小龙虾细菌病害研究进展

赵楠，武秀丽，赵桂华,3

（1.江苏农林职业技术学院，江苏 句容 212400；2.句容市人民医院，江苏 句容 212400；3.句容市润泰生物科技有限公司，江苏 句容 212400）

细菌属于原核生物，种类众多，绝大多数对人类有益，极少数可引起动物病害和植物病害，是兼性寄生菌。小龙虾细菌病是最常见、分布最广的一类病害，由许多兼性寄生细菌侵染引起。从小龙虾上分离到的细菌有10属，包括不动杆菌属（Acinetobacter）、气单胞菌属（Aeromonas）、芽孢杆菌属（Bacillus）、枸橼酸杆菌属（Citrobacter）、棒状杆菌属（Corynebacterium）、黄杆菌属（Flavobacterium）、微球菌属（Micrococcus）、假单胞菌属（Pseudomonas）、葡萄球菌属（Staphylococcus）和弧菌属（Vibrio）[1-7]。在一些情况下，在人工养殖场和处于野生状态的小龙虾，细菌感染会导致死亡，特别是在不良水体环境条件下的病死率更高[2-3]。

目前，国内针对小龙虾细菌性疾病的报道较少。病原细菌和所致病害具有多样性，一种细菌可引起多种甲壳动物的疾病，一种疾病也可由多种细菌引起，如肠道细菌性感染有5属细菌引起，细菌性甲壳病和淡水螯虾菌血症分别由3属细菌引起[6]。假单胞细菌（Pseudomonas sp.）可引起肠道细菌性感染和细菌性甲壳病。小龙虾菌血症（Bacteraemia）表现为血管周围的淋巴血管细胞聚合、形成结节[3,7-9]。事实上，任何一种小龙虾病害都不是由单一因素引起的，它与水环境中的多因素有关，故养殖水体是一个复合体。

长期以来，小龙虾的细菌性疾病被认为是小龙虾的次要病害，或者是与养殖环境恶化有关的一类病害，导致人们出现这种看法的主要原因，可能是因为大多数病原菌都是属于碱性寄生细菌的缘故。当养殖池塘环境恶化时，细菌致病力就可能发生变化而导致小龙虾发生各种细菌性疾病。

1 细菌疾病的种类

1.1 肠道细菌性感染

由多种细菌组成小龙虾肠道内的正常微生物菌群，主要有枸橼酸杆菌属（Citrobacter）、假单胞菌属（Pseudomonas）、不动杆菌属（Acinetobacter）、肠杆菌属（Enterobacter）和产碱杆菌属（Alcaligenes）的细菌。当小龙虾受到外界比较强烈的应激性刺激，或者受到环境中某种强毒菌株侵染，就有可能导致其肠道内正常微生物菌群结构发生改变，部分细菌可能会在胃、肠道，甚至肝胰腺中异常增殖，导致肠上皮组织坏死，大部分肝胰腺组织也可能因此而受到损伤[6，10]。

1.2 甲壳病

小龙虾甲壳病与细菌和真菌有关。当外骨骼被侵蚀时可致小龙虾死亡。该病害由气单胞菌属（Aeromonas）、假单胞菌属（Pseudomonas）、黏细菌（Myxobacteria）、枸橼酸杆菌属（Citrobacter）的细菌引起[6,10]。

1.3 烂鳃病

小龙虾鳃表面通常会附着丝状藻类或者革兰阴性菌，还可能存在一些原生生物，在正常情况下，鳃上附着这些微生物不会导致严重后果。但是，小龙虾烂鳃病的发生通常与养殖环境水质恶化有关，如果不采取适当措施控制养殖水质，细菌就会在鳃部大量增殖而导致鳃组织腐烂，直接影响鳃组织对水过滤和对氧气吸收功能，进而导致小龙虾机体缺氧而窒息死亡。

1.4 菌血症

在小龙虾的血淋巴中可以检查到大量弧菌属（Vibrio）、气单胞菌属（Aeromonas）和假单胞菌属（Pseudomonas）的细菌，但是，现在还难以肯定在小龙虾血淋巴中观察到细菌是否意味着就是病原菌，因为小龙虾是并没有显示出任何生病症状。小龙虾菌血症的临床症状只有在濒临死亡的小龙虾中才能观察到，主要表现为患病小龙虾意识丧失，并呈现麻痹状态。其实，即使最有经验的技术人员也难以描述小龙虾“菌血症”的初期临床症状，判断这种疾病还需要依靠患病小龙虾病程的进一步发展[6]。

2 不同细菌引起的病害

2.1 螯虾立克次体（Coxiella cheraxi）

感染小龙虾的类立克次体有两种类型：第一种类型立克次体在小龙虾体内全身分布，属于系统感染，这类立克次体被命名为螯虾立克次体（Coxiella cheraxi），除了感染小龙虾外，也与澳洲淡水龙虾（Cherax quadricarinatus）的大量死亡相关的。第二种类型立克次体仅感染小龙虾肝胰腺上皮，在其他的淡水螯虾中尚未发现[6]。

2.2 螺原体（Spiroplasma）

螺原体是小的、螺旋形细菌，与节肢动物，蜱虫和植物有关，至今已描述40种[13]。螺原体（Spiroplasma spp.）作为雄性昆虫上的微生物，能干扰一些昆虫种群的性别比[14-15]。至今，没有提供证据证明，螺原体能干扰小龙虾的性别比例的实例。在被侵染的小龙虾（P.clarkii）上，螺原体是小龙虾衰弱病的病原；也能引起中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）的颤抖病（tremor disease）。但无法证明淡水蟹把螺原体传播给小龙虾[16]。Bi K等[17]通过分子测序证明，中华绒螯蟹、小龙虾、南美白对虾上螺原体是同一个种，与非凡螺原体（Spiroplasma mirum）有关。在对照传播试验中，细菌连续出现在血淋巴，性腺结缔组织，肠肝胰腺，神经，心脏和腮中[18]；土霉素对小龙虾中的螺原体也有效[19]。

通过16 s rDNA序列分析证明了引起小龙虾患病是螺原体，合成的171 bp PCR产物与中华绒螯蟹螺原体有99%一致，这表明它们之间有很近的血缘关系。

2.3 弧菌属（Vibrio）

引起小龙虾死亡的弧菌（Vibrio spp.）有2种。最小弧菌（Vibrio mimicus）是引起小龙虾死亡的主要病原[20]，而霍乱弧菌（Vibrio cholerae）对小龙虾的致病力弱，病死率低。该病害是系统性侵染，存在于血淋巴中，生病小龙虾除了嗜睡外，没有特殊外部的症状[20-21]。特别是在小龙虾养殖过程中，最小弧菌的一些日博型（ribotypes）菌株经常被分离到，它们都可能是小龙虾的病原菌[21-22]。陈昌福等[6]从患暴发病的小龙虾的肝胰腺中分离到具有高致病力的副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus），通过对养殖现场的调查证明，这种嗜盐性弧菌（=副溶血弧菌）可能是由于养殖业者采用海水小杂鱼喂养小龙虾时带入的；弧菌和其他杆菌的感染也能引起烂鳃病[6]。此外，人们如果摄食被弧菌侵染的未煮熟小龙虾能导致人类的肠胃炎[21]。

小龙虾感染弧菌引起病害症状表现为全身无力、趴边、离岸死亡，发病严重时可导致整个池塘龙虾全部死亡。发病期从4月底开始。

2.4 气单胞菌属（Aeromonas）

在小龙虾养殖环境中，嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）无处不在，它也与鱼类和甲壳类动物的病害有关，偶尔引起人类疾病[23]。该细菌可从健康小龙虾上分离到，被认为是潜在的病原菌[24]。Jiravanichpaisal P等[25]从瑞典生病信号小龙虾（Pasifastacus leniusculus）上分离到嗜水气单胞菌和其他的细菌。随后用肉汤培养细菌，在不同的温度下，把细菌接种到该地小龙虾上后，分离到了细菌的细胞外产物；而其他一些细菌不是引起小龙虾病害的病原菌，但大多数小龙虾死亡与嗜水气单胞菌有关[9]。在22℃的条件下，用嗜水气单胞菌注射小龙虾，6小时开始死亡。被感染的小龙虾组织出现坏死斑，血液鼻窦内血细胞聚集。气单胞菌（Aeromonas caviae）引起出血病、烂眼症、甲壳溃烂病[10]，嗜水气单胞菌感染也能引起肠炎和水肿病、烂尾病和偷死症[6,26]。

大多数小龙虾细菌性病原都是兼性寄生菌，引起的病害种类多、流行时间长、危害大，具有再次侵染。目前国内关于小龙虾细菌性疾病的报道相对较少，研究也不够深入，缺乏细菌感染小龙虾的致病机理、机体组织病理变化、机体免疫学等研究资料。

细菌性疾病的治疗方法与其他水产养殖动物的细菌性病害相同，应正确选用抗生素药物，对症治疗，中草药饲料可有效预防小龙虾细菌病的发生。