0.01 mg/L。该方法操作简单，快速，准确，满足农药残留分析要求。

噻嗪酮；稻米；残留；LC-MS/MS

噻嗪酮是噻二嗪类昆虫生长调节剂，对飞虱、叶婵有特效，具有高活性、高选择性、长残效期的特点，在水稻种植过程中使用广泛，主要防治水稻叶婵、飞虱等害虫[1-2]。噻嗪酮的检测方法主要有气相色谱质谱联用和气相色谱法[3-4]。国内对于噻嗪酮的检测已有报道，胡连英[5]等以丙酮为提取液，经过滤、减压、浓缩后正己烷萃取3次，气相色谱仪测定大米中噻嗪酮残留量。刘檀[6]等以乙腈作为提取液，经氨基固相萃取小柱净化，以弹性石英玻璃毛细管柱为分离柱，用气相色谱电子俘获检测器测定大米中噻嗪酮的残留量。汪芙蓉等[7]采用氯仿/丙酮(体积比2︰1)超声提取，丙酮定容后经气相色谱电子捕获器检测。张永忠等[8]以乙腈为提取液，氨基固相萃取小柱萃取净化后经气相色谱电子捕获器检测。以上文献方法存在提取、净化步骤繁琐，所用溶剂多，时间长等问题，因此本文旨在建立一种科学、快速、简便的，同时能达到定性和定量要求，满足批量稻米中噻嗪酮快速检测要求的高效液相色谱-串联质谱技术。

1 材料与方法

1.1 仪器设备与试剂

Agilent 6460 三重四级杆液相色谱-质谱联用仪(美国Aglient公司)；匀浆机IKA T25(德国IKA公司)；旋涡混合器TYXH-Ⅱ(上海比朗仪器有限公司)；离心机TDL-5-A(上海安亭科学仪器厂)；Milli-Q Advantage A10 (美国Millipore公司)。

噻虫嗪标准品(纯度为98.6%，上海市农药研究所)；C18(博纳艾杰尔公司)；PSA(美国Aglient公司)；硫酸镁(德国CNW科技公司)；乙腈、甲醇均为色谱级(霍尼韦尔公司)

1.2 试验方法

1.2.1 仪器条件

液相色谱条件：色谱柱：Poroshell 120 EC-C18(3.0 mm×100 mm，2.7 m)；柱温：30 ℃；进样体积：2.0 μL；流动相：A相为纯水(含0.1%甲酸)；B相为甲醇；流速：0.4 mL/min；梯度洗脱程序：0~2.0 min，10%B~80%B；2~3 min，80%B~90%B；3~5 min，90%B~95%B；6 min，95%B。

质谱条件：离子源：可加热的ESI源；检测方式：多反应监测(MRM)；扫描模式：正离子扫描；进样体积：2 μL；干燥气温度：300℃；干燥气流量：7 mL/min；雾化气压力：0.28 Mpa；鞘气温度：350 ℃；鞘气流量：11 mL/min；其他质谱参数见表1。

表1 质谱采集离子信息

注：*该离子用于定量

1.2.2 样品前处理

1.2.2.1 样品提取

分别称取10 g糙米/谷壳样品至50 mL离心管中，加入40 mL乙腈，在匀浆机中高速匀浆1 min，再离心2 min后静置，制成待测液。

1.2.2.2 样品净化

采用改进的QuEChERS方法，取4 mL待测液加入到装有300 mg MgSO4，100 mg PSA和100 mg C18的离心管中，涡旋1 min后离心，取3 mL浓缩至近干，用甲醇定容至750 μL，待测。

1.2.3 标准储备液和标准曲线的绘制

准确称取噻嗪酮标准品10 mg(精确至0.01 mg)，用甲醇溶解并定容至10 mL，配成质量浓度1 000 mg/L的标准母液。

标准溶液的配制：取适量的标准母液用甲醇稀释成0.01~1.0 mg/L一系列浓度的标准溶液，上机检测。以每个浓度测得的峰面积为纵坐标，相对应的噻嗪酮标准溶液浓度为横坐标。绘制标准曲线。

2 结果与讨论

2.1 标准曲线绘制

在0.01~1.0 mg/L浓度时，噻嗪酮峰面积与浓度呈良好线性关系(图1)，线性方程=1E+06+82 224，相关系数()≥0.999。最低检测浓度为0.01 mg/L，该方法下噻嗪酮标样保留时间为4.90 min，色谱图如图2所示。

图1 噻嗪酮标准曲线

图2 0.01 mg/L噻嗪酮标样

2.2 提取条件优化

2.2.1 提取溶剂的选择

参考现有文献报道[6,9]，结合QuEChERS方法常用提取溶剂[10]，本文亦采用乙腈作为提取溶剂。

2.2.2 提取方法的选择

对比文献报道[6]，本文采用搅拌匀浆1 min提取方式。糙米和谷壳中添加0.1 mg/L噻嗪酮，由表4可以看出，回收率和变异系数都满足试验要求，且提取时间更短。

2.3 净化方法优化

空白样品中添加噻嗪酮浓度为1 mg/L，糙米和谷壳提取液分别采用改进的QuEChERS(见1.2.2.2)和氨基固相萃取小柱2种净化方法，对比添加回收率(表2、3)，结果表明在改进的QuEChERS净化方法下糙米和谷壳提取液回收率较好，且变异系数满足试验要求，因此本文选择改进的QuEChERS方法净化。

表2 不同净化方法对糙米中噻嗪酮回收率影响

表3 不同净化方法对谷壳中噻嗪酮回收率影响

2.4 添加回收率

采用空白样品添加标准溶液方法，分别向糙米和谷壳中添加一定体积的噻嗪酮工作溶液，使其浓度为0.01、0.1、1.0 mg/L。采用优化后建立的条件进行提取、净化、测定，结果为在添加浓度范围内，糙米中噻嗪酮回收率为89.02%~ 94.85%，变异系数为4.43%~5.92%；谷壳中噻嗪酮回收率为87.02%~94.35%，变异系数为0.37%~4.16%(表4)。这表明该方法可以达到农药残留分析要求。图3为糙米和谷壳中噻嗪酮添加浓度为0.01 mg/L回收样品色谱图。

表4 糙米和谷壳样品中噻嗪酮添加回收结果

图3 谷壳(A)、糙米(B)中噻嗪酮0.01 mg/L添加回收谱图

3 结 论

本文建立了稻米中噻嗪酮残留量快速高效液相色谱-串联质谱检测方法。以乙腈作为提取溶剂，采用搅拌匀浆1 min的提取方式，经改进的QuEChERS方法净化后过膜上机，糙米和谷壳中噻嗪酮回收率和变异系数均符合试验要求。本方法具有操作简单，准确，分析速度快等优点，满足快速检测稻米中噻嗪酮残留分析要求。

[1] 化工部农药信息总站．国外农药品种手册[M]. 沈阳: 化工出版社, 1996.

[2] 韩熹莱．中国农业百科全书: 农药卷[M]. 北京: 中国农业出版社, 1993.

[3] NISHIZAWA H,SHIGEMURA M,SUZUKI T,. Simple cleanup procedure for analysis of buprofezin residues and its metabolite in crops by gas chromatography[J]. Journal of AOAC International, 1994, 77: 1631－1633.

[4] SANTOS TF,AQUINO A,DOREA HS,. MSPD procedure for determining buprofezin,tetradifon, vinclozolin and bifenthrin residues in propolis by gas chromatography mass－spectrometry[J]. An-alytical and Bioanalytical Chemistry, 2008, 390: 1425－1430.

[5] 胡莲英. 气相色谱法测定噻嗪酮在水稻中的残留量[J]. 农药, 1988, 31(1): 43.

[6] 刘檀, 任红波, 陈国峰, 等. 大米中吡虫啉和噻嗪酮残留分析方法[J]. 中国粮油学报, 2012, 27(2): 118－121, 128.

[7] 汪芙蓉, 张家俊, 吴萍, 等. 噻嗪酮—烯啶虫胺在水稻田样品中的残留检测方法[J]. 南京农业大学学报, 2013, 36(6): 128－134.

[8] 张永忠, 刘檀, 任红波, 等. 16%吡虫啉·噻嗪酮可湿性粉剂在水稻田中的残留动态研究[J]. 东北农业大学学报, 2013, 44(4): 88－93.

[9] ANASTASSIADES M, LEHOTAY S J, STAJNBAHER D,Fast and easy multiresidue methodemploy-ing acetonitrile extraction/ partitioning and "dispersivesolid-phase extraction" for the determination of pesticide residues in produce[J]. Journal of Aoac International, 2003, 86(2): 412－431.

[10] 高阳, 徐应明, 孙扬, 等. QuEChERS提取法在农产品农药残留检测中的应用进展[J]. 农业资源与环境学报, 2014, 31(2): 110－117.

The Analytical Method Study of Buprofezin Residues in Rice

HUANG Lanqi, CHEN Xiu, ZHANG Zhengwei，ZHAN Xiuping, MA Lin

(Shanghai Agriculture Technology Extension & Service Center, Shanghai 2017, China )

A method was established for the residue determination of buprofezin in rice by liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS).Buprofezin was extracted by acetonitrile with homogenizedmixing, purified with improved QuEChERS method, filtered through 0.22 μm of organic membrane and injected into LC-MS/MS. The analyte was separated with the mobile phases of water and methanol (containing 0.1% formic acid), detected by MS/MS with positive electrospray ionization (ESI+) in multiple reaction monitoring (MRM) mode, and quantified by external standard method. The correlation coefficient () of buprofezin was not lower than 0.999 in the concentration of 0.01~1.0 mg/L. The average recoveries and coefficient of variations were 89.02%~94.85%, 4.43%~5.92% forrice, and 87.02%~94.35%, 0.37%~4.16% for husk of rice. The minimum detectable amount and concentration was 2×10－11g and 0.01 mg/L. The method is easy, fast and accurate, and meets the requirements of residue analysis of pesticide.

buprofezin; rice; residue; LC-MS/MS

10.16201/j.cnki.cn31-1827/tq.2017.05.10

TQ450.7

A

1009-6485(2017)05-0050-04

黄兰淇(1987—)，女，黑龙江人，农艺师，硕士，主要从事农药残留分析。E-mail: huanglanqi0208@126.com。

2017-06-02。